所需仪器:
-86℃超低温冰箱
离心机
生物安全柜
电动移液器
CO2培养箱
倒置显微镜
液氮罐
所需试剂:
胎牛血清(FBS)
细胞培养级 DMSO
冻存液:80%FBS+**MSO
无菌 1×PBS pH=7.2
消化液:0.25%胰蛋白酶+0.02%EDTA
异丙醇
所需耗材:
离心管(15ml、50ml)
T-25 细胞培养瓶
一次性无菌移液管(2ml、5ml、10ml)
8ml 冻存管
程序降温盒
操作步骤:
将需要那冻存的细胞从 CO2培养箱中取出,在生物安全柜内,打开培养瓶瓶口,
吸弃瓶内的培养基;
向培养内加入无菌 1×PBS 3ml,黑龙江细胞冻存盒多少钱,之后水平放置培养瓶,旋转震荡培养瓶,使 PBS
能够浸润到培养平面上所都的面积,黑龙江细胞冻存盒多少钱,吸弃 PBS;
重复步骤 2 一次,黑龙江细胞冻存盒多少钱,之后向瓶内加入消化液 1ml,轻微震荡后放入 37℃CO2培养
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1.一种程序降温盒,包括盒盖(I)、盒身(2)和管槽(3),所述管槽(3)置于盒身(2)内,所述盒盖(I)盖于盒身(2 )上且与盒身(2 )螺纹配合,其特征在于还包括连接带(4 ),所述连接带(4) 一端与盒盖(I)连接,另一端与盒身(2)连接。2.根据权利要求I所述的程序降温盒,其特征在于所述盒盖(I)顶部设有向上突出的连接柱(11),所述连接带(4)的两端分别设有套环(41),所述连接带(4) 一端的套环(41)外套于连接柱(11)且与连接柱(11)单自由度转动配合,另一端的套环(41)外套于盒身(2)且与盒身(2)单自由度转动配合。黑龙江细胞冻存盒多少钱杭州科默斯科技有限公司资源是会枯竭的,惟有文化生生不息。
本实施例中,所述盒盖I顶部设有向上突出的连接柱11,所述连接带4的两端分别设有套环41,所述连接带4 一端的套环41外套于连接柱11且与连接柱11单自由度转动配合,另一端的套环41外套于盒身2且与盒身2单自由度转动配合。 作为本实用新型的进一步改进,所述管槽3与盒身2螺纹配合;增加了密封度,防止了异丙醇挥发而导致的冻存效果变差。本实施例中,所述盒身2内下部设有泡沫衬垫5 ;泡沫衬垫5防止管瓶与异丙醇接触,避免造成污染或在管瓶上留下痕迹。本实施例中,所述盒盖I为塑料盒盖,例如高密度聚乙烯盒盖;所述盒身2为透明塑料盒身,例如聚碳酸酯盒身;所述管槽3为塑料管槽,例如高密度聚乙烯管槽;所述连接带4为塑料连接带,例如高密度聚乙烯连接带。后说明的是,以上实施例*用以说明本实用新型的技术方案而非限制,尽管通过参照本实用新型的推荐实施例已经对本实用新型进行了描述,但本领域的普通技术人员应当理解,可以在形式上和细节上对其作出各种各样的改变,而不偏离所附权利要求书所限定的本实用新型的精神和范围。
低温冻存技巧冷冻凝固的过程中,水分会在0℃~-20℃区间形成不同形状的结晶在细胞冻存时“降温速度、冰晶形成量和细胞渗透压改变程度”是冻存成功与否的重要关键。降温速度慢:冰晶由细胞外开始形成,造成胞外渗透压变小,细胞内水份移动至细胞外造成细胞脱水。降温速度快:水分流动时间短,细胞内外渗透压改变程度小,但大量水分留在细胞内造成大量胞内冰晶形成,使得胞器损坏。这些都可能引起细胞损伤、凋亡或坏死,也可能造成复苏后细胞存活率低、细胞形态改变、细胞功能丧失、基因变异等现象。由此可知,适合的冻存条件为“在增加细胞渗透压稳定性的溶液中,以慢到能减少胞内冰晶形成,但也足够快到能预防细胞脱水的降温速度冻存细胞”。杭州科默斯科技有限公司奋力拼搏、精益求精。
细胞冻存有两种方法:传统的方法是利用冷存管处于4℃、 -20℃、 -80℃保存,程序降温方法是利用程序降温盒设定程序由室温降低至-80℃,后再放置到液氮槽中长期保存。程序降温盒的使用注意事项如下:实验室虽然有程序降温冻存盒,但怎么使用一直都搞不明白,我觉得是不是应该把程序降温冻存盒先从-80度移到室温放一段时间(细胞刚开始还没冻的时候就是室温),然后把细胞放进去,再一起移到-80度,这样才能实现程序降温呢? 时间使用长了,感觉里面的液体是不是异丙醇啊,使用时间长了会不会挥发或变质什么的,要不要添加或维护一下呢,还有有一只降温盒因不小心给倾斜让液体流出了部分,要补充吗?杭州科默斯科技有限公司品质服务、无尽追求。黑龙江细胞冻存盒多少钱
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本实用新型在冻存管架上设置多个容纳冻存管的柱形凹腔,一次性冷冻的细胞液较多,便于批量处理,效率较高。降温盒主体内壁固定一层保温棉,避免细胞液温度过快的下降对细胞造成的损伤,同时主体与冻存管架之间加入异丙醇后,可实现-1℃/分的冷冻率,更进一步减缓冷冻时间,实现程序化冷冻,有利于保护细胞,提高存活率。以上详细描述了本实用新型的较佳具体实施例。应当理解,本领域的普通技术人员无需创造性劳动就可以根据本实用新型的构思做出诸多修改和变化。因此,凡本技术领域中技术人员依本实用新型的构思在现有技术的基础上通过逻辑分析、推理或者有限的实验可以得到的技术方案,皆应在由权利要求书所确定的保护范围内。黑龙江细胞冻存盒多少钱
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