常用培养基的制备及注意事项 一、实验目的 了解培养基的配制原理；掌握配制培养基的一般方法和步 骤；了解常见灭菌、清毒基本原理及方法；掌握干热天菌、 高压蒸汽灭菌及过滤除菌的操作方法。 二、实验原理 培养基是人工按一定比例配制的供微生物生长繁殖和合成 代谢产物所需要的营养物质的混合物。培养基的原材料可分 为碳源，常州培养基制备器厂家哪家好、氮源，常州培养基制备器厂家哪家好、无机盐、生长因素和水，常州培养基制备器厂家哪家好。根据微生物的种类 和实验目的不同，培养基也有不同的种类和配制方法。 牛肉膏蛋白胨培养基是一种应用较普遍和较普通的细菌基 础培养基，有时又称为普通培养基。由于这种培养基中含有 一般细胞生长繁殖所需要的较基本的营养物质，所以可供微 生物生长繁殖之用。 干热天菌、高压蒸汽灭菌方法主要是通过升温使蛋白质变性 从而达到杀死微生物的效果。培养基制备器功能强大的加热器，能够迅速加热。常州培养基制备器厂家哪家好

培养基的实验室制备：①概述：培养基和试剂的灭菌通常采用湿热灭菌或过滤灭菌。有些培养基无需高压灭菌,可煮灭菌。如，含亮绿的肠道菌培养基对光和热特别敏感，应在煮沸后快速冷却，避光保存。同样，一些试剂则不需要灭菌，直接使用(参见相关标准或生产厂商的使用说明）。②湿热灭菌;p湿热灭菌在高压锅或培养基制备器中进行。高压霉菌一般采用121℃±3℃霉菌15min。如果培养基的体积超过1000mL，要对灭菌条件进行适当的调整。所有操作均要按照标准和使用说明的规定进行。注：大容量培养基（＞1000mL）灭菌时可能会造成过度加热。加热后应采取适当的方式冷却，防止沸溢。这对大容量培养基和敏感性培养基（如含亮绿的培养基）是非常重要的。常州培养基制备器厂家哪家好培养基既是提供细胞营养和促使细胞增殖的基础物质，也是细胞生长和繁殖的生存环境。

在制备培养基时，通常要考虑以下因素：(1)pH值多数细胞系在pH=7.4下生长得很好。尽管各细胞株之间细胞生长zui*pH值变化很小，但一些正常的成纤维细胞系以pH=7.4～7.7zui 好，转化细胞以pH=7.0～7.4更合适。据报道，上皮细胞以pH=5.5合适。为确定*佳pH值，做一个简单的生长实验或特殊功能分析酚红常用作指示剂，pH=7.4呈红色，pH=7.0变橙色，pH=6.5变黄色，而pH=7.6呈红色中略带蓝色，pH=7.8呈紫色。由于对颜色的观 察有很大的主观性，因而必须用无菌平衡盐溶液和同样浓度的酚红配一套标准样，放在与制备培养基相同的瓶子中。(2)缓冲能力碳算盐缓冲系统由于毒性小、成本低、对培养物有营养作用，因此比其他缓冲系统用得多。在pH值条件下的缓冲能力差。(3)渗透压多数培养细胞对渗透压有很宽的耐受范围，一般常用冰点降低或蒸汽压升高测定。如果自己配培养基，可通过测定渗透压防止称量和稀释等造成的误差。

培养基配制后一般都有沉渣或混浊出现医学，需过滤成清晰透明后方可使用，常用的过滤方法如下：1.液体培养基：液体培养基必须清晰，以便观察细菌的生长情况，常用滤纸过滤，亦可在加热前加入用水稀释的鸡蛋白（1000ml培养基用1个鸡蛋白）在100℃加热后保持60～70℃，40～60分钟，使其不溶性物质附于凝固的蛋白上而沉淀，然后再用虹吸法吸出上清液或以滤纸过滤。2.固体培养基：如系琼脂培养基，于加热融化后需趁热以绒布或两层纱布中夹脱脂棉过滤；亦可用自然沉淀法，即将琼脂培养基盛人铝锅或广口搪瓷容器内，以高压（103.43kPa）蒸汽融化15分钟后，静置高压锅内过夜，次日将琼脂倾出，用刀将底部沉渣切去，再融化即可收清晰的琼脂培养基。分装琼脂斜面培养基时，分装量应以能形成2/3底层和1/3斜面的量为洽当。

培养基（Medium）是供微生物、植物和动物组织生长和维持用的人工配制的养料，一般都含有碳水化合物、含氮物质、无机盐（包括微量元素）以及维生素和水等，有点还添加克菌素、色素、和血清。为方便长期保管，培养基的成分均制成粉末状。使用时再配制成可用的培养基，整个制备过程培养基需要严格的灭菌。目前对培养基灭菌通常使用高压蒸汽法，因为蒸汽具有很强的穿透能力，能够杀死各种微生物，微生物受热死亡的原因，主要是因高温使微生物体内的一些重要蛋白质，如酶等，发生凝固、变性，从而导致微生物无法生存而死。灭菌中加热温度和受热时间与灭菌程度和营养成分的破坏都有关系。培养基制备器保证了配制和灭菌的培养基具有更高的质量，整个过程，在一个设定温度内。常州培养基制备器厂家哪家好

培养基制备器智能温控功能，限度降低分装机噪。常州培养基制备器厂家哪家好

培养基分装仪无菌培养基制备：全自动培养基制备器能够随时随地旳获取已灭菌高质量的培养基。这能够对储藏成品培养皿的空间达到Zda限度的减少，使得对培养皿储存的管理消除，使得高质量的培养基均一性得到保证。为了满足那些需要，全自动培养基制备器被生产出来了，它不仅能够对1-30L培养基进行迅速而温和的灭菌，而且能够对灭菌过程中的时间、温度、压力等参数进行精确监控和控制，从而使所有灭菌的产品都拥有同样的***得到保证。每个人都能方便的操作这台仪器，因为其有直观的图形界面及可编程功能。常州培养基制备器厂家哪家好

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