使用紫外可见分光光度计进行定量和定性分析需注意以下一些问题：1吸光度读数范围：吸光度测量误差在透过率过大或过小时都会变大，为了满足定量分析的误差要求（<5%），在定量分析时要求吸光度应在一定的范围内，直读紫外可见分光光度计卖价，这个范围的具体值与仪器性能有关，主要是与紫外可见分光光度计检测系统噪声大小有关，但通常都在0.1~1.0范围内，如果仪器的档次更低，则范围更窄。根据朗伯比尔定律，影响吸光度大小的因素主要是样品摩尔吸光系数，浓度和比色皿光程。实验中吸光度过大的样品可通过稀释样品使吸光度到所需范围内。如果样品不能稀释，直读紫外可见分光光度计卖价，可以改用光程较小的比色皿减小吸光度。吸光度过小的样品可使用光程较大的比色皿以增大吸光度。外可见分光光度计经不断改进，直读紫外可见分光光度计卖价，又出现自动记录、自动打印、数字显示、微机控制等各种类型的仪器。直读紫外可见分光光度计卖价

紫外分光光度计一般覆盖190nm和380nm波长，通常利用氘灯照明。一些特殊的仪器可以提供满足光子学和半导体研究需要的光谱范围。VarianofPaloAlto公司的CaryDeepUV和HitachiHighTechnologiesofTokyo的U-7000AutomatedVacuumUVSystem就是这样的仪器。

一些仪器具有多种光源供选择：紫外光、可见光和甚至红外光（780nm至3,000nm）。钨灯和卤素灯一般只覆盖可见光部分（大约380nm到800nm）。而氙灯则可以覆盖紫外光和可见光区域。光源和检测方法（LIGHTSOURCESANDDETECTION）分光光度计的光谱也是需要考虑的一个重要因素。实验室研究人员希望省钱购入专门仪器定量核酸、蛋白或者细菌的生长情况。例如AmershamBiosciencesofPiscataway公司的GeneQuantII能在230、260、280、320、595和600nm的波长下测量样品。果果需要更大的灵活性，研究者可以考虑一种更高性能的宽光谱仪器，可以程序性地进行ELISAs分析和比色分析。 化工紫外可见分光光度计仪器紫外可见分光光度计的具体使用方法。

波长小于200nm的紫外光会被空气吸收，只能在真空中传播，因此称为真空紫外(VUV)。因此，普通的UV-Vis吸收光谱仪不能测量200nm以下的信号。如果要测量VUV波段光谱，需要保持光路真空，光谱仪结构会更加复杂，也更加昂贵。①单光束UV：传统的紫外，单光源发射单光束，全程密闭，通过光栅，照射样品，由光电倍增管监测器检测。缺点：测完空白再测试样品，全波段分析时间较长（一般2min）。②比例双光束UV：单光源单光束，全程密闭，通过光栅，加入棱镜，把光分为两束，分别照射样品与空白，再合并光，进入光电倍增管检测器，通过差减法计算结果。好处：空白样品同时检测。缺点：灵敏度下降，全波段分析时间较长

双光束UV：单光源单光束，全程密闭，通过棱镜分出两道光，分别通过一光栅，分别进入各自的光点倍增管检测器。好处：加强灵敏度，同时测量空白与样品。缺点：全波段分析时间较长。全波段UV：单光源单光束，样品与空白暴露在空气中，照射样品，开始进入密闭箱，通过光栅，进入DAD检测器。好处：空白只需要检测一次，如果你愿意一辈子检测这一次都可以。检测样品不密闭，外界光线对其无影响，使用方便且精确。分析任何波段或全波段不到1s。缺点：贵。紫外可见分光光度计是由光源、单色器、吸收池、检测器和信号处理器等部件组成。

紫外可见分光光度计定量、定性分析需注意的问题

重复测定次数和波长扫描速度：对吸光度不是很大的样品，或者狭缝不是很小，这是检测器检测的光信号的强度是比较大的，重复性较好，可选择较少的重复次数。相反，如果样品吸光度很大，狭缝很小，选择较大的重复次数可获得更好的结果。5测定波长间隔：在扫描光谱时需要选择，可根据样品吸收峰的宽度进行选择，峰宽较大时，可选择较大的波长间隔。反之亦反。通常每个正常的吸收峰应该用不少于30个数据点表示出来。 由于玻璃材质会吸收紫外线，所以目前市面上的紫外可见分光光度计都采用石英棱镜。生产紫外可见分光光度计卖价

波长范围越宽的价格越贵;波长准确度及杂散光参数的数值越低，表示性能越好。直读紫外可见分光光度计卖价

当仪器经过长途搬运、受过机械振动或更换光源灯泡后，必须进行波长准确度的检查与校正。粗检同上，其校正方法有：干涉滤光片或镨钕滤光片校正法、利用氘灯的特征发射线校正法。具体步骤可参考仪器使用说明书。关于波长准确度的检查与校正日常在使用分光光度计时，是否要经常进行仪器波长准确度的检查?答案是否定的。当在日常测定中发现仪器测定灵敏度下降，这时才应进行波长准确度的检查，简易的检查方法(粗检)是：仪器开机后，调节波长为580nm，在吸收池座的通光道中插入一张白色卡片纸，若能观察到一长方形的黄色光斑，说明波长准确度属正常范围，否则就应进行波长校正。直读紫外可见分光光度计卖价

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