使用紫外可见分光光度计时需要注意哪些方面？

1、使用的吸收池必须洁净，并注意配对使用。量瓶、移液吸管均应校正、洗净后使用。

2、取吸收池时，手指应拿毛玻璃面的两侧，装盛样品以池体的4/5为度，使用挥发性溶液时应加盖，透光面要用擦镜纸由上而下擦拭干净，检视应无溶剂残留。吸收池放入样品室时应注意方向相同。用后用溶剂或水冲洗干净，晾干防尘保存。

3、供试品溶液浓度除各该品种已有注明外，其吸收度以在0.3～0.7之间为宜。

4、测定时除另有规定外，应以配制供试品溶液的同批溶剂为空白对照，中端紫外可见分光光度计生产厂家，采用1cm石英吸收池，在规定的吸收峰±2nm以内，测几个点的吸收度或由仪器在规定的波长附近自动扫描测定，以核对供试品的吸收峰位置是否正确，并以吸收度MAX的波长作为测定波长，除另有规定外吸收度MAX波长应在该品种项下规定的测定波长±2nm以内。

5、供试品应取2份，如为对照品比较法，对照品一般也应取2份。平行操作，中端紫外可见分光光度计生产厂家，中端紫外可见分光光度计生产厂家，每份结果对平均值的偏差应在±0.5%以内。

6、选用仪器的狭缝宽度应小于供试品吸收带的半宽度，否则测得的吸收度值会偏低，狭缝宽度的选择应以减少狭缝宽度时供试品的吸收度不再增加为准，对于大部分被测品种，可以使用2nm缝宽。 紫外可见分光光度计主要原因是未找到可产生锐线光谱的光源。中端紫外可见分光光度计生产厂家

对于紫外可见分光光度计，由于有双光源(钨灯与氘灯)，为了延长灯的使用寿命，开机自检完成后可以关掉测定时不用的光源灯。紫外可见分光光度计使用中常见问题解析在一般分光光度计的使用说明书上，要求仪器预热时间约20分钟；若是带微处理器的分光光度计，开机后仪器自动进入自检(初始化)状态，约需1O分钟左右。在分光光度计预热这个环节上，很多使用者或多或少存在问题，如开机只预热电路系统(不调节波长、打开吸收池暗箱盖预热等)或认为初始化过程就是预热等等。对带微处理器有自检功能的分光光度计，开机后仪器自检(初始化)结束后，在测定窗口上，设置所需波长值，用一个吸收池装上纯净水置于光路上，调“0000A”后，预热仪器，当仪器显示读数不再变化后即可进行测定。

中端紫外可见分光光度计生产厂家在操作紫外可见分光光度计时，操作人员需要留意一下机器的干燥剂。

紫外-可见吸收光谱为什么有些化合物是有色的，而另一些化合物却没有？共轭与颜色有什么关系？我们必须对光谱中可见光部分和附近的不同波长处的光吸收进行精确测量。商业光谱仪可对光谱中近紫外和可见部分光吸收进行精确测量。

可见光区域的光子能量为36-72kcal/mol，近紫外线区域（至200nm）的能量范围扩展至143kcal/mole。波长小于200nm的紫外线辐射难以处理，因此很少用作结构分析的常规工具。

当一束光照射物质时，上述能量会激发分子电子至更高能量的轨道。下图显示了有机分子中发生的各种电子激发的示意图，其包含六个跃迁。通常，只有三个低能量跃迁是通过200至800nm光的能量实现的，也就是说，能够吸收200-800nm区域光的分子应具有π电子系统和具有未成对电子对的杂原子。这种吸光基团称为生色团。

当样品分子暴露于具有与分子内可能的电子跃迁相匹配能量的光时，电子受光子激发从高的占据分子轨道（HOMO）跃迁到低的未占据分子轨道（LUMO），一些光能将被吸收，所产生的物质称为激发态物质。光谱仪记录吸收波长以及每个波长的吸收程度，所得光谱用吸光度（A）与波长的关系图表示。吸光度通常在0（无吸收）到2（99％吸收）的范围内。

紫外可见分光光度法中的透光率标尺放大倍数，因为高浓度的样品透光率很小，引起较大的透光率读数误差，而示差分光光度法采用比

试样浓度较低的标准溶液作参比溶液，使透光率的读数标尺放大，其读数在透光率的适宜范围（15%~65%）内，可提高测定准确度。

可能是通过吸收定律以及透光率和吸光度的转化来计算。棱镜根据波长将光弯曲至不同程度，可将阳光分离成可见光的组成颜色。波长是光波相邻峰（或谷）之间的距离，可以以米，厘米或纳米（10-9米）表示。频率是每单位时间经过固定波的周期数，通常以每秒周期或赫兹（Hz）的形式表示。可见波长约400-800nm范围内。长的可见波长是红色，短的是紫色。 分光光度分析就是根据物质的吸收光谱研究物质的成分、结构和物质间相互作用的有效手段。

使用紫外可见分光光度计进行定量和定性分析需注意以下一些问题：1吸光度读数范围：吸光度测量误差在透过率过大或过小时都会变大，为了满足定量分析的误差要求（<5%），在定量分析时要求吸光度应在一定的范围内，这个范围的具体值与仪器性能有关，主要是与紫外可见分光光度计检测系统噪声大小有关，但通常都在0.1~1.0范围内，如果仪器的档次更低，则范围更窄。根据朗伯比尔定律，影响吸光度大小的因素主要是样品摩尔吸光系数，浓度和比色皿光程。实验中吸光度过大的样品可通过稀释样品使吸光度到所需范围内。如果样品不能稀释，可以改用光程较小的比色皿减小吸光度。吸光度过小的样品可使用光程较大的比色皿以增大吸光度。紫外-可见分光光度法是利用某些物质的分子吸收200--800nm光谱区的辐射来进行分析测定的方法。环境检测紫外可见分光光度计比较

在选择紫外可见分光光度计之前， 需要了解仪器的基础构架，有哪些地方是消耗品，有想哪些需要维修保养。中端紫外可见分光光度计生产厂家

当仪器经过长途搬运、受过机械振动或更换光源灯泡后，必须进行波长准确度的检查与校正。粗检同上，其校正方法有：干涉滤光片或镨钕滤光片校正法、利用氘灯的特征发射线校正法。具体步骤可参考仪器使用说明书。关于波长准确度的检查与校正日常在使用分光光度计时，是否要经常进行仪器波长准确度的检查?答案是否定的。当在日常测定中发现仪器测定灵敏度下降，这时才应进行波长准确度的检查，简易的检查方法(粗检)是：仪器开机后，调节波长为580nm，在吸收池座的通光道中插入一张白色卡片纸，若能观察到一长方形的黄色光斑，说明波长准确度属正常范围，否则就应进行波长校正。中端紫外可见分光光度计生产厂家

免责声明： 本页面所展现的信息及其他相关推荐信息，均来源于其对应的用户，本网对此不承担任何保证责任。如涉及作品内容、 版权和其他问题，请及时与本网联系，我们将核实后进行删除，本网站对此声明具有最终解释权。