东莞市液相色谱仪案列 东莞市食品添加剂测定案列 亿鑫仪器供

              食品添加剂TBHQ、BHT的HPLC检测方案

1、仪器与试剂

1.1  仪器
　　梯度液相色谱仪
　　C18色谱柱 4.6 mm×250 mm×5 μm
    旋转真空蒸发仪
　　25 ml具塞玻璃离心管

1.2  试剂
　 正己烷：分析纯

乙腈：色谱纯
异丙醇：分析纯

甲醇：色谱纯

乙酸：分析纯

2、色谱条件
　　色谱柱：C18（4.6 mm×250 mm×5 μm）
　　柱温：40℃
　　流动相：1.5%（体积分数）乙酸-甲醇溶液（A），1.5%（体积分数）乙酸-水溶液（B），

洗脱梯度：0m in-5m in，流动相A为30%,5m in-20m in，流动相A从30%线性增至80%, 20 min-30 min，流动相A为80%;
　　流速为：1.0mL/min
　　进样量：25μL
　　检测波长为：280 nm

3、实验原理
　　油脂样品用正己烷溶解，用乙睛提取其中的抗氧化剂。提取液经浓缩后，用异丙醇定容，用带紫外检测器的高效液相色谱仪测定，外标法定量。

4、试样溶液的制备
　　量取样品1g于离心管中，加入5ml乙腈饱和的正己烷盖上盖后于旋涡混合器上充分混匀，再加入10m正己烷饱和的乙腈于旋涡混合器上充分混匀，静置分层，用胶头吸管将乙睛层转人浓缩瓶内，如上操作再用正己烷饱和的乙腈提取两次，合并提取液。

乙腈提取液在40℃下，用旋转真空蒸发器浓缩至约1m L，将浓缩液转至5m L刻度管中，用异丙醇定容至2 mL，用0. 45 um微孔滤膜过滤后进样25 ul测定。

5、抗氧化剂标准溶液谱图

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