棱镜单色器是利用不同波长的光在棱镜内折射率不同将复合光色散为单色光，这种现象称为棱镜的色散作用。常用的棱镜由玻璃或石英制成。可见光范围常采用玻璃棱镜，其色散力强，价格低廉，但是玻璃吸收紫外光，所以不宜用于紫外光区。紫外光范围常用石英作为材料，石英棱镜的工作波长范围为185~4000nm，司法检测紫外可见分光光度计选择，在紫外光区有较好的分辨力，而且也适用于可见光区和近红外光区。棱镜单色器的特点是波长越短，色散程度越好。越趋向长波，色散程度越差，所以，单色器用棱镜的分光光度计，其波长刻度在紫外光区可达到0.2nm，而在长波段，只能达到5nm。紫外分光光度计的单色器是将光源发出的连续光谱分解成单色光，并能准确方便地“取出”所需要的某一波长的光的光学装置，它是光度计的心脏。单色器主要由狭缝、色散元件和透镜系统组成。其中色散元件是单色器的主要部件。常用的色散元件是棱镜，司法检测紫外可见分光光度计选择，司法检测紫外可见分光光度计选择、光栅，或者是两者的组合。

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如何正确使用752N紫外可见分光光度计

A：在使用紫外可见分光光度计时候，设备仪器使用之前，一定需要能够把样品室内存放的防潮剂给拿出来，且在设备正常运转检查时候也不能开启样品室盖；在检查时候需注意比色皿当中的液体要能占总体积的百分之六十六到百分之八十比较好，千万不能让液体太多以至于液体外泄直接腐蚀仪器设备。

当然在进行正常检测时候，也要能确保比色皿干净，当发现内壁上有液滴就许使用专业的纸张给擦拭干净，建议大家千万不要使用手直接擦拭，以免造成对手的伤害。

B：在使用紫外可见分光光度计时，仪器设备在正常运转的时候，一定要严禁把液体溶剂给直接放置于仪器的表层上，如果发现有溶剂液体出现外泄的情况，一定要进行及时的清洁和处理。

C：当使用紫外可见分光光度计检测完毕后，还需要能够及时把比色皿内的液体给妥善处理掉，并还需要能够使用蒸馏水给彻底清洁干净，同时将比色皿进行倒置晾干处理；全部工作完成后还需把设备仪器电源给关闭，再将防潮剂放入到样品室内并做好防尘处理才好。司法检测紫外可见分光光度计选择传统单光束UV紫外测试，测试过程全程封闭，单光束光源只通过光栅直接照射样品，再经光电倍增管检测器检测。

紫外可见分光光度计种类及优缺点对比

单光束UV：传统的紫外，单光源发射单光束，全程密闭，通过光栅，照射样品，由光电倍增管监测器检测。

缺点：测完空白再测试样品，全波段分析时间较长（一般2min）。2比例双光束UV：单光源单光束，全程密闭，通过光栅，加入棱镜，把光分为两束，分别照射样品与空白，再合并光，进入光电倍增管检测器，通过差减法计算结果。

好处：空白样品同时检测。

缺点：灵敏度下降，全波段分析时间较长。3双光束UV：单光源单光束，全程密闭，通过棱镜分出两道光，分别通过一光栅，分别进入各自的光点倍增管检测器。

好处：加强灵敏度，同时测量空白与样品。

缺点：全波段分析时间较长。4全波段UV：单光源单光束，样品与空白暴露在空气中，照射样品，开始进入密闭箱，通过光栅，进入DAD检测器。

好处：空白只需要检测一次，如果你愿意一辈子检测这一次都可以。检测样品不密闭，外界光线对其无影响，使用方便且精确。分析任何波段或全波段不到1s。

缺点：贵。（25W）

使用紫外可见分光光度计进行定量和定性分析需注意以下一些问题：1吸光度读数范围：吸光度测量误差在透过率过大或过小时都会变大，为了满足定量分析的误差要求（<5%），在定量分析时要求吸光度应在一定的范围内，这个范围的具体值与仪器性能有关，主要是与紫外可见分光光度计检测系统噪声大小有关，但通常都在0.1~1.0范围内，如果仪器的档次更低，则范围更窄。根据朗伯比尔定律，影响吸光度大小的因素主要是样品摩尔吸光系数，浓度和比色皿光程。实验中吸光度过大的样品可通过稀释样品使吸光度到所需范围内。如果样品不能稀释，可以改用光程较小的比色皿减小吸光度。吸光度过小的样品可使用光程较大的比色皿以增大吸光度。一般来说，紫外光分光光度计分为单光束和双光束两类。

紫外可见光分光光度计种类及优缺点对比：传统机型：单光束UV、全程密闭、以光栅进行分光，标样和测试样品分别测试，全波段扫描时间至多2min；比例双光束UV：单光束UV，全程密闭、经光栅再经棱镜，全程密闭、标样和测试样品分别测试、测试灵敏度降低，全波段分析时间长。掌握紫外可见光分光光度计基本工作原理：一定频率紫外可见光照射所需要分析的目标样品，引起目标样品中价电子发生跃迁，从而变现随着吸收波长变化而引起光谱变化，形成可供分析数据。

以朗伯-比耳定律(Lambert-beer)为理论基础，特定波长吸收中，吸收程度正比于试样成分浓度，因此，可进行光谱的定性分析。且根据吸收与已知浓度标样比较，能进行定量分析。

我国在1963年开始对紫外可见分光光度计有一般性介绍。中端紫外可见分光光度计比较

按所吸收光的波长区域不同，分为紫外分光光度法和可见分光光度法，合称为紫外-可见分光光度法。司法检测紫外可见分光光度计选择

紫外分光光度计一般覆盖190nm和380nm波长，通常利用氘灯照明。一些特殊的仪器可以提供满足光子学和半导体研究需要的光谱范围。VarianofPaloAlto公司的CaryDeepUV和HitachiHighTechnologiesofTokyo的U-7000AutomatedVacuumUVSystem就是这样的仪器。

一些仪器具有多种光源供选择：紫外光、可见光和甚至红外光（780nm至3,000nm）。钨灯和卤素灯一般只覆盖可见光部分（大约380nm到800nm）。而氙灯则可以覆盖紫外光和可见光区域。光源和检测方法（LIGHTSOURCESANDDETECTION）分光光度计的光谱也是需要考虑的一个重要因素。实验室研究人员希望省钱购入专门仪器定量核酸、蛋白或者细菌的生长情况。例如AmershamBiosciencesofPiscataway公司的GeneQuantII能在230、260、280、320、595和600nm的波长下测量样品。果果需要更大的灵活性，研究者可以考虑一种更高性能的宽光谱仪器，可以程序性地进行ELISAs分析和比色分析。 司法检测紫外可见分光光度计选择

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