广州市液相色谱仪 广州市烟酸检测色谱仪  亿鑫仪器供​  

                             饲料中烟酸的测定

1  仪器及试剂

1.1仪 器

1). 分析天平一台（精度0.1mg）；

2). 超声波清洗机一台；

3). 溶剂过滤器（含泵）一套；

4). 微量进样器（100µl）一支；

5). 离心机一台；

6). 等度高效液相色谱仪；

1.2试 剂

1). 实验使用水；

2). 甲醇，色谱纯；

3). 三乙胺；

4). 冰乙酸；

5). 己烷磺酸钠；

6). 烟酸标准品：含量≥99%；

7). 烟酸标准贮备液；

8). 烟酸标准工作液；

1.3  标准溶液配制

烟酸标准贮备液：称取经过干燥的烟酸标准纯品25.0 mg，置于250ml棕色容量瓶中，用移动相溶解，稀释至刻度，于冰箱保存，可放置一周。

烟酸标准工作液液：准确吸取烟酸标准贮备液10ml用流动相稀释至50ml或100ml标准溶液置于带盖小瓶贮存，供液相色谱仪分析用，当日使用。

提取液：取500ml离子水，加10ml乙酸，1.3ml三乙胺，用去离子水定容至1L，此时pH为3.2，过0.45 µm滤膜，取上述溶液850mL与150ml醇混合。

2%的乙腈磷酸缓冲液：称取4.84 g 的磷酸氢二钾，9.82g 磷酸二氢钾溶于去离子水中，加20 ml乙腈，用去离子水定容至1 L，混匀用20%氢氧化钾调节pH至6.5。

碳酸钠溶液:c(Na2CO3)=0.1 mol/L。

2  样品制备

称取试样维生素预混料0.5-1g或复合预混料1-5g精确至0.0001g。置于100ml的棕色容量瓶中，加入10ml碳酸钠溶液，浸湿试样加70ml提取液混匀，于超声波水浴中振荡提取15min，用提取液定容至刻度，混合均匀，过滤或离心。再经0.45µm滤膜过滤，进样测定。

3  色谱条件

色谱柱： C18色谱柱　250mm×4.6mm×5μm；

流动相：2%的乙腈磷酸缓冲溶液；

流速：1.4mL/min；

温度：室温；

进样量：20μL；

检测波长：280nm。

4  色谱图

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