荧光免疫测定技术的概念
将试剂抗原或试剂抗体用荧光素进行标记,试剂与标本中相应的抗体或抗原反应后,测定复合物中的荧光素,这种免疫技术,称为免疫荧光素技术。
技术分类
荧光抗体技术(荧光显微镜技术):抗原抗体反应后,利用荧光显微镜判定结果的检测方法。
免疫荧光测定技术:抗原抗体反应后,利用特殊仪器测定荧光强度而推算被测物浓度的检测方法。
荧光的产生
物质吸收外界能量而进入激发状态,在恢复基态时多余的能量以电磁辐射的形式释放,即发光,这种光称为荧光。这种物质,称为荧光素,青海干式免疫荧光分析仪品牌。 由光激发所引起的荧光,为光致荧光------荧光免疫技术 ; 由化学反应所引起的荧光,为化学荧光------化学发光技术。
荧光素的荧光特性
停止供能,青海干式免疫荧光分析仪品牌,荧光现象随即终止。
对光的吸收和荧光的发射具高度选择性,青海干式免疫荧光分析仪品牌。入射光波长<发射光波长。
荧光效率: 发射荧光的光量子数
荧光效率=---------------------------
吸收光的光量子数荧光免疫自动化分析是将抗原抗体结合反应与荧光物质发光分析和计算机技术有机结合的自动化免疫分析技术。青海干式免疫荧光分析仪品牌
免疫荧光技术是将免疫学方法(抗原抗体特异结合)与荧光标记技术结合起来研究特异蛋白抗原在细胞内分布的方法。将试剂抗原或试剂抗体用荧光物质进行标记,试剂与标本中相应的抗体或抗原反应后,测定复合物中的荧光物质,这种免疫技术,称为免疫荧光技术。
检测原理:免疫荧光层析法
检测模式:定量分析
样本类型:血清、血浆、全血、尿液、末梢血
样本用量:≥5ul(CRP血清/血浆5ul,全血8.5ul,HbA1c10ul,NGAL血清、血浆、尿液10ul,全血20ul,VD200ul,PCT/CRP血清、血浆50ul,全血85ul,其余100ul)
检测速度:单次检测<5S
检测时间:3-15min快速出结果
结果存储:>10000个样本
LIS 系统:单双向LIS系统 青海时间分辨免疫荧光分析仪代理商内置大容量存储数据库,可随时分类查询已测项目。
免疫荧光是一种将抗原抗体结合反应与生物标记技术相结合的技术,在科研及临床上有着较广应用。普通的免疫荧光技术在对抗原含量进行测定时存在一定的局限性,在生物流体和血清中的许多复合物和蛋白本身就可以发荧光,用普通荧光素来检测生物样品时,蛋白质本身产生的荧光会对实验产生干扰,实验检测的灵敏度严重下降。为了解决这一问题,1983年SOINI和KOJOLA提出以镧系元素标记为示踪螯合物和荧光测量相结合,建立了时间分辨荧光分析技术。时间分辨方式的免疫荧光分析方法可以对蛋白质、酶以及同位素等物质进行标记,并且不再受检测物种自然荧光的干扰。
时间分辨荧光免疫分析的原理:时间分辨荧光免疫分析的原理就是使用三价稀土离子(如Eu3+、Tb3+、Sm3+、Dy3+)作为示踪物,通过这些稀土离子与具有双功能结构的螯合剂以及抗原形成稀土离子-螯合剂-抗原螯合物。当标记抗原、待测抗原共同竞争抗体,形成免疫复合物,由于免疫复合物中抗原抗体结合部分就含有稀土离子,当采取一些办法将结合部分与游离部分分开后,利用时间分辨荧光分析仪,即可测定复合物中的稀土离子发射的荧光强度,从而确定待测抗原的量。正常情况下,免疫复合物中的稀土离子自身荧光信号很微弱,若加入一种酸性增强液,稀土离子从免疫复合物中解离出来,和增强液中的β-二酮体、三正辛基氧化膦、Triton X-100等成分形成一种微囊。后者被激发光激发后,则稀土离子可以发出长寿命的极强的荧光信号,使原来微弱的荧光信号增强将近100万倍。采用时间分辨技术测量荧光,采用了门控技术,它是使背景荧光信号降低到零以后,再测定长寿命标记物的荧光。 免疫荧光细胞化学技术的主要缺点是非特异性染色问题尚未完全解决,结果判定的客观性不足,技术程序也较复杂。
时间分辨技术,即各种组织、蛋白或其他化合物在激发光的照射下都能发出一定波长的荧光,如血清蛋白可发射出短波长的荧光(激发光波长280nm,发射光波长320~350nm),胆红素发出波长较长的荧光(激发光波长330~360nm,发射光波长430~470nm),这些荧光为非特异性荧光,干扰了荧光免疫测定的灵敏度和特异性,但它们的荧光寿命一般在1~10ns,不超过20ns。而镧系元素的荧光寿命为10~100µs,时间分辨荧光免疫分析技术(time resolved fluorescence immunoassay,TRFIA)利用这一特征,待血清、溶剂和其它成分的短寿命背景荧光完全衰变后,再测量镧系元素的特异性荧光,有效地排除了非特异荧光的干扰,极大地提高了分析灵敏度。 LED光源波长:630nm~640nm(滤光片波长可跟据需要定制)。广东时间分辨免疫荧光分析仪批发价
以荧光抗体方法较常用。青海干式免疫荧光分析仪品牌
偶联生物素—亲和素系统的酶免法利用了一个亲和素分子可以与4个生物素分子结合的特性,使传统的灵敏度较高的酶免法的灵敏度又有明显的放大作用。时间分辨荧光免疫分析时间分辨荧光免疫分析(Timeresolved Fluoroimmunoassay,TRFIA)是一种非同位素免疫分析技术,它用镧系元素标记抗原或抗体,根据镧系元素螯合物的发光特点,用时间分辨技术测量荧光,同时检测波长和时间两个参数进行信号分辨,可有效地排除非特异荧光的干扰,极大地提高了分析灵敏度。青海干式免疫荧光分析仪品牌
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