胶体金标记蛋白质影响因素：胶体金与蛋白质之间是通过正负电荷之间存在的范徳瓦尔引力相结合的，胶体金颗粒与蛋白质分子之间无共价键联系。胶体金标记蛋白质过程属于物理过程，标记体系的pH值、离子浓度及二者的比例等均可影响标记效果，西藏胶体金快速定量读数仪零售价格，一般情况下，当胶体金pH值接近或大于蛋白质等电点时，胶体金对蛋白质的吸附力强。反之，当胶体金pH值低于蛋白质等电点时，则会凝集而失去结合能力。如在标记葡萄球菌A蛋白（SPA）时，SPA等电点是pI5.1，胶体金的pH值可选择在pH5.9-6.2。标记单抗时，胶体金的pH值适宜在pH8.2。对于含有多种大分子蛋白的样品，如多价抗体的标记，实际上很难满足体系中各种蛋白分子的等电点的要求。为了取得较好的标记条件，可先将标记蛋白用低于pH9.0的缓冲液透析，西藏胶体金快速定量读数仪零售价格，胶体金的pH值调在pH9.0进行标记。影响胶体金标记蛋白质是否成功的另一个重要因素是胶体金与标记蛋白质的用量比例，西藏胶体金快速定量读数仪零售价格。通常蛋白质的用量取决于胶体金的颗粒大小，金颗粒直径越小，金颗粒所具有的总表面积就越大，可吸附蛋白质的量也就越大。应能区分反射率差值不大于0.01的一对质控条。西藏胶体金快速定量读数仪零售价格

蛋白质适用量的选择：胶体金与标记蛋白用量之比的确定：根据待标记蛋白的要求，将胶体金调好pH之后，分装10管，每管1ml.将标记蛋白（以IgG为例）以0.005Mol/LpH9.0硼酸盐缓冲液做系列稀释为5µg/ml～50µg/ml，分别取1ml，加入上列金胶溶液中，混匀。对照管只加1ml稀释液。5min后，在上述各管中加入0.1ml10％NaCl溶液，混匀后静置2h，观察结果。结果观察，对照管（未加蛋白质）和加入蛋白质的量不足以稳定胶体金的各管，均呈现出由红变蓝的聚沉现象；而加入蛋白量达到或超过低稳定量的各管仍保持红色不变。以稳定1ml胶体金溶液红色不变的低蛋白质用量，即为该标记蛋白质的低用量，在实际工作中，可适当增加10％～20％。将待标记的蛋白质储存液作系列稀释后，分别取0.1ml(含蛋白质5～40ug)加到1ml胶体金溶液中，另设一管不加蛋白质的对照管，５分钟后加入0.1ml10％NaCl溶液，混匀后静置２小时，不稳定的金溶胶将发生聚沉，能使胶体金稳定的适合蛋白量再加10％即为标记蛋白量。 陕西多通道胶体金读数仪定制胶体金免疫层析(GICA)技术是20世纪90年代初在免疫渗滤技术基础上建立的一种简易快速的免疫学检测技术。

HCG金标免疫试验：金标免疫试验的原理将氯金酸(HAuCl4)用还原法制成一定直径的金溶胶颗粒(胶体金)标记抗体，(或金黄色葡萄球菌A蛋白SPA)。金标为一种催化剂，经还原剂(如对苯二酸)处理，将显影剂中的银离子还原成不溶性金属银，沉淀在每个金颗粒的周围，银沉淀在光镜下可清楚地显示。滴金免疫实验原理同一般免疫斑点实验，也是用已知抗原或抗体包被硝酸纤维素膜，再用金标记抗体或抗原进行快速测定。临床应用的有两种方法：金标一步法(层析法)和金标二步法(斑点渗漏法)。

标记方法的调试：为了开发、优化单一标记的胶体金结合物，研究人员通常制备小批量的多达60批次的不同胶体金结合物。每批次胶体金结合物在某一关键制备步骤上都与其它不同，各批次都被测试从而确定哪种标记技术的检测分析可能获得较好的反应结果。这类调试应该包括所有可以改善胶体金结合物的灵敏度、交叉反应以及潜在稳定性的技术参数。典型的测试应包含但不应限于抗体工作缓冲液、防腐剂的类型、盐度、表面活性剂含量、胶体金颗粒的尺寸、封闭剂的类型、总蛋白浓度、结合物工作缓冲液以及结合物的浓度。为了确定不同封闭剂的效果，建议考虑以下调试内容：封闭剂的类型（如酪蛋白、BSA、卵清蛋白、人血清白蛋白、PEG、非特异性IgG）；封闭剂的纯度封闭剂的含量；封闭剂对整个测试反应的兼容性。

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继三大标记技术（荧光素、放射性同位素和酶）之后，一种固相标记免疫测定技术--免疫胶体金技术（Immune colloidal gold technique, ICG）逐渐发展起来。它是以胶体金作为标记物，利用抗原抗体特异性反应，对抗原或抗体物质进行定性乃至定量研究的标记技术。近年来，该技术因其操作简便、观察直观、灵敏度高、价格低廉等优点在医学、动植物检疫以及食品安全监督等各领域均得到了多方面的应用。胶体金即金的水溶液，是指分散相粒子直径在1-100 nm的金溶胶。由氯化金溶液在还原剂作用下，金离子还原成金原子，从而凝合形成特定大小的金颗粒，因其中正负离子组成胶粒的双电子层结构，从而使溶胶处于稳定状态，故称胶体金。 胶体金标记，实质上是蛋白质等高分子被吸附到胶体金颗粒表面的包被过程。西藏胶体金快速定量读数仪零售价格

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金标记方法学特点及质量控制：特异性与ELISA相似，敏感性略低于ELISA。定性检测时单个操作(NC膜条或NC反应块)、检测快速(胶体金本身为红色，不需加发色试剂，阳性反应即出现红色斑点或条带，整个操只需5—30分钟)、操作简便(蘸取或滴加标本、试剂即可)、不需特殊设备(手工)、结果明确(显红色，肉眼观察)，且金标记物稳定，冷冻干燥后可在室温长期保存。金标记方法学尤其适合个人保健、床边检测、基层卫生单位检测、急诊检验、新项目小标本量筛查等。 西藏胶体金快速定量读数仪零售价格

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