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中国香港单通道胶体金读数仪 信息推荐 无锡天纵易骏生物科技供应

信息介绍 / Information introduction

应用在制备免疫金结合物的特异性抗体的稳定性主要取决于检测试验的技术条件。对于侧向层析分析,比较好的抗体形式是采用一般的单克隆配对。在这类检测分析中,一种单克隆抗体被标记胶体金作为指示剂,而另一种被固定于硝酸纤维素膜上作为捕获剂。每种抗体对于抗原表面的不同反应决定簇都应该是特异识别,中国香港单通道胶体金读数仪,并且这些抗原决定簇在空间结构上距离较远。多克隆抗体也可以被使用,但至少是必须经过protein-A柱层析纯化。在多数情况下,抗体经亲和层析纯化后能制备出具有较高灵敏度和特异性的结合物。这当然取决于符合试验检测可接受交叉反应的技术要求。亲和层析纯化硫酸铵沉淀法或DEAE纯化的血清,含有大量的杂蛋白将竞争性结合胶体金颗粒表面的结合位点。这些杂蛋白拥有高含量的控制蛋白与胶体金结合的三种氨基酸残基,很容易与裸露的胶体金颗粒结合。出现这种情况时,检测系统中指示剂的灵敏度水平降低。如果采用经A蛋白或G蛋白柱层析纯化的抗体,然后IgG片段中可能含有大量的非特异性的IgG,而不是需要的特异性IgG.所有的IgG将与胶体金结合,中国香港单通道胶体金读数仪,中国香港单通道胶体金读数仪,结果可能是低灵敏度。 胶体金标记,实质上是蛋白质等高分子被吸附到胶体金颗粒表面的包被过程。中国香港单通道胶体金读数仪

标记:胶体金与蛋白质(IgG)的结合:将胶体金和IgG溶液分别以0.1Mol/LK2CO3调pH至9.0,电磁搅拌IgG溶液,加入胶体金溶液,继续搅拌10min,加入一定量的稳定剂以防止抗体蛋白与胶体金聚合发生沉淀。常用稳定剂是5%胎牛血清(BSA)和1%聚乙二醇(分子量20KD)。加入量:5%BSA使溶液终浓度为1%;1%聚乙二醇加至总溶液的1/10.在接近并略为高于蛋白质等电点的条件下标记是比较合适的,在此情况下蛋白质分子在金颗粒表面的吸附量大。步骤:①用0、1mol/LK2CO3或0.1mol/LHCl调节金溶胶至所需pH(标记SPA时调到pH6.0)。②于100ml金溶胶中加入合适标记量的蛋白质溶液(体积为2~3ml),搅拌2~3分钟。③加入5ml1%PEG20000溶液。④于10000~100000g离心30~60分钟(根据粒径大小选择不同离心条件),小心吸去上清液(切忌倾倒)。⑤将沉淀悬浮于一定体积含0.2~0.5mg/mlPEG20000的缓冲液中,离心沉淀后,再用同一缓冲液恢复,浓度以A1cm/540nm=1.5左右为宜,以0.5mg/ml叠氮钠防腐,置4℃保存。⑥包被后的金溶胶也可浓缩后于SephadexG-200柱进行凝胶层析分离纯化,以含0.1%BSA的缓冲溶液洗 通常用IgG包被的金溶胶洗脱液pH为8.2,以A蛋白包被的金溶胶洗脱液为pH7.0 上海胶体金读数仪报价CRP项目,有证参考物质浓度范围在5μg/mL~9μg/mL时,相对偏差≤±10%。

胶体金的稳定性及免疫胶体金的贮存:胶体金具有很高的动力学稳定性,在稳定因素不受破坏时自身凝聚极慢,可放置数年不发生凝聚。影响稳定的因素主要有电解质、溶胶浓度、温度、非电解质等。金溶胶必须有少量电解质作稳定剂,但浓度不宜过高。高浓度亲水性非电解质能剥去胶粒外面的水化膜使其凝聚。少量的高分子物质促使溶胶凝聚,但一定量的高分子物质反而可增加溶胶稳定性,如蛋白质、葡萄糖、PEG20000 等的加入有良好的稳定效果。当金溶胶吸附蛋白质后,溶胶的稳定性随溶液pH 而变化,而这种变化又取决于吸附蛋白质的等电点,如ConA ,过氧化物酶等,当pH 较低时保持稳定,提高pH 则显得不稳定,接近等电点或略高时又变得稳定了。标记后的胶体金溶液可用0.2 ~0.5mg/ml PEG20000 作为稳定剂。在4 ~10℃ 贮存数月有效,不宜冰冻。

蛋白质的处理:胶体金标记蛋白的制备:胶体金对蛋白的吸附主要取决于pH值,在接近蛋白质的等电点或偏碱的条件下,二者容易形成牢固的结合物。如果胶体金的pH值低于蛋白质的等电点时,则会聚集而失去结合能力。除此以外胶体金颗粒的大小、离子强度、蛋白质的分子量等都影响胶体金与蛋白质的结合。待标记蛋白溶液的制备将待标记蛋白预先对0.005Mol/LpH7.0NaCl溶液中4℃透析过夜,以除去多余的盐离子,然后100000g4℃离心1h,去除聚合物。待标胶体金溶液的准备以0.1Mol/LK2CO3或0.1Mol/LHCl调胶体金液的pH值。标记IgG时,调至9.0;标记McAb时,调至8.2;标记亲和层析抗体时,调至7.6;标记SPA时,调至5.9~6.2;标记ConA时,调至8.0;标记亲和素时,调至9~10.由于胶体金溶液可能损坏pH计的电板,因此,在调节pH时,采用精密pH试纸测定为宜。由于盐类成分能影响金溶胶对蛋白质的吸附,并可使溶胶聚沉,故致敏前应先对低离子强度的水透析。必须注意,蛋白质溶液应确保澄清无细小微粒,否则应先用微孔滤膜或超速离心除去。一般情况下应避免磷酸根离子和硼酸根离子的存在,因为它们都可吸附于颗粒表面而减弱胶体金对蛋白质的吸附。 在反射率范围为[0.2,0.8]的线性范围内,线性相关系数|r|≥0.990。

胶体金的制备1、胶体金制备的注意事项(1)玻璃容器的清洁:玻璃容器应保持清洁,用前酸洗、硅化。(2)试剂、水质:实验用水一般用双蒸水。缓冲液有足够大的缓冲容量,浓度不应过高以免金溶胶自凝。2、常用方法一般采用还原法,常用的还原剂有柠檬酸钠、鞣酸、白磷。(1)柠檬酸三钠还原法:取0.01%氯金酸水溶液100ml加热至沸,搅动下准确加入1%柠檬酸三钠水溶液0.7ml,金黄色的氯金酸水溶液在2分钟内变为紫红色,继续煮沸15分钟,冷却后以蒸馏水恢复到原体积,如此制备的金溶胶其可见光区*高吸收峰在535nm,A1cm/535nm=1.12。2)柠檬酸三钠-鞣酸混合还原剂:改变鞣酸的加入量,制得不同大小的胶体颗粒。(3)白磷还原法:制备的胶体金直径约6nm,并有很好的均匀度,但白磷和yimi均易燃易爆,一般实验室不宜采用。准确测量(CMOS扫描,获得图像处理光学分析**)。四川免疫层析法读数仪零售价格

胶体金技术很适合于广大基层检验人员以及大批量检测和大面积普查等, 具有巨大的发展潜力和广阔的应用前景。中国香港单通道胶体金读数仪

产品特点

设计体积小,重量轻,便于携带

检测操作简单,一般1-3个步骤即可完成快速定量检测

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CT线位置可自定义识别,支持线宽及线间距设定,支持实时显示检测曲线

自动识别CT线位置,纠错范围可达 ±3mm

可准确识别一条或多条T线值及CT比值

单机可存储超过10000条检测记录

可扩展无线网功能,实现数据网络化管理

内置热敏打印机,可以随机打印结果报告

强大的软件系统 中国香港单通道胶体金读数仪

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