Vakirs等于1985年建立了金标免疫滲滤技术,该技术原理是:先用胶体金标记二抗,随后将抗原物质包被于醋酸纤维素或硝酸纤维束膜,后采用特定形状的塑料卡盒及吸水滤纸等组装垂直渗滤装置。反应过程是;先将检测样品(血清)加在反应膜上,若样品中存在被检特异性抗体,则检测样品快速渗滤通过反应膜时,样品中的特异性抗体就会与包被于反应膜上的抗原结合,随后用缓冲液渗滤洗去样品中剩余的物质,再将金标二抗加于反应膜表面,当金标二抗在反应膜的渗滤过程中,金标二抗就会与结合于反应膜上的特异性抗体结合,再用缓冲液渗滤洗去未结合的金标二抗。此时,反应膜上会显示出红色的点,河南读数仪厂家直销。若样品中没有被检特异性抗体,则抗原抗体连锁反应不成立,金标二抗不会留在反应膜,也就不会出现红色的点。由于金标免疫渗滤技术操作简单,反应速度快,2-3分钟出现结果,特异性强,敏感性高,此项技术自诞生之日期,备受业界高度关注。Spielberg等于1989年建立了人类免疫缺陷病毒抗体检测金标免疫渗滤检测技术。金标免疫渗滤技术现已应用于医学临床检验,疫病预防、动物疫病防控,河南读数仪厂家直销,食品安全检测及农业病虫害检测等领域,河南读数仪厂家直销。金标渗滤法的缺陷是金标抗体有效期短,一般为6个月。 测量原理:反射光谱测试。河南读数仪厂家直销
胶体金的稳定性溶胶的稳定性介于小分子离子溶液和粗分散相之间,其颗粒作布朗运动,不易受重力影响而下沉。然而,溶胶又是不稳定体系,它的胶粒溶剂化作用很弱,总面积较大、因在胶粒相互碰撞时,有自动合并为较大、较重的颗粒倾向。当胶体颗粒直径变大,超出胶体范围而从介质中沉淀出来的现象叫聚沉。影响其稳定性的主要原因有三点。(1)胶粒间的相互吸引力当胶粒相距很近时,这种吸引力可能导致胶体颗粒合并而变大。(2)胶粒及其溶剂化层胶粒及其溶剂化层(溶剂是水时就是水化层)的带电情况。一种溶胶的各个胶粒都带有相同的电荷。同性电荷相斥,双电子层变厚,胶粒带电量愈大,排斥力愈大,愈能阻止胶粒合并聚结,溶胶愈稳定。(3)胶体接口的溶剂膜当二个固体间夹有一厚层液体时,这层液体膜有一个反抗二固体接近的排斥力。两个胶粒要进一步接近,只有克服它们之间的溶剂化膜的斥力才有可能,因此溶剂膜的斥力是使溶胶稳定的原因之一。青海胶体金快速定量读数仪参考价格测试质控条,各通道测量结果相对极差≤5%。
用还原法可以方便地从氯金酸制备各种不同粒径、也就是不同颜色的胶体金颗粒。这种球形的粒子对蛋白质有很强的吸附功能,可以与葡萄球菌A蛋白、免疫球蛋白、糖蛋白、酶、牛血清白蛋白多肽缀合物等非共价结合,因而在基础研究和临床实验中成为非常有用的工具。 免疫金标记技术(Immunogold labelling technique) 主要利用了金颗粒具有高电子密度的特性,在金标蛋白结合处,在显微镜下可见黑褐色颗粒,当这些标记物在相应的配体处大量聚集时,肉眼可见红色或粉红色斑点,因而用于定性或半定量的快速免疫检测方法中,这一反应也可以通过银颗粒的沉积被放大,称之为免疫金银染色。
胶体金标记蛋白的纯化:(2)凝胶过滤法:此法只适用于以BSA作稳定剂的胶体金蛋白结合物的纯化。将胶体金蛋白结合物装入透析袋,在硅胶中脱水浓缩至原体积的1/5~1/10.再经1500r/min离心20min.取上清加至SephacrylS-400(丙烯葡聚糖凝胶S-400)层析柱分别纯化。层析柱为0.8cm×20cm,加样量为床体积的1/10,以0.02Mol/LPBS液洗脱(内含0.1%BSA,0.05%NaN3,pH8.2者用IgG标记物),流速为8ml/h.按红色深浅分管收集洗脱液。一般先滤出的液体为微黄色,有时略混浊,内含大颗粒聚合物等杂质。继之为纯化的胶体金蛋白结合物,随浓度的增加而红色逐渐加深,清亮透明,然后洗脱出略带黄色的为标记的蛋白组分。将纯化的胶体金蛋白结合物过滤除菌、分装,4℃保存。可得到70%~80%的产量。自动准确识别CT线位置。
蛋白质的标记:在体外诊断应用领域,通常采用抗原或抗体与免疫金结合制备免疫金结合物。采用单克隆抗体或多克隆抗体,是影响抗体标记的因素之一。虽然诊断产品中大多数抗体标记采用IgG抗体,但IgM、IgE和IgA抗体也可以成功标记上胶体金。标记时,进一步必须考虑抗体的亚型。在鼠抗IgG亚型中,例如IgG1亚型成功率高,而IgG3亚型被证实有技术难度。将抗原标记胶体金也面临技术难题。将常见的抗原标记上胶体金比较容易。但是受抗原与胶体金结合方式的影响,金标记覆盖的蛋白反应决定簇小于50%时才能高成功率制备出标记物。因此,考虑蛋白结合金的方式对标记开发人员非常重要。 胶体金标记,实质上是蛋白质等高分子被吸附到胶体金颗粒表面的包被过程。重庆胶体金读数仪参考价格
采用CMOS扫描技术,测量精度高,比色法测量精度较高。河南读数仪厂家直销
金标免疫试验的原理将氯金酸(HAuCl4)用还原法制成一定直径的金溶胶颗粒(胶体金)标记抗体,(或金黄色葡萄球菌A蛋白SPA)。金标为一种催化剂,经还原剂(如对苯二酸)处理,将显影剂中的银离子还原成不溶性金属银,沉淀在每个金颗粒的周围,银沉淀在光镜下可清楚地显示。滴金免疫实验原理同一般免疫斑点实验,也是用已知抗原或抗体包被硝酸纤维素膜,再用金标记抗体或抗原进行快速测定。临床应用的有两种方法:金标一步法(层析法)和金标二步法(斑点渗漏法)。具体讲即用两个人HCG—β单克隆抗体,一个抗体吸附于硝酸纤维素薄膜(NC膜)上,另一抗体结合于金溶胶颗粒表面。尿中HCG先与NC膜上的抗体-结合,然后再与金标单抗溶液反应,形成抗体一HCG一金标抗体的加心式复合物.红色的金斑点.河南读数仪厂家直销
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