胶体金免疫层析技术是20世纪80年代发展起来的,其基本原理与免疫渗滤技术相同。由于其稳定性好、安全、简便,且不需任何仪器设备等优点,被应用于医学检测、农产品农药兽药残留、进出口产品病原微生物检测等领域。免疫层析技术在层析材料上发生的免疫反应,具备免疫反应的高特异性、高效率性、高亲和性的特点。具体过程含有待测物的样品溶液通过纤维层析材料的毛细作用沿着层析材料上移,山西金标读数仪报价,与固定在层析材料上的针对待测物的受体(抗原或抗体)结合并发生特性免疫反应。在该过程中,抗原抗体复合物不断被积累富集,山西金标读数仪报价,通过酶反应标记物或直观可视标记物(如胶体金)使之显色,山西金标读数仪报价,从而达到检测目标物质的目的。胶体金读数仪支持机内孵育。山西金标读数仪报价
层析法免疫胶体金检测试剂实际上是免疫金标记技术和抗原抗体反应相结合而形成的一种应用形式,相比ELISA试剂,除标记物不同外,同样服从于抗原抗体反应的特性。此种检测方法具有明显的优点:*方便使用,体现在操作简单,不需经过特殊培训。*短时间获得检测结果,一般10-15分钟即可得出结论。*不同环境下的稳定性好,不需冷藏。*相比而言,其生产成本和检测成本均较低。*检测标本种类多:可用于查血、尿液或粪便,因而适合各种检查吉林胶体金法读数仪能快速进行对目标因子及蛋白含量、食品添加剂及保化品类等多种安全因素的快速筛查,检测快速、结果准确。
提到胶体金快速诊断技术,不得不首先提到POCT。在临床医学检测技术中,POCT(point of care testing,简称 POCT)是指任何由医院专业人士或非专业人员,在检测中心以外进行的检测,简称为即时检验。它使烦琐的检验过程得以简化,取代了需要较高维护成本的传统仪器设备。近年来,随着微加工技术的发展和生物学领域的要求,发展易于操作、检测信号易于判断、试剂消耗量少、反应时间、自动化程度更高、仪器小型易携带、可实现高通量、大规模的检测的POCT快速诊断技术已成为国内外研究的热点。
胶体金的稳定性及免疫胶体金的贮存:胶体金具有很高的动力学稳定性,在稳定因素不受破坏时自身凝聚极慢,可放置数年不发生凝聚。影响稳定的因素主要有电解质、溶胶浓度、温度、非电解质等。金溶胶必须有少量电解质作稳定剂,但浓度不宜过高。高浓度亲水性非电解质能剥去胶粒外面的水化膜使其凝聚。少量的高分子物质促使溶胶凝聚,但一定量的高分子物质反而可增加溶胶稳定性,如蛋白质、葡萄糖、PEG20000 等的加入有良好的稳定效果。当金溶胶吸附蛋白质后,溶胶的稳定性随溶液pH 而变化,而这种变化又取决于吸附蛋白质的等电点,如ConA ,过氧化物酶等,当pH 较低时保持稳定,提高pH 则显得不稳定,接近等电点或略高时又变得稳定了。标记后的胶体金溶液可用0.2 ~0.5mg/ml PEG20000 作为稳定剂。在4 ~10℃ 贮存数月有效,不宜冰冻。
支持多联卡,支持单C多T混合的多联卡。
胶体金蛋白结合物的质量鉴定(1)胶体金颗粒平均直径的测量:用支持膜的镍网(铜网也可)蘸取金标蛋白试剂,自然干燥后直接在透射电镜下观察。或用醋酸铀复染后观察。计算100个金颗粒的平均直径。(2)胶体金溶液的OD520nm值测定:胶体金颗粒在波长510nm~550nm之间出现*大吸收值峰。用0.02Mol/LpH8.2PBS液(含1%BSA,0.02%NaN3)将胶体金蛋白试剂作1︰20稀释,OD520=0.25左右。一般应用液的OD520应为0.2~0.4。(3)金标记蛋白的特异性与敏感性测定:采用微孔滤膜免疫金银染色法(MF-IGSSA)。将可溶性抗原(或抗体)吸附于载体上(滤纸、硝酸纤维膜、微孔滤膜),用胶体金标记的抗体(或抗原)以直接或间接染色法并经银显影来检测相应的抗原或抗体,对金标记蛋白的特异性和敏感性进行鉴定。采用CMOS扫描技术,测量精度高,比色法测量精度较高。山西金标读数仪报价
检测操作简单,一般1-3个步骤即可完成快速定量检测。山西金标读数仪报价
胶体金的质量鉴定:一、胶体金颗粒直径测定:用预先处理好的覆有Formvar膜的镍网浸入胶体金溶液内,取现放在空气中干燥或37℃烤箱烤干。然后在透射电镜下观察,主要观察金颗粒的大小,符合不符合所需要的颗粒直径,金颗粒是否均匀一致,有无椭圆形及多角形金颗粒存在。理想的金颗粒是大小基本相等,均匀一致,无椭圆形及多角形的金颗粒存在,还可以拍片放大后测量金颗粒直径的大小。二、胶体金金颗粒均匀度测定:一般需测量100个以上的胶体金颗粒,然后用统计学处理,计算胶体金颗粒的平均直径及标准差,前者反映颗粒的大小,后者说明颗粒是否均匀一致。三、影响胶体金颗粒大小的因素:如果有较多的大小不等的金颗粒及有椭圆形,三角形金颗粒存在应重新制备。一般造成这种情况的主要原因是在加还原剂的时候不是迅速一次加入,而是多次加入。再者搅拌不均匀,速度太慢没有搅拌起来,造成了颗粒大小不等。制备量的多少,容器的大小,加热的时间等也影响胶体金颗粒的大小。制备了合格的胶体金以后,放在室温或4℃保存。避免低温冻存,因为冻存可导致胶体金凝集,破坏了胶体状态。胶体金在室温避光无灰尘的环境中可放置3个月左右。冰箱内半年左右。山西金标读数仪报价
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