湿热灭菌: 湿热灭菌在高压锅或培养基制备器中进行,高压灭菌一般采用121℃±3℃灭菌15 min,具体培养 基按食品微生物学检验标准中的规定进行灭菌。培养基体积不应超过1000 mL,否则灭菌时可能会造 成过度加热。所有的操作应按照标准或使用说明的规定进行。 灭菌效果的控制是关键问题。加热后采用适当的方式冷却,以防加热过度。这对于大容量和敏感 培养基十分重要,例如含有煌绿的培养基。 过滤除菌: 过滤除菌可在真空或加压的条件下进行。使用孔径为0.2 μm的无菌设备和滤膜,舟山培养基制备器厂家。消毒过滤设备的 各个部分或使用预先消毒的设备。一些滤膜上附着有蛋白质或其他物质(如物品),为了达到有效 过滤,应事先将滤膜用无菌水润湿,舟山培养基制备器厂家。培养基制备器内腔容器是可替换使用,舟山培养基制备器厂家, 附带手柄,便于取出和清洁。舟山培养基制备器厂家
根据对培养基组成物质的化学成分是否完全了解来区分,可以将培养基分为天然培养基、合成培养基和半合成培养基。 a.天然培养基天然培养基是指利用各种动、植物或微生物的原料,其成分难以确切知道。用作这种培养基的主要原料有:牛肉膏、麦芽汁、蛋白胨、酵母膏、玉米粉、麸皮、各种饼粉、马铃薯、牛奶、血清等。用这些物质配成的培养基虽然不能确切知道它的化学成分,但一般来讲,营养是比较丰富的,微生物生长旺盛,而且来源较广,配制方便,所以较为常用,尤其适合于配制实验室常用的培养基。这种培养基的稳定性常受生产厂或批号等因素的影响。 b.合成培养基合成培养基是一类化学成分和数量完全知道的培养基,它是用已知化学成分的化学药品配制而成。这类培养基化学成分精确、重复性强,但价格昂贵,而微生物又生长缓慢,所以它只适用于做一些科学研究,例如营养、代谢的研究。 c.半合成培养基在合成培养基中,加入某种或几种天然成分;或者在天然培养基中,加入一种或几种已知成分的化学药品即成半合成培养基。例如马铃薯蔗糖培养基等。这种培养基在生产实践和实验室中使用好多。哈尔滨培养基制备器培养基制备器通过分装口可以定量添加无菌添加剂。
过滤: 配成的培养基,若无特殊要求,可省略此步。若有沉淀或浑浊,需要澄清的,液体培养基可用滤纸过滤。而固体培养基可用中间夹一薄层脱脂棉的双层纱布过滤。如果过滤法还不能达到澄清的要求,则可用蛋清澄清法,即培养基加热冷却到50℃~60℃,装入三角瓶内(不超过容量的二分之一),按1000ml加入1个~2个鸡蛋的蛋清,用力摇晃3min~5min,高压蒸汽灭菌121℃、20min,取出趁热过滤即可。摆斜面:装在试管中的琼脂培养基,在灭菌完成后,趁热立即摆放在木棒(或玻璃棒)上,并完成适时地斜度,冷却后,琼脂凝固即成斜面。斜面长度不要超过试管的二分之一。
倒平板: 灭菌溶化的培养基冷却到50℃左右后,倒入无菌干燥的培养皿中。培养基的温度不能过高,否则容易在培养皿的内盖上形成太多的冷凝水;温度太低,培养基又容易凝固成块,无法制成平板。倒平板时,应在靠近酒精灯火焰进行,以免外界的杂菌落入平板内,左手拿培养皿,右手拿三角瓶的底部,用左手的小指和手掌部位把三角瓶的棉塞拔下,灼烧瓶口,用大拇指和食指把培养皿盖打开一条缝,至瓶口刚好伸入,倒入培养基,以铺满底为限,不超过培养皿高度的三分之一,迅速盖好盖,放在桌面上,轻轻地转动培养皿,使培养基分布均匀,冷凝后即可。培养基制备器培养基的各种成分必须精确称取并要注意防止错乱,较好一次完成,不要中断。
平板的制备和储存: 倾注融化的培养基到平皿中,使之在平皿中形成厚度至少为3 mm (直径90 mm的平皿,通常要加 入18 mL〜20 mL琼脂培养基)。将平皿盖好皿盖后放到水平平面使琼脂冷却凝固。如果平板需储存, 或者培养时间超过48 h或培养温度高于40℃,则需要倾注更多的培养基。凝固后的培养基应立即使用 或存放于暗处和(或)5±3℃冰箱的密封袋中,以防止培养基成分的改变。在平板底部或侧边做好 标记,标记的内容包括名称、制备日期和(或)有效期。也可使用适宜的培养基编码系统进行标记。 将倒好的平板放在密封的袋子中冷藏保存可延长储存期限。为了避免冷凝水的产生,平板应冷却 后再装入袋中。储存前不要对培养基表面进行干燥处理。 对于采用表面接种形式培养的固体培养基,应先对琼脂表面进行干燥:揭开平皿盖,将平板倒扣 于烘箱或培养箱中(温度设为25~50℃);或放在有对流的无菌净化台中,直到培养基表面的水滴 消失为止。注意不要过度干燥。商品化的平板琼脂培养基应按照厂商提供的说明使用。培养基制备器真彩色液晶屏显示,触摸屏加按键操作。舟山培养基制备器厂家
培养基制备器利用各种动、植物或微生物的原料,其成分难以确切知道。舟山培养基制备器厂家
用过的玻璃器皿: 凡确无病原菌或未被带菌物污染的器皿,使用后可随时冲洗,吸取过化学试剂的吸管,可先浸泡于清水中,待到一定数量后再集中进行清洗。有可能被病原菌污染的器皿,必须经过适当消毒后,将污垢除去,用皂液洗刷,再用流水冲洗干净。若用皂液未能洗净的器皿,可用洗液浸泡适当时间后再用清水洗净。洗液的主要成份是重铬酸钾和浓流酸,其作用是将有机物氧化成可溶性物质,以便冲洗。洗液有很强的腐蚀作用,使用时应特别小心,避免溅到衣服、身体和其他物品上。舟山培养基制备器厂家
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