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高效液相色谱检测食品着色剂

信息介绍 / Information introduction

高效液相色谱仪 色谱仪应用 液相色谱仪方法

             

                         

食品中着色剂高效液相色谱仪(HPLC)检测方案


1  仪器与试剂

1.1 仪器
  梯度高效液相色谱仪,配紫外
  色谱柱 C18  250mm×4.6mm×5μm
  超声波水浴
  分析天平(感量0.001g
  0.45μm水性滤膜

1.2 试剂
  甲醇,色谱纯。
  正己烷。
  聚酰胺粉(尼龙6):过200目筛
  磷酸,色谱纯。
  柠檬酸溶液:称取20克柠檬酸,加水至100mL,溶解混匀。
  乙酸铵溶液(0.02mol/L)称取1.54克乙酸铵,加水至1000mL,溶解,经经0.45μm水性滤膜过滤。
  无水乙醇-氨水-水(7+2+1):量取无水乙醇70mL、氨水20mL、水10mL混匀。
合成着色剂标准液:准确称取按其纯度折算为100%质量的柠檬黄、日落黄、苋菜红、胭脂红、新红、赤藓红、亮蓝、靛蓝各0.100克,置于100mL容量瓶中,加pH=6水到刻度,配成水溶液。

2  测定原理

食品中人工合成着色剂用聚酰胺吸附法或液液分配法提取,制成水溶液,注入高效液相色谱仪,经反相色谱分离。

3  试样溶液的制备

称取试样5.000g-10.000g(精确至0.0001g),置于100ml烧杯中,加100ml水,用柠檬酸溶液调pH6,加热至60度,将1克聚酰胺粉加少许水调成糊状,倒入试样溶液中,搅拌片刻,以G3垂融漏斗抽滤,用pH=4的水洗涤3-5次,然后用甲醇-甲酸混合溶液洗涤3-5次,再用水洗至中性,用乙醇-氨水-水混合溶液解吸3-5次,每次5mL,收集解吸液,加乙酸中和,蒸发至近干,加水溶解,定容至5mL。经0.45μm水性滤膜过滤,进高效液相色谱仪测定。

4  色谱条件

色谱柱:C18 250mm×4.6mm×5μm
  流动相:20mmol乙酸铵为流动相A,以甲醇为流动相B,按下表规定经行梯度洗脱;

时间(分钟)

流动相A%

流动相B

0

80

20

5

65

35

15

15

85

17

2

98

22

2

98

22.1

80

20

30

80

20


  流速:1.0mL/min
  温度:室温;
  进样量:20μL
  检测波长:254nm

HPLC测定食品中着色剂方案.jpg


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