饲料中维生素D3的测定

1  仪器及试剂

仪 器：

1). 分析天平一台（精度0.1mg）；

2). 超声波清洗机一台；

3). 溶剂过滤器（含泵）一套；

4). 微量进样器（100µl）一支；

5). 等度高效液相色谱仪；

试 剂：

1).实验室用水；

2). 甲醇，色谱纯；

3). 维生素D3标准品：含量≥99%；

4). 维生素D3标准贮备液；

5). 维生素D3标准工作液；

2  样品制备

称取饲料样品1g，精确至0.0001g，置于100ml的棕色容量瓶中，加入约80ml的甲醇，瓶塞不要拧紧，于65℃超声波水浴中超声提取30min，冷却至室温，用甲醇稀释至刻度，充分摇匀。则将溶液过0.45µm滤膜过滤，进样测定。使维生素D3的进样浓度与标准工作液浓度接近。

3  色谱条件

色谱柱： C18色谱柱　150mm×4.6mm×5μm；

流动相：甲醇+水（98+2）；

流速：1.0mlmin；

温度：室温；

进样量：20μl

检测波长：264nm。

4  色谱图

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