关于波长准确度的检查与校正日常在使用分光光度计时,是否要经常进行仪器波长准确度的检查?答案是否定的。当在日常测定中发现仪器测定灵敏度下降,这时才应进行波长准确度的检查,简易的检查方法(粗检)是:仪器开机后,双光束紫外可见分光光度计排行,调节波长为580nm,在吸收池座的通光道中插入一张白色卡片纸,若能观察到一长方形的黄色光斑,说明波长准确度属正常范围,否则就应进行波长校正。当仪器经过长途搬运、受过机械振动或更换光源灯泡后,必须进行波长准确度的检查与校正,双光束紫外可见分光光度计排行。粗检同上,其校正方法有:干涉滤光片或镨钕滤光片校正法、利用氘灯的特征发射线校正法,双光束紫外可见分光光度计排行。具体步骤可参考仪器使用说明书。例如测试紫外区时则可关闭紫外分光光度计钨灯;反之关闭氘灯。这样就延长了那只不使用的光源灯的寿命。双光束紫外可见分光光度计排行
常见的可见分光光度计和紫外可见分光光度计的型号有哪些?
可见分光光度计常见的有721系列,722系列和723系列。721系列可见分光光度计有721/721-100型,测定波长为360-800nm,分为分指针和数显式两种方式的显示器。其中721-100型相对于721是型将测试样品室加宽,可用10cm的比色皿,为糖厂**检测仪器。722系列可见分光光度计有722/722S/722N型,测定波长为330-1000nm/325-1000nm。722型波长是330-1000nm,722S与722N的波长范围325-1000nm,其中722N是自动调节波长。723系列可见分光光度计有723/723N/723PC/723PCS型四种,测定波长为320-1000nm,其中723是手动调整波长,723N是自动调波长,723PC配有扫描软件,723PCS带有扫描软件和打印机。紫外可见分光光度计常见的是UV752/UV752N,波长范围是195nm-1020nm。二者主要区别是UV752N可以选配打印机将数据输出,其中在杂散光参数,光谱带宽等方面还有细微的差别。 甲醇紫外可见分光光度计厂家供应现在的许多紫外分光光度计装的是“长寿”型灯源,据说氘灯可达2000小时,钨灯3000小时。
定性定量。利用特定的吸收峰,快速对待测样品进行定性和定量分析。如聚六亚甲基双胍盐酸盐的检测。利用双波长,以很快的速度辨别是单胍还是双胍,并进行粗略定量。这是液相色谱无论如何也做不到的。
测定透过率。透光率是一个物理词汇,是表示光线透过介质的的能力,是透过透明或半透明物体的光通量与其入射光通量的百分率。吸光度与透过率的换算公式
透过率对于某些原料检测是非常实用的,可对此类原料品质进行总体把控。
杂质的检测。通过前处理将杂质与主成分分离后,进行紫外分光光度测定,可很快得到该杂质的含量。以桑普实验室这十几年对苯氧乙醇中杂质苯酚的测定方法改进过程为例:
之后建立了4-氨基安替比林比色法,可实现对苯氧乙醇含量20、40、60、80、100ppm的区分;紫外分光光度法
期间同时采用EP中紫外分光光度法,并将其进行适当改进,作为修订后的企标。该方法便利快速,可实现50ppm以上的定量检测。HPLC-DAD
近两年,桑普对产品品质把控更严格,希望能实现几个ppm的定量检测。所以采用了HPLC-DAD作为企标对其检测。
根据吸收光谱图上的一些特征吸收,特别是MAX吸收波长λmax和摩尔吸收系数ε,是检定物质的常用物理参数。
将分析样品和标准样品以相同浓度配制在同一溶剂中,在同一条件下分别测定紫外可见吸收光谱。若两者是同一物质,则两者的光谱图应完全一致。如果没有标样,也可以和现成的标准谱图对照进行比较。
由于紫外吸收光谱只含有2~3个较宽的吸收带,而紫外光谱主要是分子内的发色团在紫外区产生的吸收,与分子和其它部分关系不大。具有相同发色团的不同分子结构,在较大分子中不影响发色团的紫外吸收光谱,不同的分子结构有可能有相同的紫外吸收光谱,但它们的吸收系数是有差别的。如果分析样品和标准样品的吸收波长相同,吸收系数也相同,则可认为分析样品与标准样品为同一物质。
紫外吸收光谱能测定化合物中含有微量的具有紫外吸收的杂质。如果化合物的紫外可见光区没有明显的吸收峰,而它的杂质在紫外区内有较强的吸收峰,就可以检测出化合物中的杂质。
不同的极性溶剂产生氢键的强度也不同,这可以利用紫外光谱来判断化合物在不同溶剂中氢键强度,以确定选择哪一种溶剂。
金属离子常与有机物形成络合物,多数络合物在紫外可见区是有吸收的,我们可以用分光光度法来研究其组成。 初次使用紫外可见分光光度计的人员,一般来说,一定要详细阅读仪器安全操作手册。
使用紫外分光光度计的过程中,经常会遇到仪器因光源达不到要求,需要进行调修。要求光源灯处不能有空气流动,因为单光束仪器很忌讳空气快速流动而使光源灯的色温发生变化。如遇电压正常而钨灯不亮时,就需要更换钨灯。更换时,不要用手直接接触灯泡表面,如果手指摸过,应用无水乙醇和C4H10O混合液擦拭干净,否则通电后指印遇热不能去除。安装光源灯后要注意调整光路。光源灯有两个引线头,安装时用导线焊接,主要是防止接触不良而造成的光源发光不稳现象。在焊接时防止焊点与灯头铜皮碰上,装上灯座使电源短路。灯丝要求平直,如果灯丝弯曲,会影响光能量。灯丝的位置要与入射狭缝平行并对准,上、下、左、右调节后紧固螺钉。拧紧灯座的螺纹套,可用钳子拧紧,一般灯头尽量往灯座里塞,因为多数灯丝离灯头偏高。调整灯位置的前后可移动整个灯座架,它下面有三个固定螺钉,先稍松后,移动前后位置再固定。一般调节钨灯的位置时,将波长调到580nm处,狭缝调到MAX,把一张白纸置于比色皿盒边出口处,观察白纸上的光斑。若光斑上方左右角均不完整成半圆弧,可能是光源灯高度不对;光斑左边或右边不完整,可调光源灯底座位置。调整至白纸上可见明亮、均匀的长方形黄橙色光斑。 紫外分光光度计一般覆盖190nm和380nm波长,通常利用氘灯照明。上海紫外可见分光光度计
分光光度计的钨灯寿命无法延长,氘灯如果不用的时候,可以关闭,开机要预热时间。双光束紫外可见分光光度计排行
当以空白试剂为参比调节仪器零点时,比色皿窗材料的吸收、内外窗面的散射以及溶剂的吸收等都被抵消,所得吸光度值完全由显色溶液中待测离了浓度所决定。此时吸光度值与试液浓度一般呈线性关系。吸光度值与测定浓度不成直线关系,发生向下弯曲(负偏离)或向上弯曲(正偏离)的现象而偏离朗伯一比尔定律的主要原因如下。
(1)非单色光的影响:紫外一可见分光光度讣使用连续光源和分光器分光,不可能得到真正理想的单色光;为保证在测量中能得到充分的光强,仪器必须保持一定的狭缝宽度。由狭缝射出后投射到被测物质上的光,是一个有限宽度的谱带——光谱通带。随光谱通带宽度的增大,吸收光谱的分辨率降低,并偏离朗伯一比尔定律。
(2)非吸收光的影响:当来自出射狭缝的光的光谱通带宽度大于吸收光谱谱带时,投射在被测物质上的光就含有非吸收光。这不仅能使灵敏度降低,且能使校准曲线向横坐标轴弯曲而偏离朗伯一比尔定律。 双光束紫外可见分光光度计排行
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