进行单波长测量时，需要考虑朗伯比尔定律对入射光单色性的要求和测定灵敏度的要求，空气紫外可见分光光度计比较。没有干扰时，一般选择在吸收峰的MAX吸收波长位置处，如果有干扰，选择在没有干扰且吸光度变化较平缓的位置。进行多波长校正时，除尽量满足单波长测定的波长要求外，还要求多个组分间的吸收光谱间线性无关。

紫外分光光度计狭缝的大小会影响到仪器的信噪比和标准曲线的线性范围。狭缝过大，通常会使线性范围变小，特别是当不在MAX吸收波长位置测定时更是如此。狭缝过小，信噪比变差，基线平直度和测量数据的重复性会变差。此外，空气紫外可见分光光度计比较，还需要考虑样品吸收峰宽度的影响。通常单波长测定时，一般选择在MAX吸收波长位置，线性范围容易满足，可选择较宽的狭缝（1~2nm）多波长测定时，空气紫外可见分光光度计比较，很难同时在所有波长都满足线性范围要求，应选择比较小的狭缝。 实验室研究人员希望省钱购入专门仪器定量核酸、蛋白或者细菌的生长情况。空气紫外可见分光光度计比较

可见分光光度计，紫外分光光度计和紫外可见分光光度计有什么区别?

可见分光光度计和紫外分光光度计的区别是测定波长范围不同，一般可见光波长范围是400～1000nm,紫外光波长范围是200～400nm。所谓紫外可见分光光度计也就是说这个仪器可以通过更换光源形成紫外和可见的光区，能够测定吸收峰在紫外和可见光部分的化合物。一般测定波长在200～1000nm。

分光光度计的关键参数有哪些?

选择可见和紫外可见的分光光度计所关注的关键的指标有三点：一是波长范围，二是波长准确度，三是杂散光参数。波长范围的选择是由用户实验需要所定，波长范围越宽的价格越贵;波长准确度及杂散光参数的数值越低，表示性能越好。 国内**紫外可见分光光度计紫外光分光光度计分为单光束和双光束两类。单光束型主要是依赖单束光进行测量。

紫外-可见分光光度计（UV）引用新型技术，其功能强大，采用单色器技术，波长范围190-1100nm，是各种涉及水和废水分析领域的通用仪器，应用范围包括市政和工业废水，饮用水，加工过程用水，地表水，冷却水和锅炉补给水等。

在水和废水监测中的应用，对于一个水系的监测分析和综合评价，一般包括水相（溶液本身）、固相（悬浮物、底质）、生物相（水生生物）。在水质的常规监测中，紫外可见分光光度法占有较大的比重。由于水和废水的成分复杂多变，待测物的浓度和干扰物的浓度差别很大，在具体分析时必须选择好分析方法。

在农产品和食品分析中可用于检测的组分或成分有蛋白质、赖氨酸、葡萄糖、维生素C、硝酸盐、亚硝酸盐、砷、汞等;

在植物生化分析中可用于检测叶绿素、全氮和酶的活力等；

在饲料分析中可用于检测烟酸、棉酚、磷化氢和甲酯等。原理紫外可见吸收光谱主要产生于分子价电子在能级间的跃迁。利用一定频率的紫外--可见光照射被分析的物质，引起分子中价电子的跃迁，它将有选择地被吸收。吸收光谱可以反映出物质的特征。它对物质进行定性分析、定量分析及结构分析,所依据的光谱是分子或离子吸收入射光中特定波长的光而产生的吸收光谱。

光谱范围紫外可见光谱区通常指190nm～780nm的波长范围，但实际的分光光度计设计中，经常将波长向长波方向拓展，进入短波近红外区。在120多种国外产品中，有52种波长≤900nm，其中≤800nm的*11种。而>900nm的有72种，占了多数。固定光栅型受硅阵列探测器的限制，1100nm是其波长的上限。扫描光栅型使用分立光电器件，波长的扩展更为灵活。

波长的准确性：*有16种偏差超过1nm，其余大多在01～1之间。其中突出的是Varian的Cary100/300，它们在6561nm处的波长准确性达到了002nm的水平。波长重复性大于05nm的*7种，01～05nm之间的占了多数，共有68种，还有相当数量的产品达到了优于01nm的水平。如Agilent的8453(002)、Beckman的DU7000series(005)、Camspec的M400T/PC(005)、GBC的Centra10/20/40(004)、Hitachi的U3010/3310(005)、PerkinElmer的Lambda系列(002～005)、ScincoCO的S-1100/3130/3150(002)、Shimadzu的MS1500(001)和UV1201(003)、Varian的Cary系列(0008～0025)等。虽然从原理上，固定光栅型的设计结构固定、简单，易于实现好的波长准确性和重复性，但扫描光栅的设计制造工艺已十分成熟。 按所吸收光的波长区域不同，分为紫外分光光度法和可见分光光度法，合称为紫外-可见分光光度法。

光源和检测方法（LIGHTSOURCESANDDETECTION）分光光度计的光谱也是需要考虑的一个重要因素。实验室研究人员希望省钱购入专门仪器定量核酸、蛋白或者细菌的生长情况。例如AmershamBiosciencesofPiscataway公司的GeneQuantII能在230、260、280、320、595和600nm的波长下测量样品。果果需要更大的灵活性，研究者可以考虑一种更高性能的宽光谱仪器，可以程序性地进行ELISAs分析和比色分析。

紫外分光光度计一般覆盖190nm和380nm波长，通常利用氘灯照明。一些特殊的仪器可以提供满足光子学和半导体研究需要的光谱范围。VarianofPaloAlto公司的CaryDeepUV和HitachiHighTechnologiesofTokyo的U-7000AutomatedVacuumUVSystem就是这样的仪器。

一些仪器具有多种光源供选择：紫外光、可见光和甚至红外光（780nm至3,000nm）。钨灯和卤素灯一般只覆盖可见光部分（大约380nm到800nm）。而氙灯则可以覆盖紫外光和可见光区域。紫外可见分光光度计基本工作原理和红外光谱仪相似，利用一定频率的紫外可见光照射被分析的有机物质。民用紫外可见分光光度计怎么样

紫外分光光度计仪器使用一定周期后，由维修工程师或在工程师指导下定期开启仪器外罩对内部进行除尘工作。空气紫外可见分光光度计比较

关于波长准确度的检查与校正日常在使用分光光度计时，是否要经常进行仪器波长准确度的检查?答案是否定的。当在日常测定中发现仪器测定灵敏度下降，这时才应进行波长准确度的检查，简易的检查方法(粗检)是：仪器开机后，调节波长为580nm，在吸收池座的通光道中插入一张白色卡片纸，若能观察到一长方形的黄色光斑，说明波长准确度属正常范围，否则就应进行波长校正。当仪器经过长途搬运、受过机械振动或更换光源灯泡后，必须进行波长准确度的检查与校正。粗检同上，其校正方法有：干涉滤光片或镨钕滤光片校正法、利用氘灯的特征发射线校正法。具体步骤可参考仪器使用说明书。空气紫外可见分光光度计比较

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