以亚磷酰胺寡核苷酸合成为例介绍该类仪器的一般操作步骤。亚磷酰胺DNA合成的试剂有:保护碱基的5/—DMT,A、G、C、T亚磷酰胺单体,四唑偶联催化剂,乙酐,N—甲基咪唑封闭试剂,三氯乙酸(TCA)脱保护溶液,12氧化混合物,乙腈清洗溶剂,氨水切除溶液。使用步骤如下:1)仔细检查合成仪上所有试剂瓶中的试剂量,必要时换掉试剂瓶,海南优良基因合成仪代理,特别注意乙腈的量,因为该溶剂用量较大。2)将标记好的清洁的收集瓶装在合成仪上。3)将要合成的DNA序列输入合成仪。4)检查选择的合成步骤是否正确。5)选择结束方法:TritylOffAuto是仪器的原始状态,若打算以5,—DMT基团连接纯化寡核苷酸,将其转变为TritylOnAuto结束状态。6)选择结束方法,一般为系统的原始状态。7)在每个柱监视器的Use下,海南优良基因合成仪代理,海南优良基因合成仪代理,输入你所希望的保存名字。8)以代码代替相应的DNA序列标记每一个收集瓶。9)打印出每一个柱设置的详细资料。10)检查打印出来的资料是否正确。11)运行StartColumn步骤检查每一个柱的位置,确保合成仪上合成柱处于正确的位置。12)检查连接在合成仪上的溶剂残留(废液瓶)是否充满。13)如果分部收集器用来收集每个DMT脱保护步骤的流出物,确保试管充分清洁干净,并打开分部收集器,确保DMT废液管路通向分部收集器。 工业型合成仪,主要指合成通量大,且单柱合成产物为10-1000nmol的DNA合成仪。海南优良基因合成仪代理
DNA合成仪一般需碱基瓶组及试剂瓶组。试剂瓶组一般**少为6个,含脱保护剂(Deb)、活化剂(act)、盖帽试剂A(capA)、盖帽试剂B(capB)、氧化剂(OXI)及洗脱乙腈(ACN),每种仪器一般都多设置1-2个试剂瓶位,用于特殊产物的合成。碱基瓶组一般**少为4个标准碱基(A/C/G/T),同时搭配2-多个特殊碱基瓶位,用于荧光标记等合成。
DNA 合成仪的一般原则需要保持内外气体隔绝,因此无论试剂瓶、碱基瓶均需密封保持一定压力。所有压力管路均采用特氟龙导管,直径为1/16—1/8吋。每个瓶子都有一个氩气压力管道及输送管道进入瓶盖插塞,对于亚磷酰胺,1—8号瓶其压力管道也作为排气管。氩气管要保持在液体水平以上,而输送管却伸到瓶的底部。当阀门正确设置打开时,储液瓶上部空间由氩气加压,液体被推进输送管,流到其目的地。 海南优良基因合成仪代理柱子是对称的(没有顶端和底部、前后之分),可以以任何方式与公路厄氏接头相连接。
由于人们所需要的大部分核酸的碱基对数量远远超过DNA合成仪可以合成的**长核酸链的碱基对数量,因此还需要不断改善合成工艺才能得到较长的核酸分子。为了能够在将来改变酶的结构,使其在工业上更有价值;改变蛋白质和多肽的结构,制备新药wu;并开拓有关人类疾病和遗传调控的新领域,化学合成DNA在这一过程中将起关键性作用。根据不同化学方法研制的DNA合成仪也将不断涌现,能够突破现有核酸合成的碱基对数量限制,大量节省人力、物力、财力。
1.瓶塞“O”形环一月检查一次“O”形环,**少1年更换1次。将新的备用“O”形环与仪器上的相比较,如果在“O”形环上出现白色沉淀,用棉花蘸取乙腈,进行清洗。更换“O”形环的步骤如下:用止血钳夹住“O”形环,从槽中取下(或用牙签钩下),注意不要损坏托住“O”形环的白色聚氟乙烯插塞(tefloninsert);确保插塞上没有颗粒后,用手指将新“O”形环推进槽,进行压力实验。2.储液瓶瓶子都要放在亚磷酰胺及储液瓶位置上,并保持氩气压力以及管路清洁。3.流路节流阀为了防止阻塞,节流阀应该1个月清洗1次,清洗时,先在水中煮沸15min,然后再在甲醇中超声波清洗。排气管将废气导入适当的排气装置,如排烟罩。
延时发生器NIM模块、NIM机箱、前放、混合及特殊插件波形数字转换器CAMAGDerivatizer薄层色谱自动喷雾箱全自动高通量样品前处理工作站MicrodropADpact多通道全自动微滴喷射系统CAMAGADC2全自动薄层色谱展开系统全自动点样仪SOTAXAT70smart溶出测试系统CAMAGTLCScanner4薄层色谱扫描仪TechnobisCrystalBreeder高输出平行结晶仪SOTAXTD1粉末堆积密度测试仪CAMAGLinomat5半自动点样仪SOTAXCE7smart流通池法(USP4)溶出度测试系统SepiatecSepmatixHPLC八通道平行分析及制备系统SOTAXPF1粉末流动性测试仪CAMAGTLCVisualizer2薄层色谱数码成像系统SOTAXAT溶出测试系统MicrodropADGantry多通道全自动微滴喷射系统SOTAXDT2崩解度测试仪CAMAGBioLuminizer®。可放在合成仪附近的地板上或放在低于仪器的附近工作台上。海南优良基因合成仪代理
入口和出口都是母路厄氏(1uer)接头,与仪器的公路厄氏接头配对。海南优良基因合成仪代理
自1979年以来,国外已有近百种化学合成基因,包括胰岛素基因,干扰素基因,以及乳糖操纵基因,启动子调节序列等。使用这一方法首先要已知所要合成的基因的序列。 在化学法中采用过磷酸二酯法,磷酸三酯法,亚磷酸三酯法,以及在后两种方法的基础上建立起来的固相合成和自动化方法,固相合成法是**常用的方法。已有核酸合成仪。用这种仪器合成的DNA链一般能达到20个核苷酸左右,通过拼接可得到较长的片段。人工合成基因的优越之处在于合成的随意性。可根据需要来合成基因,并可以任意增加、减少或变更基因中的一个或几个核苷酸。海南优良基因合成仪代理
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