冻存盒肯定是先放在室温，然后放进去细胞，置于-80，利用异丙醇实现梯度降温啊。)
根据论坛里的讨论，异丙醇使用过一段时间后是要更换的，但是我一直没换过，也没发现很大问题。
经验2：我们实验室冻存盒平时放4度，需要冻细胞时直接拿出来用就可以了。第二天转移至液氮，贵重的细胞尽快转移，不然会影响复苏成活率的。一般是用5次就更换一下异丙醇。现在也有一些商品化冻存液可以直接丢进-80的，很方便，效果也不错的。
经验3：异丙醇的量是要保证的，不能低于表明的线，否则不能起到很好的程序性降温作用，我们是在4度放置，放了细胞后立马放到-80度冰箱，第二天再转移到液氮，效果很不错。异丙醇熔点：-87.9度的色透明具有乙醇气味的可燃性0液体。注意了有可燃性，海口科默斯冻存盒厂家电话!急性毒性：口服- 大鼠 LD50: 5840 毫克/ 公斤; 口服- 小鼠 LC50: 3600 毫克/ 公斤，海口科默斯冻存盒厂家电话。刺激数据：眼睛- 兔子100 毫克/ !请注意清理，海口科默斯冻存盒厂家电话!
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其中，凹槽结构、第二凹槽结构和第三凹槽结构均为柱形槽结构；凹槽的开口直径尺寸与冻存盒体的外径尺寸相配合；第二凹槽的开口直径尺寸与第三凹槽的开口直径尺寸相配合。其中，保温层结构为棉花材质材料板。其中，支撑冻存架为泡沫材质的架板；支撑冻存架为圆柱型结构架板。与现有的技术相比，本实用新型的有益效果是：本实用新型通过在支撑冻存架上开设若干冻存管孔，并将细胞冻存管放置在冻存管孔内，能保证细胞冻存管存放稳定，使得细胞冻存盒结构简单、使用方便，通过在冻存盒体和冻存盒盖内设有保温层，可以对细胞冻存管起到缓慢降温和保温的效果。吉林程序冻存盒杭州科默斯科技有限公司**级的服务，可信赖的伙伴。
应该不可以把冻存盒放4°的，因为梯度降温的起始点是室温20°左右，所以从-80℃拿出来的冻存盒应该现在室温静置一段时间待其恢复到室温再使用。而其中的异丙醇应使用6~7此后更换一次，而且保证液体量达到刻度线，否则降温效果会受到影响。冻存盒里的异丙醇一般是250ml，低于刻度了要加上，理论上是5次以后更换异丙醇，但是异丙醇对环境有害，我们可以多用几次，只是少了的时候要加满。还有冻存液里面的DMSO对细胞0性，尤其是室温的时候，所以冻存盒和冻存液先放4°，等把细胞用冻存液重悬好了放在冻存盒里，还放回4°，等到出细胞间的时候再拿到-80°里面保存。过夜再转入液氮。
请问梯度冻存盒到底怎么使用？两种方法：
1、是先把冻存盒放在室温，把细胞放在冻存盒，置于-80度？（這样的好处：细胞可以从室温开始缓慢降温）（并且，据说冻存盒的使用本来就是从20度室温开始降）
2、还是将冻存盒先放在4度降温，再将细胞放进去，放于-80？（這样的好处：常温下冻存液中DMSO对细胞损伤大，从4度开始降温比较好？） 杭州科默斯科技有限公司立足新起点,开创新局面。
细胞冻存有两种方法：传统的方法是利用冷存管处于4℃、 -20℃、 -80℃保存，程序降温方法是利用程序降温盒设定程序由室温降低至-80℃，后再放置到液氮槽中长期保存。程序降温盒的使用注意事项如下：实验室虽然有程序降温冻存盒，但怎么使用一直都搞不明白，我觉得是不是应该把程序降温冻存盒先从-80度移到室温放一段时间(细胞刚开始还没冻的时候就是室温)，然后把细胞放进去，再一起移到-80度，这样才能实现程序降温呢? 时间使用长了，感觉里面的液体是不是异丙醇啊，使用时间长了会不会挥发或变质什么的，要不要添加或维护一下呢，还有有一只降温盒因不小心给倾斜让液体流出了部分，要补充吗?现有的细胞梯度冻存盒的使用，在冻存细胞前，先将盒子里的冻存管支架取出，往盒中加入有机溶剂，再把支架放回盒中，再把整个盒子预冷，冻存时，把装有细胞的冻存管放入冻存盒里，盖子拧好，逐步降温，从4℃降到-20℃，再降到-80℃，然后取出冻存盒，打开盖子，将细胞取出放入液氮中保存。现有细胞梯度冻存盒具有以下缺点：当把支架放回盒中之后，当要再拧开盖子时，盒内装有的有机溶剂容易漏出来，尤其是要将存放在-80℃的冻存盒里的细胞取出移至液氮罐中时，冻存盒的盖子由于在零下低温放置，导致很难拧开，用力拧开盖的话，就更容易导致盒内装有的有机溶剂漏出。杭州科默斯科技有限公司奉献专业，彰显魅力。南通梯度冻存盒厂家电话
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经验4：应该不可以把冻存盒放4°的，因为梯度降温的起始点是室温20°左右，所以从-80℃拿出来的冻存盒应该现在室温静置一段时间待其恢复到室温再使用。而其中的异丙醇应使用6~7此后更换一次，而且保证液体量达到刻度线，否则降温效果会受到影响。经验5：冻存盒里的异丙醇一般是250ml，低于刻度了要加上，理论上是5次以后更换异丙醇，但是异丙醇对环境有害，我们可以多用几次，只是少了的时候要加满。还有冻存液里面的DMSO对细胞0性，尤其是室温的时候，所以冻存盒和冻存液先放4°，等把细胞用冻存液重悬好了放在冻存盒里，还放回4°，等到出细胞间的时候再拿到-80°里面保存。过夜再转入液氮。程序降温盒这个梯度降温可提高细胞冻存的存活率，由于程序降温盒内存在***浓度的异丙醇和泡沫内衬，因此程序降温盒也可以用于细胞复苏。海口科默斯冻存盒厂家电话
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