亚磷酰胺瓶排气除了加压外,亚磷酰胺瓶都是用压力排气管排气的。把亚磷酰胺放入仪器前,要用氩气排除空气使其净化。净化是通过输送管输送气体,海南口碑好基因合成仪销售,当气体输送到瓶内时,空气经压力排气管排出。这是由瓶子更换步骤自动完成的。废液瓶是输送系统的低压侧,必须将出口与大气相通。要确保排气管通到通风柜。如果排气管阻塞,将会产生反压,试剂和溶剂的输送会受到抑制。输送电磁阀试剂输送系统包括两个试剂阀块(8碱基仪器有3个)及2个或4个柱阀块。阀块控制气体和化学试剂流入柱子及出口。除亚磷酰胺和四唑以外,试剂和溶剂都被同时输送到所有活化柱。当有多个活化柱时,对流速的细微变化,以自动调节每个柱子的输送次数来补偿,海南口碑好基因合成仪销售。每一个5—端口柱阀块将流出物导入废液口、DMT收集口,或DNA收集瓶,它也控制用于除去或冲洗柱内和柱阀块内的试剂的氩气。辅助真空对于阀块的适当运行,关键是隔膜形成一个圆顶小空隙,每次电磁阀打开时,抽气泵为每个阀块提供了辅助真空,辅助真空在隔膜的螺线管一侧形成,海南口碑好基因合成仪销售,使隔膜形成一圆顶空隙。 以亚磷酰胺寡核苷酸合成为例介绍该类仪器的一般操作步骤。海南口碑好基因合成仪销售
试剂驱动系统一般地,DNA合成仪采用一定压力的惰性气体(氩气)或氮气及电磁阀组驱动液体试剂,也可采用氦气驱动试剂。某些合成仪采用sliderblock滑块系统及精密蠕动泵,可不采用气体为驱动系统。采用气体及电磁阀驱动液体试剂时,需首先将管路系统电磁阀前段,含试剂瓶组中压力加压到规定气压,通过合成管理软件或手动打开电磁阀(一般打开时间为数ms),即可驱动液体试剂到所需的合成柱中。试剂和碱基瓶组DNA合成仪一般需碱基瓶组及试剂瓶组。试剂瓶组一般**少为6个,含脱保护剂(Deb)、活化剂(act)、盖帽试剂A(capA)、盖帽试剂B(capB)、氧化剂(OXI)及洗脱乙腈(),每种仪器一般都多设置1-2个试剂瓶位,用于特殊产物的合成。碱基瓶组一般**少为4个标准碱基(A/C/G/T),同时搭配2-多个特殊碱基瓶位,用于荧光标记等合成。压力管路及输送管路DNA合成仪的一般原则需要保持内外气体隔绝,因此无论试剂瓶、碱基瓶均需密封保持一定压力。所有压力管路均采用特氟龙导管,直径为1/16—1/8吋。每个瓶子都有一个氩气压力管道及输送管道进入瓶盖插塞,对于亚磷酰胺,1—8号瓶其压力管道也作为排气管。氩气管要保持在液体水平以上,而输送管却伸到瓶的底部。 海南口碑好基因合成仪销售软件控制合成的所有必要操作并由微处理机来解释和执行。
二、按试剂碱基添加方式分类,DNA合成仪可分为电磁阀气动驱动,蠕动泵驱动两种类型。1,电磁阀气动驱动型:采用高于大气压的惰性气体(氩气,氮气或氦气)为碱基试剂溶液的驱动方式,通过微量电磁阀的开合添加试剂或碱基溶液。主要品牌包括ABI系列合成仪,oligomaker系列合成仪,biolytic系列合成仪,GE系列合成仪及mermade系列DNA合成仪等。2,采用蠕动泵驱动型:采用精密蠕动泵为碱基试剂溶液的驱动方式,通过蠕动泵驱动,滑块的相互滑动选择添加不同碱基试剂溶液。主要品牌包括德国POLYGEN系列DNA合成仪。三、按产物承载容器分,可分为需要一次性合成柱,无需一次性合成仪两类。除德国polygen系列合成仪外,其它所有品牌合成仪,如,oligomaker,mermade,ASM,POLYPLEX,ABI等都使用一次性合成柱作为合成产物的承载容器。
以亚磷酰胺寡核苷酸合成为例介绍该类仪器的一般操作步骤。亚磷酰胺DNA合成的试剂有:保护碱基的5/—DMT,A、G、C、T亚磷酰胺单体,四唑偶联催化剂,乙酐,N—甲基咪唑封闭试剂,三氯乙酸(TCA)脱保护溶液,12氧化混合物,乙腈清洗溶剂,氨水切除溶液。使用步骤如下:1)仔细检查合成仪上所有试剂瓶中的试剂量,必要时换掉试剂瓶,特别注意乙腈的量,因为该溶剂用量较大。2)将标记好的清洁的收集瓶装在合成仪上。3)将要合成的DNA序列输入合成仪。4)检查选择的合成步骤是否正确。5)选择结束方法:TritylOffAuto是仪器的原始状态,若打算以5,—DMT基团连接纯化寡核苷酸,将其转变为TritylOnAuto结束状态。6)选择结束方法,一般为系统的原始状态。7)在每个柱监视器的Use下,输入你所希望的保存名字。8)以代码代替相应的DNA序列标记每一个收集瓶。9)打印出每一个柱设置的详细资料。10)检查打印出来的资料是否正确。11)运行StartColumn步骤检查每一个柱的位置,确保合成仪上合成柱处于正确的位置。12)检查连接在合成仪上的溶剂残留(废液瓶)是否充满。13)如果分部收集器用来收集每个DMT脱保护步骤的流出物,确保试管充分清洁干净,并打开分部收集器,确保DMT废液管路通向分部收集器。 固定过滤板是多孑L性聚苯乙烯固定在两端盖子中。
DNA合成仪一般需碱基瓶组及试剂瓶组。试剂瓶组一般**少为6个,含脱保护剂(Deb)、活化剂(act)、盖帽试剂A(capA)、盖帽试剂B(capB)、氧化剂(OXI)及洗脱乙腈(ACN),每种仪器一般都多设置1-2个试剂瓶位,用于特殊产物的合成。碱基瓶组一般**少为4个标准碱基(A/C/G/T),同时搭配2-多个特殊碱基瓶位,用于荧光标记等合成。
DNA 合成仪的一般原则需要保持内外气体隔绝,因此无论试剂瓶、碱基瓶均需密封保持一定压力。所有压力管路均采用特氟龙导管,直径为1/16—1/8吋。每个瓶子都有一个氩气压力管道及输送管道进入瓶盖插塞,对于亚磷酰胺,1—8号瓶其压力管道也作为排气管。氩气管要保持在液体水平以上,而输送管却伸到瓶的底部。当阀门正确设置打开时,储液瓶上部空间由氩气加压,液体被推进输送管,流到其目的地。 对于阀块的适当运行,关键是隔膜形成一个圆顶小空隙。海南口碑好基因合成仪销售
排气管将废气导入适当的排气装置,如排烟罩。海南口碑好基因合成仪销售
设计用于合成结构上类似DNA或RNA的寡核苷酸的自动化仪器。一般应用于固相合成法,每次将一个核苷酸加到所接长的寡核苷酸链上,加入每一个核苷酸都利用相同的化学反应与相应的嘌呤或嘧啶碱基衍生物作用。所用化学反应和操作细节随不同的仪器而改变,**广泛应用的方法是DNA合成的磷酸酰胺法。
一般地,DNA 合成仪采用一定压力的惰性气体(氩气)或氮气及电磁阀组驱动液体试剂,也可采用氦气驱动试剂。某些合成仪采用slider block滑块系统及精密蠕动泵,可不采用气体为驱动系统。采用气体及电磁阀驱动液体试剂时,需首先将管路系统电磁阀前段,含试剂瓶组中压力加压到规定气压,通过合成管理软件或手动打开电磁阀(一般打开时间为数ms),即可驱动液体试剂到所需的合成柱中。 海南口碑好基因合成仪销售
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