在此实施例中,由于支架是固定在盒体上,因此支架无法取出。这样拧开盒盖时,有机溶剂不会漏出,在在盒体外壁安装有与空腔连通的加液管,加液管用来添加有机溶液,而平时拧盖与加液管为连接状态,只有当盒体内的有机溶液不够时才需要拧开(一般都是在冻存细胞前,室温下添加的),再加上加液管的顶部高度略高于盒体,保证了拧开拧盖时有机溶液不会漏出。
在本实用新型一实施例中,所述加液管5倾斜设置,辽宁低温冻存盒生产厂家。倾斜设置不占用支架的空间,而且也方便加液。
在本实用新型一实施例中,所述支架为阶梯型,辽宁低温冻存盒生产厂家,所述支架由2个圆柱体组成,所述盒体为圆柱体,所述支架的上端与盒体内壁连接,所述支架沿圆柱体的径向方向均匀设有多个冷冻管槽21。冷冻管槽用于放置冷冻管,辽宁低温冻存盒生产厂家。
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冻存细胞时要缓慢冷冻,细胞在不加任何保护剂的情况下直接冷冻时,细胞内外的水分都会很快形成冰晶,冰晶的形成会给细胞带来很大的损伤,即使在有保护剂的条件下,温度过快的下降也会对细胞有一定的损伤,所以要程序降温,以提高细胞的存活。目前人们冻细胞多的还是将要冻存的细胞放四度,负二十度,负八十度,第二天转入液氮这样一个过程,程序复杂,中间过程稍有不慎就会影响冻存效果。技术实现要素:有鉴于现有技术的上述缺点,本实用新型所要解决的技术问题是提供一种程序降温盒,以解决现有技术的不足。为实现上述目的,本实用新型提供了一种程序降温盒,其特征在于:包括降温盒主体、盒盖、冻存管架,所述降温盒主体内壁固定一层保温棉,所述冻存管架装在降温盒主体上部,所述降温盒主体与冻存管架之间有中空层。镇江梯度冻存盒多少钱杭州科默斯科技有限公司业有精专,物超所值。
经验4:应该不可以把冻存盒放4°的,因为梯度降温的起始点是室温20°左右,所以从-80℃拿出来的冻存盒应该现在室温静置一段时间待其恢复到室温再使用。而其中的异丙醇应使用6~7此后更换一次,而且保证液体量达到刻度线,否则降温效果会受到影响。经验5:冻存盒里的异丙醇一般是250ml,低于刻度了要加上,理论上是5次以后更换异丙醇,但是异丙醇对环境有害,我们可以多用几次,只是少了的时候要加满。还有冻存液里面的DMSO对细胞0性,尤其是室温的时候,所以冻存盒和冻存液先放4°,等把细胞用冻存液重悬好了放在冻存盒里,还放回4°,等到出细胞间的时候再拿到-80°里面保存。过夜再转入液氮。程序降温盒这个梯度降温可提高细胞冻存的存活率,由于程序降温盒内存在***浓度的异丙醇和泡沫内衬,因此程序降温盒也可以用于细胞复苏。
发明内容有鉴于此,本实用新型提供了一种程序降温盒,使用安全、方便,提高工作效率。本实用新型的程序降温盒,包括盒盖、盒身和管槽,所述管槽置于盒身内,所述盒盖盖于盒身上且与盒身螺纹配合,还包括连接带,所述连接带一端与盒盖连接,另一端与盒身连接。进一步,所述盒盖顶部设有向上突出的连接柱,所述连接带的两端分别设有套环,所述连接带一端的套环外套于连接柱且与连接柱单自由度转动配合,另一端的套环外套于盒身且与盒身单自由度转动配合;进一步,所述管槽与盒身螺纹配合;进一步,所述盒身内下部设有泡沫衬垫;进一步,所述盒盖为塑料盒盖,所述盒身为透明塑料盒身,所述管槽为塑料管槽,所述连接带为塑料连接带。本实用新型的有益效果在于本实用新型设置了连接盒盖与盒身的连接带,使盒盖与盒身不分离,减少了配对标记这一步骤,减少了操作程序,使用更加方便;同时,本实用新型出入超低温冰箱时,可手提连接带,减少了手的接触面积,减少或防止伤害到;另外,管槽与盒身螺纹配合,增加了密封度,防止了异丙醇挥发而导致的冻存效果变差。杭州科默斯科技有限公司**级的服务,可信赖的伙伴。
冻存盒肯定是先放在室温,然后放进去细胞,置于-80,利用异丙醇实现梯度降温啊。)
根据论坛里的讨论,异丙醇使用过一段时间后是要更换的,但是我一直没换过,也没发现很大问题。
经验2:我们实验室冻存盒平时放4度,需要冻细胞时直接拿出来用就可以了。第二天转移至液氮,贵重的细胞尽快转移,不然会影响复苏成活率的。一般是用5次就更换一下异丙醇。现在也有一些商品化冻存液可以直接丢进-80的,很方便,效果也不错的。
经验3:异丙醇的量是要保证的,不能低于表明的线,否则不能起到很好的程序性降温作用,我们是在4度放置,放了细胞后立马放到-80度冰箱,第二天再转移到液氮,效果很不错。异丙醇熔点:-87.9度的色透明具有乙醇气味的可燃性0液体。注意了有可燃性!急性毒性:口服- 大鼠 LD50: 5840 毫克/ 公斤; 口服- 小鼠 LC50: 3600 毫克/ 公斤。刺激数据:眼睛- 兔子100 毫克/ !请注意清理!
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所需仪器:
-86℃超低温冰箱
离心机
生物安全柜
电动移液器
CO2培养箱
倒置显微镜
液氮罐
所需试剂:
胎牛血清(FBS)
细胞培养级 DMSO
冻存液:80%FBS+**MSO
无菌 1×PBS pH=7.2
消化液:0.25%胰蛋白酶+0.02%EDTA
异丙醇
所需耗材:
离心管(15ml、50ml)
T-25 细胞培养瓶
一次性无菌移液管(2ml、5ml、10ml)
8ml 冻存管
程序降温盒
操作步骤:
将需要那冻存的细胞从 CO2培养箱中取出,在生物安全柜内,打开培养瓶瓶口,
吸弃瓶内的培养基;
向培养内加入无菌 1×PBS 3ml,之后水平放置培养瓶,旋转震荡培养瓶,使 PBS
能够浸润到培养平面上所都的面积,吸弃 PBS;
重复步骤 2 一次,之后向瓶内加入消化液 1ml,轻微震荡后放入 37℃CO2培养
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