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海南本地基因合成仪代理 铸造辉煌 昆山伯利克精密仪器供应

信息介绍 / Information introduction

    给予指令。为了完成自动合成,软件应用一个包含一系列步骤的循环来完成全部化学反应。DNA合成仪操作步骤编辑以亚磷酰胺寡核苷酸合成为例介绍该类仪器的一般操作步骤。亚磷酰胺DNA合成的试剂有:保护碱基的5/—DMT,海南本地基因合成仪代理,A、G、C、T亚磷酰胺单体,四唑偶联催化剂,乙酐,N—甲基咪唑封闭试剂,三氯乙酸(TCA)脱保护溶液,12氧化混合物,乙腈清洗溶剂,氨水切除溶液。使用步骤如下:1)仔细检查合成仪上所有试剂瓶中的试剂量,必要时换掉试剂瓶,特别注意乙腈的量,因为该溶剂用量较大。2)将标记好的清洁的收集瓶装在合成仪上。3)将要合成的DNA序列输入合成仪。4)检查选择的合成步骤是否正确。5)选择结束方法:TritylOffAuto是仪器的原始状态,若打算以5,—DMT基团连接纯化寡核苷酸,将其转变为TritylOnAuto结束状态。6)选择结束方法,一般为系统的原始状态。7)在每个柱监视器的Use下,输入你所希望的保存名字,海南本地基因合成仪代理。8)以代码代替相应的DNA序列标记每一个收集瓶。9)打印出每一个柱设置的详细资料。10)检查打印出来的资料是否正确。11)运行StartColumn步骤检查每一个柱的位置,海南本地基因合成仪代理,确保合成仪上合成柱处于正确的位置。12)检查连接在合成仪上的溶剂残留(废液瓶)是否充满。为了完成自动合成,软件应用一个包含一系列步骤的循环来完成全部化学反应。海南本地基因合成仪代理

    DNA的固相合成。即DNA3'端固定于基质上,然后沿3'向5'方向依此添加核苷酸直至合成所需的DNA片段。不同于应用DNA聚合酶的DNA合成。合成过程第yi个碱基的3‘末端固定在树脂上,下一个碱基的5’-OH用二对甲氧三苯甲基DMT保护,碱基上的氨基用苯甲酸保护,然后对3‘-OH用氨基磷酸化合物进行活化。’-OH和下个碱基的3‘-OH形成亚磷酸三酯,2.然后用碘氧化成磷酸三酯3.加入二氯乙酸除去第二个碱基5’-OH上的保护剂DMT循环进行加入下一个碱基合成完毕后1。用苯硫酚除去5’-OH上的保护剂DMT2。用浓氢氧化铵将片段与固体树脂断开,洗脱3。用浓氢氧化铵在加热的条件下除去碱基上的保护剂4。除去氢氧化铵,真空抽干5。液相色谱或者PAGE,回收片段**长的。北京新品基因合成仪抽气泵为每个阀块提供了辅助真空,辅助真空在隔膜的螺线管一侧形成,使隔膜形成一圆顶空隙。

    13)如果分部收集器用来收集每个DMT脱保护步骤的流出物,确保试管充分清洁干净,并打开分部收集器,确保DMT废液管路通向分部收集器。14)启动循环,运行开始程序清洗试剂管路,除去原来的试剂。注意:TritylOnAuto表示在合成寡核苷酸的5’端核苷酸带有一个DMT,并将其从固相载体上切下来,储存在收集瓶中;TritylOffAuto表示在合成寡核苷酸的5,端核苷酸没有保护基团,将其从固相载体上切下来,储存在收集瓶中;TritylOnManual表示合成寡核苷酸的5’端核苷酸带有一个DMT,寡核苷酸没有从固相载体上切下来,而是保留在合成柱中;TritylOffManual表示在合成寡核苷酸的5,端核苷酸没有保护基团,寡核苷酸没有从固相载体上切下来,而是保留在合成柱中。DNA合成仪日常维护编辑1.瓶塞“O”形环一月检查一次“O”形环,**少1年更换1次。将新的备用“O”形环与仪器上的相比较,如果在“O”形环上出现白色沉淀,用棉花蘸取乙腈,进行清洗。更换“O”形环的步骤如下:用止血钳夹住“O”形环,从槽中取下(或用牙签钩下),注意不要损坏托住“O”形环的白色聚氟乙烯插塞(tefloninsert);确保插塞上没有颗粒后,用手指将新“O”形环推进槽,进行压力实验。

DNA合成仪一般需碱基瓶组及试剂瓶组。试剂瓶组一般**少为6个,含脱保护剂(Deb)、活化剂(act)、盖帽试剂A(capA)、盖帽试剂B(capB)、氧化剂(OXI)及洗脱乙腈(ACN),每种仪器一般都多设置1-2个试剂瓶位,用于特殊产物的合成。碱基瓶组一般**少为4个标准碱基(A/C/G/T),同时搭配2-多个特殊碱基瓶位,用于荧光标记等合成。

DNA 合成仪的一般原则需要保持内外气体隔绝,因此无论试剂瓶、碱基瓶均需密封保持一定压力。所有压力管路均采用特氟龙导管,直径为1/16—1/8吋。每个瓶子都有一个氩气压力管道及输送管道进入瓶盖插塞,对于亚磷酰胺,1—8号瓶其压力管道也作为排气管。氩气管要保持在液体水平以上,而输送管却伸到瓶的底部。当阀门正确设置打开时,储液瓶上部空间由氩气加压,液体被推进输送管,流到其目的地。 DMT阳离子流过电导池时起电导作用。

输送电磁阀试剂输送系统包括两个试剂阀块(8碱基仪器有3个)及2个或4个柱阀块。阀块控制气体和化学试剂流入柱子及出口。除亚磷酰胺和四唑以外,试剂和溶剂都被同时输送到所有活化柱。当有多个活化柱时,对流速的细微变化,以自动调节每个柱子的输送次数来补偿。每一个5—端口柱阀块将流出物导入废液口、DMT收集口,或DNA收集瓶,它也控制用于除去或冲洗柱内和柱阀块内的试剂的氩气。辅助真空对于阀块的适当运行,关键是隔膜形成一个圆顶小空隙,每次电磁阀打开时,抽气泵为每个阀块提供了辅助真空,辅助真空在隔膜的螺线管一侧形成,使隔膜形成一圆顶空隙。控制器指导和初始合成仪的所有活动。北京新品基因合成仪

溶剂和试剂的流速已经设置好,能使颗粒适当地混合。海南本地基因合成仪代理

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