以亚磷酰胺寡核苷酸合成为例介绍该类仪器的一般操作步骤。亚磷酰胺DNA合成的试剂有：保护碱基的5/—DMT，A、G、C、T亚磷酰胺单体，四唑偶联催化剂，乙酐，N—甲基咪唑封闭试剂，三氯乙酸(TCA)脱保护溶液，12氧化混合物，乙腈清洗溶剂，氨水切除溶液。使用步骤如下：1)仔细检查合成仪上所有试剂瓶中的试剂量，必要时换掉试剂瓶，特别注意乙腈的量，因为该溶剂用量较大。2)将标记好的清洁的收集瓶装在合成仪上。3)将要合成的DNA序列输入合成仪。4)检查选择的合成步骤是否正确。5)选择结束方法：TritylOffAuto是仪器的原始状态，若打算以5，—DMT基团连接纯化寡核苷酸，将其转变为TritylOnAuto结束状态。6)选择结束方法，一般为系统的原始状态。7)在每个柱监视器的Use下，输入你所希望的保存名字。8)以代码代替相应的DNA序列标记每一个收集瓶。9)打印出每一个柱设置的详细资料。10)检查打印出来的资料是否正确。11)运行StartColumn步骤检查每一个柱的位置，确保合成仪上合成柱处于正确的位置。12)检查连接在合成仪上的溶剂残留(废液瓶)是否充满。13)如果分部收集器用来收集每个DMT脱保护步骤的流出物，确保试管充分清洁干净，并打开分部收集器，北京口碑好基因合成仪厂家，北京口碑好基因合成仪厂家，北京口碑好基因合成仪厂家，确保DMT废液管路通向分部收集器。 用户设定的循环、步骤和功能，以及瓶子使用资料等。北京口碑好基因合成仪厂家

    试剂驱动系统一般地，DNA合成仪采用一定压力的惰性气体（氩气）或氮气及电磁阀组驱动液体试剂，也可采用氦气驱动试剂。某些合成仪采用sliderblock滑块系统及精密蠕动泵，可不采用气体为驱动系统。采用气体及电磁阀驱动液体试剂时，需首先将管路系统电磁阀前段，含试剂瓶组中压力加压到规定气压，通过合成管理软件或手动打开电磁阀（一般打开时间为数ms），即可驱动液体试剂到所需的合成柱中。试剂和碱基瓶组DNA合成仪一般需碱基瓶组及试剂瓶组。试剂瓶组一般**少为6个，含脱保护剂（Deb）、活化剂（act）、盖帽试剂A（capA)、盖帽试剂B(capB)、氧化剂（OXI）及洗脱乙腈（），每种仪器一般都多设置1-2个试剂瓶位，用于特殊产物的合成。碱基瓶组一般**少为4个标准碱基（A/C/G/T）,同时搭配2-多个特殊碱基瓶位，用于荧光标记等合成。压力管路及输送管路DNA合成仪的一般原则需要保持内外气体隔绝，因此无论试剂瓶、碱基瓶均需密封保持一定压力。所有压力管路均采用特氟龙导管，直径为1/16—1/8吋。每个瓶子都有一个氩气压力管道及输送管道进入瓶盖插塞，对于亚磷酰胺，1—8号瓶其压力管道也作为排气管。氩气管要保持在液体水平以上，而输送管却伸到瓶的底部。 北京口碑好基因合成仪厂家电导流动池是为了测定在每个DNA合成循环内释放的DMT阳离子的总电导而设计的。

路节流阀试剂通过底部的luer接头，流到柱子，如果没拧上下面的一个luer接头，应会在一个圆柱形的玻璃流路节流阀上发现。试剂通过流路节流阀中一个很小的通道流到柱子。小量的试剂可以在流路节流阀中结晶，长期这样会造成流路阻塞。废液和排气大多数化学试剂输送的**终点是废液瓶，废液瓶是一个空立着的10L的聚苯乙烯容器，可放在合成仪附近的地板上或放在低于仪器的附近工作台上。排气管将废气导入适当的排气装置，如排烟罩电导池电导流动池是为了测定在每个DNA合成循环内释放的DMT阳离子的总电导而设计的。流动池是由一空隙隔开的两个电极组成，在空隙之间应用一小电压。DMT阳离子流过电导池时起电导作用。电池

    电池DNA合成仪一般带有锂电池，可以使用几年。当主电源断开时，所有的合成参数都被保留下来。这些参数包括储存的DNA序列，用户设定的循环、步骤和功能，以及瓶子使用资料等。如果正在合成中电源出现故障，合成将被中断，只有主电源恢复时合成才可重新开始。电池还保持合成仪内部的时钟计时。控制器控制器指导和初始合成仪的所有活动，它的主要部分是软件、微处理机、显示屏幕、键板及相关的电子部件。软件控制合成的所有必要操作并由微处理机来解释和执行。软件储存在一个可取出的存储卡中，这个存储卡插在仪器的背面。合成信息显示在液晶显示屏上，通过选择键板上的键可与仪器交流。软件是“菜单驱动”，通过按适当的键，可选择一项，给予指令。为了完成自动合成，软件应用一个包含一系列步骤的循环来完成全部化学反应。 如果分部收集器用来收集每个DMT脱保护步骤的流出物。

    特点与性能编辑一、按照不同用途，DNA合成仪可分为实验室型，工业型和大规模合成三种主要类型。1，实验室型：主要指合成通量较小，且单柱合成产物为10-1000nmol的DNA合成仪，一般为合成柱数低于48柱（含）的DNA合成仪，主要适用于化学生物学实验室，或某些刚起步的商业机构。该类型DNA合成仪品牌较多，包括已停产的ABI391,394,3400,3900，BECKMANoligo-1000，及仍然量产的polygen10柱，12柱，mermade4，6,8,12,48柱；BIOSSETASM-800，AZCOOLIGO-8等。2，工业型工业型合成仪,主要指合成通量大，且单柱合成产物为10-1000nmol的DNA合成仪。工业型合成仪常见的合成柱数为96柱、192柱，384柱或更多合成柱数的合成仪较为鲜见。主要适用于大型实验室，公用实验平台及商业合成机构。 以代码代替相应的DNA序列标记每一个收集瓶。浙江基因合成仪对比价

正常的流路是从底部进入，通过向上输送液体，使CPG颗粒上升并保持悬浮状态。北京口碑好基因合成仪厂家

    以自动调节每个柱子的输送次数来补偿。每一个5—端口柱阀块将流出物导入废液口、DMT收集口，或DNA收集瓶，它也控制用于除去或冲洗柱内和柱阀块内的试剂的氩气。辅助真空对于阀块的适当运行，关键是隔膜形成一个圆顶小空隙，每次电磁阀打开时，抽气泵为每个阀块提供了辅助真空，辅助真空在隔膜的螺线管一侧形成，使隔膜形成一圆顶空隙。合成柱起始结合在载体（一般为CPG）上的核苷酸是装在一次性的柱子中，除柱体外，还有2个固定过滤板和2个接头，所有的部件都由惰性材料制成。固定过滤板是多孑L性聚苯乙烯固定在两端盖子中。入口和出口都是母路厄氏(1uer)接头，与仪器的公路厄氏接头配对。柱子是对称的(没有顶端和底部、前后之分)，可以以任何方式与公路厄氏接头相连接。每一个柱子都用颜色编号，表示不同的起始核苷酸，以及有一个唯yi的连续顺序号码。正常的流路是从底部进入，通过向上输送液体，使CPG颗粒上升并保持悬浮状态。溶剂和试剂的流速已经设置好，能使颗粒适当地混合。路节流阀试剂通过底部的luer接头，流到柱子，如果没拧上下面的一个luer接头，应会在一个圆柱形的玻璃流路节流阀上发现。试剂通过流路节流阀中一个很小的通道流到柱子。北京口碑好基因合成仪厂家

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