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济南程序冻存盒使用方法 无冰工作站 杭州科默斯科技供应

信息介绍 / Information introduction

请问梯度冻存盒到底怎么使用?两种方法:

是先把冻存盒放在室温,把细胞放在冻存盒,置于-80度?(這样的好处:细胞可以从室温开始缓慢降温)(并且,据说冻存盒的使用本来就是从20度室温开始降)

还是将冻存盒先放在4度降温,再将细胞放进去,放于-80?(這样的好处:常温下冻存液中DMSO对细胞损伤大,从4度开始降温比较好?)用液氮冻存细胞是医学、生物学等研究领域常用的技术,目前国内实验室液氮中存放的冻存盒通常为不透明的盒体,在盒体内设置有多个隔板,形成能插入多个管瓶的空间,能够储藏多个细胞样品。但是现有的细胞冻存盒,保温效果差,在运输过程中冷气快速流失造成细胞的变质,同时冻存管摆放架只可摆放单一结构的冻存试管,功能性弱,并且冻存管摆放架的高度不可调节,无法针对不同高度的冻存试管进行保存。针对上述问题,急需设计一种新型的细胞冻存盒,济南程序冻存盒使用方法。技术实现要素:本实用新型的目的在于提供一种细胞冻存盒,以解决上述背景技术中提出现有的细胞冻存盒,保温效果差,在运输过程中冷气快速流失造成细胞的变质,济南程序冻存盒使用方法,同时冻存管摆放架只可摆放单一结构的冻存试管,功能性弱,并且冻存管摆放架的高度不可调节,济南程序冻存盒使用方法,无法针对不同高度的冻存试管进行保存的问题。 杭州科默斯科技有限公司和传统的昨天告别,向规范的未来迈进。济南程序冻存盒使用方法

为实现上述目的,本实用新型提供如下技术方案:一种细胞冻存盒,包括冻存盒盖、冻存盒本体、冻存管摆放架和分隔板,所述冻存盒盖的下端设置有冻存盒盖连接块,所述冻存盒本体的底部安装有固定底座,且冻存盒本体上预留有连接卡槽,所述冻存管摆放架通过导向柱与冻存盒本体的内部相互连接,且冻存管摆放架和冻存盒本体之间的缝隙为分隔板固定卡槽,所述分隔板上粘贴有指示标签,且分隔板将冻存管摆放架划分为冻存区、第二冻存区和第三冻存区,所述冻存区、第二冻存区和第三冻存区上均设置有冻存管插孔。福建科默斯冻存盒图片杭州科默斯科技有限公司期待着与志同道合的同仁精诚合作。

在此实施例中,由于支架是固定在盒体上,因此支架无法取出。这样拧开盒盖时,有机溶剂不会漏出,在在盒体外壁安装有与空腔连通的加液管,加液管用来添加有机溶液,而平时拧盖与加液管为连接状态,只有当盒体内的有机溶液不够时才需要拧开(一般都是在冻存细胞前,室温下添加的),再加上加液管的顶部高度略高于盒体,保证了拧开拧盖时有机溶液不会漏出。

在本实用新型一实施例中,所述加液管5倾斜设置。倾斜设置不占用支架的空间,而且也方便加液。

在本实用新型一实施例中,所述支架为阶梯型,所述支架由2个圆柱体组成,所述盒体为圆柱体,所述支架的上端与盒体内壁连接,所述支架沿圆柱体的径向方向均匀设有多个冷冻管槽21。冷冻管槽用于放置冷冻管。


所需仪器:

-86℃超低温冰箱

离心机

生物安全柜

电动移液器

CO2培养箱

倒置显微镜

液氮罐

所需试剂:

胎牛血清(FBS)

细胞培养级 DMSO

冻存液:80%FBS+**MSO

无菌 1×PBS pH=7.2

消化液:0.25%胰蛋白酶+0.02%EDTA

异丙醇

所需耗材:

离心管(15ml、50ml)

T-25 细胞培养瓶

一次性无菌移液管(2ml、5ml、10ml)

8ml 冻存管

程序降温盒

操作步骤:

将需要那冻存的细胞从 CO2培养箱中取出,在生物安全柜内,打开培养瓶瓶口,

吸弃瓶内的培养基;

向培养内加入无菌 1×PBS 3ml,之后水平放置培养瓶,旋转震荡培养瓶,使 PBS

能够浸润到培养平面上所都的面积,吸弃 PBS;

重复步骤 2 一次,之后向瓶内加入消化液 1ml,轻微震荡后放入 37℃CO2培养


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低温冻存技巧冷冻凝固的过程中,水分会在0℃~-20℃区间形成不同形状的结晶在细胞冻存时“降温速度、冰晶形成量和细胞渗透压改变程度”是冻存成功与否的重要关键。降温速度慢:冰晶由细胞外开始形成,造成胞外渗透压变小,细胞内水份移动至细胞外造成细胞脱水。降温速度快:水分流动时间短,细胞内外渗透压改变程度小,但大量水分留在细胞内造成大量胞内冰晶形成,使得胞器损坏。这些都可能引起细胞损伤、凋亡或坏死,也可能造成复苏后细胞存活率低、细胞形态改变、细胞功能丧失、基因变异等现象。由此可知,适合的冻存条件为“在增加细胞渗透压稳定性的溶液中,以慢到能减少胞内冰晶形成,但也足够快到能预防细胞脱水的降温速度冻存细胞”。杭州科默斯科技有限公司诚信履约,互相帮助。济南程序冻存盒使用方法

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我们实验室冻存盒平时放4度,需要冻细胞时直接拿出来用就可以了。第二天转移至液氮,贵重的细胞尽快转移,不然会影响复苏成活率的。一般是用5次就更换一下异丙醇。现在也有一些商品化冻存液可以直接丢进-80的,很方便,效果也不错的。经验3:异丙醇的量是要保证的,不能低于表明的线,否则不能起到很好的程序性降温作用,我们是在4度放置,放了细胞后立马放到-80度冰箱,第二天再转移到液氮,效果很不错。异丙醇熔点:-87.9度的色透明具有乙醇气味的可燃性0液体。注意了有可燃性!急性毒性:口服- 大鼠 LD50: 5840 毫克/ 公斤; 口服- 小鼠 LC50: 3600 毫克/ 公斤。刺激数据:眼睛- 兔子100 毫克/ !请注意清理!济南程序冻存盒使用方法

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