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上海基因突变荧光定量PCR检测服务 欢迎咨询 上海朝瑞生物科技供应

信息介绍 / Information introduction

荧光定量PCR技术是指在PCR反应体系中加入荧光基团,通过荧光信号不断累积而实现实时监测PCR全程,然后通过标准曲线对未知模板进行定量分析的方法。在实时荧光定量PCR中,对全程PCR扩增过程进行实时检测,上海基因突变荧光定量PCR检测服务,上海基因突变荧光定量PCR检测服务,根据反应时间和荧光信号的变化可以绘制成一条曲线

Ct值:C**Cycle,t**threshold,上海基因突变荧光定量PCR检测服务,Ct值的含义是每个反应管内的荧光信号到达设定的域值时所经历的循环数

荧光背景信号阶段:在荧光背景信号阶段,扩增的荧光信号与背景无法区分,无法判断产物量的变化

为了正确地评估 PCR 效率,至少需要 3 次重复和至少 5 个数量级倍数的模板浓度。图 6 说了建议此精确级别的理由,它证明在 1 个数量级倍数与 5 个数量级倍数范围内测试稀释模板时,获得的斜率或效率可能产生数学偏差。因此,即使检测 ** 有效,由于每个稀释点都存在标准差,检测一个数量级倍数的连续稀释时,可能获得 70 至 170% 的范围。在 5 个数量级倍数范围内做相同数量的稀释点或重复,可能的偏移只有 ±8%。这意味着在 5 个数量级倍数范围内,如果效率为 94%,则该实验的效率范围介于 88% 到 ** 之间。为了准确测定 PCR 反应的效率,必须进行 5 个数量级倍数的连续稀释。-3.3 ±10% 的斜率意味着效率达到 ** ±±10%。PCR 反应效率越低,那么灵敏度越低。

荧光定量PCR(Flurogenic Quantitative Polymerase ChainReaction,FQ-PCR;real-time quantitative PCR, RT-qPCR or qPCR), 是1996 年由美国Applied Biosystems 公司推出的一种新定量试验技术,它是通过荧光染料或荧光标记的特异性探针,标记PCR产物进行实时监测反应,利用与之相适应的软件对产物进行分析,计算待测样品模板的初始浓度

实时荧光定量PCR(Real-TimePCR)技术是在PCR技术的基础上发展起来的核酸定量技术,是1996年美国Applied

Biosystems公司推出,它是通过在PCR反应体系中加入荧光基团,然后利用荧光信号的积累强弱实时监测整个PCR进程,通过标准曲线对未知的DNA模板进行定量。

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