在大肠杆菌中获得***表达，经亲和纯化后得到，北京CAR T人源Claudin18.2蛋白质量放心可靠。(3)融合蛋白的纯化和复性表达产物经裂菌、溶解包涵体、Ni-NTA亲和层析柱的纯化，蛋白纯度可达80%以上。上述步骤(1)中rhHis-TT-Claudinl8,2蛋白的制备方法是采用RT-PCR方法从人胃*KATOIII细胞中获得，将该片段连接TT83，北京CAR T人源Claudin18.2蛋白质量放心可靠,3基因片段后插入pQE-30载体中构建；含有目的基因；表达产物的鉴定；重组蛋白的纯化；***小鼠体内胃*MFC细胞和胰腺*MPC-83细胞的生长。本发明的重组人()，通过免疫荷瘤小鼠产生抗，从而有可能为胃*和胰腺*的免疫***提供一种新的蛋白质***。本发明的应用目的在于以体内产生针对，从而研究应用主动免疫的方法进行**的免疫***。依照本发明的技术方案，釆用RT-PCR的方法获得，构建原核表达载体，并在大肠杆菌中获得***表达。表达产物经溶解包涵体、Ni-NTA亲和层析柱的纯化，蛋白纯度可达80%以上。纯化后的性结合人胃*KATOIII和胰腺*PANC-1细胞以及小鼠胃*MFC和胰腺*MPC-83细胞的抗体，北京CAR T人源Claudin18.2蛋白质量放心可靠，同时还可以***小鼠体内胃*MFC和胰腺*MPC-83细胞的生长。通过体外实验发现，使用的抗体可以特异性与胃*和胰腺*等多种肿瘤细胞结合；正常胃的细胞和组织与该**疫苗免疫后产生的抗体*有少量结合。

    并在其表面呈现载体肽与MHCII类分子的复合物，由于Th细胞对载体蛋白没有免疫耐受，所以能够被***，从而协同自抗原特异性的B细胞产生针对自身抗原的特异性抗体。与T细胞耐受相比，B细胞耐受要宽松得多。实际上，在许多情况下，自身特异性B细胞在体内以正常的频率出现，如果受到抗原和Th细胞的共同作用就会被***。所以对许多可溶性自身蛋白来讲，体内存在其特异性B细胞株，尤其当这种蛋白不是非常富余表达的时候更是这样。对于这类蛋白或多肽，将其与载体蛋白相连，绕过T细胞耐受，就有可能产生有效的疫苗。发明内容综上所述，本发明的目的在于提供一种重组人备方法，以克服胃*、胰腺*、食道*以及转移和未转移卵巢*免疫***中手术切除复发率高、化疗和放疗毒副作用强以及单抗***费用高等问题。为了实现上述目的，本发明所釆用的技术方案是一种重组人Claudinl8,2**疫苗，其序列为HMKSSQYIKANSKFIGEFD上述重组人，依次包括下述步骤(1)RT-PCR方法获得***个胞外区基因片段(第28位氨基酸至第79位氨基酸)，与丁丁83。.843基因片段连接后，插入pQE-30原核表达载体，转化大肠杆菌；在大肠杆菌中获得***表达，经纯化后得到。(2)重组蛋白表达将构建好的菌。

    抑瘤实验每周观察小鼠体内抗体滴度变化，待观察到形成**组织块后隔天检测**体积和小鼠体重。小鼠死亡时取出**组织称重，计算抑瘤率。全文摘要本发明属于医药生物技术领域，具体涉及一种重组人。本发明要克服胃*、胰腺*、食道*以及转移和未转移卵巢*免疫***中手术切除复发率高、化疗和放疗毒副作用强以及单抗***费用高等问题。所采用的技术方案是一种重组人，其序列为HMKSSQYIKANSKFIGEFDQWSTQDLYNNPVTAVFNYQGLWRSCVRESSGFTECRGYFTLLGLPAMLQAV。通过动物实验证实∶10000以上；该抗体可以与人KATOIII和PANC-1肿瘤细胞以及小鼠胃*MFC和胰腺*MPC-83细胞相结合；该蛋白作为**疫苗可***小鼠体内胃*MFC和胰腺*MPC-83细胞的生长。文档编号C12N15/70GKSQ8公开日2009年11月25日申请日期2009年4月27日优先权日2009年4月27日公开号8.发明者镭刘。

免责声明： 本页面所展现的信息及其他相关推荐信息，均来源于其对应的用户，本网对此不承担任何保证责任。如涉及作品内容、 版权和其他问题，请及时与本网联系，我们将核实后进行删除，本网站对此声明具有最终解释权。