通常在多肽和生物素之间使用6-氨基己酸作为纽带，纽带能够灵活结合底物，并且在有空间位阻的情况下能结合地更好。9、荧光标记荧光标记可用于追踪活细胞内多肽，也可用于研究酶和作用机制。色氨酸（Trp）带有荧光，因此可以被用于内在标记。色氨酸的发射光谱取决于**环境，随着溶剂极性降低而降低，这种性质对于检测多肽结构和受体结合很有用处[12]。色氨酸荧光可以被质子化的门冬氨酸和谷氨酸淬灭，这可能会限制其使用。丹磺酰氯基团（Dansyl）与氨基结合时具有高度荧光，也常被用于氨基酸或蛋白质的荧光标记。荧光共振能量转换（FRET）对酶的研究十分有用，应用FRET时，底物多肽常含有一个荧光标记基团和一个荧光淬灭基团。标记的荧光基团会被淬灭剂通过非光子能量传递淬灭。当多肽从所研究的酶上解离下来，标记基团就会发射荧光。10、笼形多肽笼形多肽有光学移除性的保护基，广东RNA合成仪厂商，光学移除性保护基可以屏蔽多肽与受体的结合。当受到UV照射时，多肽会被活化，广东RNA合成仪厂商，广东RNA合成仪厂商，恢复与受体的亲和力。由于这种光学活化可以根据时间、振幅或者位置来控制，因而笼形多肽可以被用于研究细胞内发生的反应[13]。**常用于笼形多肽的保护基是2-硝基苄基及其衍生物。

    3.将膜切成凝胶尺寸。将膜以45度角缓慢滑入转移缓冲液中并使其湿润浸泡15-30分钟。膜的完全润湿对于确保适当的结合非常重要。突然润湿会导致气泡滞留在基质中，这些气泡会阻止转移分子。为避免膜污染，处理膜时请始终使用镊子或戴手套。4.将滤纸切成凝胶尺寸。两张超厚滤纸（或四张厚纸或六张纸，每个凝胶/膜三明治都需要每种凝胶都需要滤纸）。通过浸入转移缓冲液完全浸透滤纸。5、请勿在本仪器上颠倒极性，否则会导致不锈钢阴极腐蚀和生锈。如果发生这种情况，则应使用温和的磨蚀性清洁剂清洁不锈钢以去除锈迹。6.用本仪器不要超过25V。这可能会损坏电极。7.除非另有特别说明，否则请勿调节转移缓冲液的pH值。请仔细按照说明进行操作。如果未指示，则调节转移缓冲液的pH值将导致增加缓冲液的电导率。这表现为电源电流表显示的初始电流输出高于预期。监控每次运行之前，请使用200/20型电源提供缓冲电阻，以确保适当的缓冲电导率。8.不建议长时间转移。请勿使本仪器保持连接状态。在半干印迹过程中，焦耳热会迅速产生。

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