将未发生霉变的带有胚的一半种子用于愈伤**诱导实验；b、**消毒：于无菌环境下，将挑选的种子置于无菌三角瓶中，用无菌水清洗3-5次，75％酒精摇动清洗5min，无菌水清洗3-5次，5％naclo浸泡30min(期间每隔5-10min摇动30s)，清水洗3-5次，种子表面的无菌水可用干燥的无菌滤纸吸去。(2)配制诱导培养基：cs基本培养基+，用超纯水溶解，。cs基本培养基的成分及用量如表1所示。(3)愈伤**的诱导方法：用弯头镊子将无菌种子的缺口一端倾斜插入cs水稻成熟胚愈伤**诱导培养基，胚贴于培养基表面；于温度24-26℃、湿度50-70％、光照强度1500-2500lux、光照和黑暗交替(光照时间16h、黑暗时间8h)条件下培养。(4)cs诱导培养基的诱导结果为：水稻成熟胚愈伤**诱导时，经cs诱导培养基诱导培养12-14d产生大量淡黄色结构致密的团状愈伤**，出愈率为100％。如图7所示。对比培养例7：将cs基本培养基替换为ms基本培养基，其余完全同培养实例7，ms基本培养基的成分及用量如表1所示。ms诱导培养基的诱导结果为：水稻成熟胚愈伤**诱导时，经ms诱导培养基诱导培养12-14d产生大量淡黄色结构致密的团状愈伤**，出愈率为100％。如图7所示。F12培养基在细胞分化和基因表达研究中有重要应用。福建RPMI1640培养基答疑解惑

    体外培养时，一定的浓度范围条件下，葡萄糖主要经糖酵解循环转化成乳酸来为细胞提供能量。（氨基酸）氨基酸在细胞内的重要生理作用主要体现在以下几个方面：①是蛋白质的基本组成单位，用于合成蛋白质和多肽；②可用于合成某些具有重要生理作用的含氮化合物，如核酸、尼克酰胺等；③某些氨基酸还具有独特的生理作用，如甘氨酸参与生物转化作用，丙氨酸和谷氨酰胺参与细胞内氨的运输等；④可转变成糖类和脂肪，参与氧化供能。细胞所能利用的氨基酸是L型同分异构体，D型氨基酸不能被利用。不同的细胞对氨基酸的需求各异，但有些必需氨基酸是细胞不能自身合成的，必须依靠外源的细胞培养液提供。其余非必需氨基酸，细胞可以自己合成，或通过转氨作用由其他物质转化而来，但是在细胞培养基中添加适当浓度的非必需氨基酸可以减轻细胞在合成方面的负担，提高谷氨酰胺及其它必需氨基酸的利用率。绝大部分细胞对谷氨酰胺有较高的要求，可能因其不仅是细胞的主要氮源，且可作为细胞生长的能源物质和嘌呤、嘧啶核苷酸的前体，另外还可直接作为细胞增殖和产物合成中的蛋白质和多肽的组成成分。在缺少谷氨酰胺时，细胞会生长不良，甚至死亡。由于谷氨酰胺具有多种生理作用。陕西RPMI1640培养基进货价F12培养基支持多种细胞的生长和增殖。

    实验组和对照组3选用发酵中期添加琥珀酸，此时，菌体增殖放缓，以产酸为主，琥珀酸对三羧酸循环有正向促进作用，而对乙醛酸循环途径起**作用，从而导致谷氨酸产量的增加；梯度试验发现，琥珀酸添加量过**于10g/l），并不会对谷氨酸产量带来进一步的提升，综合成本考虑，选择低于10g/l的添加量较为合适。对照组2和实验组在发酵中后期添加壳聚糖，能够改变细胞壁的通透性，促进谷氨酸分泌到胞外，从而提升谷氨酸产量和糖酸转化率；但是壳聚糖添加量（超过100mg/l）过大会导致抑菌现象发生，进而造成菌株死亡。虽然，上文中已经用一般性说明及具体实施方案对本发明作了详尽的描述，但在本发明基础上，可以对之作一些修改或改进，或在实施案例之外的树种实施本方法，这对本领域技术人员而言是显而易见的。因此，在不偏离本发明精神的基础上所做的这些修改，改进或范围的扩大，均属于本发明要求保护的范围。

    可通过在细胞培养基中添加一些保护剂，降低细胞-气体和细胞-液体的表面张力，减少气泡的形成。4.细胞培养基的**及储存**方式及注意事项细胞培养基**的方式分为高压**和膜过滤**，不同的培养基由于其营养成份不同，**方式也可能不同。①高压**某些培养基（如MEM）可进行高压**，这类培养基一般不含有L-谷氨酰胺和碳酸氢钠，一般是在培养基高压**后才加入。另外可用耐高压的谷氨酸盐（如L-丙氨酰-L-谷氨酰胺）代替L-谷氨酰胺。可高压**的培养基在121℃、15psi，15分钟的条件下完全可达到**效果及营养成分的**小损失，不需将**时间延长。绝大多数细胞培养基不适宜高压**。因培养液中常含有维生素、蛋白质、多肽、生长因子等物质，这些物质在高温或射线照射下易发生变性或失去功能，因而上述液体多采用过滤消毒以除去**。可供过滤**使用的滤膜很多，其材料多为polyethersulphone（PES）、尼龙、多聚碳酸盐、醋酸纤维素、硝酸纤维素、PTFE、陶瓷等。膜过滤**是当前较为常用及便捷的一种方法，常采用μm孔径的滤膜，部份采用μm孔径。与高压过滤方式相比，滤膜具有使用期限且价格较高，但对细胞培养基的营养成份破坏性较小。通常液体细胞培养基避免-20℃冻存。使用减血清培养基能减少实验的误差和干扰。

    本氏***叶片及根愈伤**诱导的对比效果图，a：叶片愈伤**；b：叶片愈伤**诱导率；c：根愈伤**；d：根愈伤**诱导率；a和c中bar＝；图7是cs和ms两种培养基上，水稻成熟胚愈伤**诱导的对比效果图，a：水稻成熟胚愈伤**；b：水稻成熟胚愈伤**诱导率；a中bar＝；图8是用不同ph的超纯水(ph为)配制的cs、ms、1/2cs和1/2ms液体培养基ph值稳定性比较效果图；图9是在未调ph和将ph调至、ms、1/2cs和1/2ms液体培养基中马铃薯幼苗的生长状况的比较效果图，a：不同液体培养基培养前的无菌苗生长情况；b1、c1和d1：1/2ms未调ph液体培养基培养效果；b2、c2和d2：1/2cs未调ph液体培养基培养效果；b3、c3和d3：ms未调ph液体培养基培养效果；b4、c4和d4：cs未调ph液体培养基培养效果；b5、c5和d5：1/；b6、c6和d6：1/；b7、c7和d7：；b8、c8和d8：；a、b、c和d中bar＝；图10是对在未调ph和将ph调至、ms、1/2cs和1/2ms液体培养基中马铃薯幼苗的茎高(a)、茎中粗(b)、根长(c)、鲜重(d)进行统计的比较效果图。具体实施方式下面结合附图和实施例对本发明作进一步描述。实施例一，本实施例广适性植物**培养基，其每1000ml培养基中含有：kno32662mg、。F12培养基在细胞分化研究中表现优越。西藏基础培养基常用知识

MEM培养基在药物筛选中有重要作用。福建RPMI1640培养基答疑解惑

    c、结果为：在用未调ph液体培养基进行培养时，整体长势从优至弱分别为1/2cs未调ph液体培养基、cs未调ph液体培养基、1/2ms未调ph液体培养基、ms未调ph液体培养基；在用ph调至，整体长势从优至弱分别为1/、、1/、；不论是否调ph至，cs液体培养基培养的马铃薯幼苗长势均优于ms液体培养基；不论是否调ph至，1/2cs液体培养基培养的马铃薯幼苗长势均优于1/2ms液体培养基。如图9和图10所示。说明，1/2cs液体培养基和cs液体培养基应用于植物水培时，不论是否调节ph至，均能获得很好的培养效果，克服了传统液体培养基必须调节ph后才适用于植物水培的缺点。**后说明的是，以上实施例*用以说明本发明的技术方案而非限制，尽管参照较佳实施例对本发明进行了详细说明，本领域的普通技术人员应当理解，可以对本发明的技术方案进行修改或者等同替换，而其不脱离本发明技术方案的宗旨和范围，则均应涵盖在本发明的权利要求范围当中。福建RPMI1640培养基答疑解惑

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