在分子生物学研究中,RNA的完整性分析是评估RNA质量和功能的重要环节。10×RNALoadingBuffer作为一种高效、便捷的上样缓冲液,在RNA电泳实验中发挥着不可或缺的作用。本文将详细介绍10×RNALoadingBuffer的产品特点和性能。一、产品特点高浓度设计10×RNALoadingBuffer是一种10倍浓缩的上样缓冲液,使用时需稀释至1×。这种高浓度设计减少了试剂的使用量,同时保证了样品在电泳过程中的稳定性和均匀性。示踪染料的双重指示该缓冲液含有溴酚蓝(BromophenolBlue)和二甲苯青(XyleneCyanolFF)两种示踪染料。溴酚蓝在1.2%甲醛变性琼脂糖凝胶电泳中与约500个碱基的RNA迁移速率相当,而二甲苯青则与约5000个碱基的RNA迁移速率相当。这种双重示踪设计能够直观地反映电泳的进程,帮助实验人员准确判断RNA的迁移情况。无RNase污染RNA分子对RNase极为敏感,因此在RNA实验中,避免RNase污染是关键。10×RNALoadingBuffer经过严格的质量控制,确保无RNase杂质污染,从而保证RNA样品的完整性。适用性该缓冲液适用于多种类型的RNA样品,包括总RNA、小RNA以及特定RNA的片段的电泳分析。它不仅可用于甲醛变性的琼脂糖凝胶电泳,也适用于非变性电泳和聚丙烯酰胺凝胶电泳。TBE (Thymine base editor):这是一种新型的碱基编辑工具,不依赖脱氨酶,能够通过人源化尿嘧啶DNA-糖基化酶。Recombinant Human BetacellulinProtein,hFc Tag
BstDNA聚合酶和TaqDNA聚合酶在分子生物学实验中都是常用的酶,但它们之间存在一些关键的不同点:1.**来源和热稳定性**:-**TaqDNA聚合酶**来源于嗜热菌Thermusaquaticus,具有很好的耐热性,能够承受PCR的热变性步骤。-**BstDNA聚合酶**来源于嗜热脂肪芽孢杆菌(Bacillusstearothermophilus),同样具有较高的热稳定性,适用于等温扩增,如LAMP技术,无需PCR热循环。2.**酶活性**:-**TaqDNA聚合酶**具有5'-3'聚合酶活性和5'-3'外切酶活性,但没有3'-5'外切酶活性。这意味着它在DNA合成过程中可以校正一些错误,但保真性相对较低。-**BstDNA聚合酶**具有5'-3'聚合酶活性和强链置换活性,但缺乏5'-3'外切酶活性。这使得它在等温扩增中更为有效,尤其是在需要高保真度和快速扩增的应用中。3.**应用领域**:-**TaqDNA聚合酶**主要用于PCR技术,适用于各种DNA片段的扩增,包括复杂模板和长片段的扩增。-**BstDNA聚合酶**特别适用于等温扩增技术,如LAMP,这些技术不需要温度循环,适用于快速、低成本的DNA扩增。4.**扩增速度和效率**:-**BstDNA聚合酶**在等温扩增中显示出比传统TaqDNA聚合酶更快的扩增速度和更高的产量,尤其是在优化的LAMP反应中。
在分子生物学研究中,核酸染色是检测DNA和RNA的关键步骤,而溴化乙锭(EthidiumBromide,EB)作为一种经典的荧光染料,因其高效性和灵敏性被广泛应用于核酸电泳、荧光分析等领域。产品特点高灵敏度与特异性EB是一种多环芳烃荧光小分子,能够特异性地嵌入双链DNA和RNA中。结合后,其荧光强度增强,双链RNA和双链DNA的荧光强度分别可增强21倍和25倍。这种特性使得EB能够检测到低至10ng的DNA条带,非常适合用于微量核酸的检测。多种应用EB不仅用于琼脂糖凝胶电泳和聚丙烯酰胺凝胶电泳中的核酸染色,还可以作为DNA聚合酶抑制剂,用于核酸的荧光分析实验。此外,EB还可与吖啶橙联合使用,用于区分活细胞、凋亡细胞和坏死细胞。便捷的使用方法10mg/ml的EB溶液是一种预制的储存液,使用时只需稀释至工作浓度(通常为0.5µg/ml),即可用于电泳前或电泳后的染色。例如,在琼脂糖凝胶制备时,每100mL胶液中加入2-5µL的10mg/mlEB溶液即可。稳定的储存条件10mg/ml的EB溶液在室温下避光保存即可,有效期可达1-2年。这种储存条件使得EB溶液在实验室中易于保存和管理。
高灵敏度与特异性该产品采用优化的SYBRGreenI染料配方,能够与双链DNA特异性结合,即使在低拷贝数的目标序列中也能实现高灵敏度检测。其优化的反应体系确保了高效的扩增效率,同时减少了非特异性产物的生成。低ROX参考染料产品中预混了低浓度的ROX参考染料,适用于多种qPCR仪器平台,无需额外添加或调整ROX浓度,简化了实验操作流程,同时保证了荧光信号的稳定性和准确性。UDG防污染系统为了防止qPCR实验中的气溶胶污染,该产品引入了dUTP/UDG防污染体系。UDG酶能够降解含有dUTP的残留DNA,从而有效避免假阳性结果的出现,确保实验数据的可靠性。快速反应与模板兼容性SYBRGreenqPCRMix(2×,LowROX,UDGPlus)采用了高性能的热启动TaqDNA聚合酶,能够在短时间内完成反应,同时兼容高GC或高AT含量的DNA模板,展现出优异的扩增性能。便捷的2×预混液设计该产品为2×浓度的预混液,包含qPCR所需的所有关键组分,如TaqDNA聚合酶、dNTPs、缓冲液等,需加入引物和模板即可进行反应,简化了实验操作。Cas12a不仅具有顺式切割活性,还具备独特的反式切割活性,这使得它能够无差别地裂解附近的单链DNA。
Taq DNA Polymerase:科研中的关键工具Taq DNA Polymerase 是一种应用于分子生物学研究中的热稳定DNA聚合酶,其独特的性能和特点使其成为PCR技术的重要工具。产品特点Taq DNA Polymerase 的特点是其出色的耐热性。该酶来源于嗜热菌Thermus aquaticus,能够在高温条件下保持活性,适催化温度为75-80℃,即使在95℃下保温半小时,仍能保留50%以上的活性。此外,Taq酶具有5'→3'聚合酶活性,能够在PCR反应中高效地合成DNA链。然而,它缺乏3'→5'校正活性,这意味着在扩增过程中可能会引入少量错误,但对于大多数常规PCR应用而言,这种特性并不影响其好的使用。Taq酶的另一个重要特性是其5'→3'外切酶活性,这一特性使其在探针法qPCR中具有独特的优势。此外,Taq酶在PCR产物的3'末端会添加一个A碱基,这使得PCR产物可以直接用于TA克隆。在gRNA的引导下,Cas9 NLS可以对特定DNA序列进行剪切,适用于研究基因功能或进行基因编辑 。Recombinant Human FZD10/Frizzled-10 Protein-VLP
Hot-Start Taq DNA Polymerase 的优势在于其独特的热启动机制。该酶结合了一种温度敏感的抑制剂。Recombinant Human BetacellulinProtein,hFc Tag
快速高效的扩增能力AdvanceFastPCRMasterMix采用了改良型的高保真DNA聚合酶,能够在极短时间内完成PCR扩增。其延伸速度可达5秒/kb,甚至在1kb以内的片段需1秒即可完成扩增。这种高速扩增能力缩短了实验时间,提高了科研效率。高保真性与高特异性该产品使用高保真DNA聚合酶,保真性远高于普通Taq酶,能够有效减少扩增错误和非特异性产物。同时,预混液中添加了特异性保护剂,即使在反复冻融后仍能保持稳定的活性。即用型预混液,操作简便AdvanceFastPCRMasterMix(2×)(WithDye)是即用型的2×预混合溶液,包含所有PCR反应所需成分,如高保真DNA聚合酶、dNTPs、优化缓冲体系和电泳指示剂。用户只需加入引物和模板即可进行扩增,简化了实验步骤,减少了人为误差。兼容性强,适用范围广该产品适用于多种类型的DNA模板,包括基因组DNA、质粒DNA和cDNA。此外,其扩增产物为平末端,可直接用于后续的克隆、测序等应用。Recombinant Human BetacellulinProtein,hFc Tag
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