美国Hamilton Thorne的TOX IVOS精子分析仪已经被FDA和国内外毒理学实验室所使用。本试验研究目的对精子分析仪和血细胞计数板在大鼠附睾精子计数结果的比较验证。方法选取三批次雄性SD大鼠60只,每批20只,对三批次雄鼠的精子计数进行比较。健康雄鼠通过戊巴比妥钠麻醉实施安乐死后,取左侧附睾尾称重,将附睾尾部放入37℃预热的含有M199培养液平皿中,剪碎附睾尾,放入培养箱中37℃孵育5 min,然后吸取1份精子悬液,用M199培养液进行一定倍数的稀释,混匀后,取1滴稀释液,滴入精子分析仪**载玻片上,将载玻片放入TOX IVOS精子分析仪载物台,进行精子计数,同时吸取稀释后的精子悬液滴入血细胞计数板内,通过光学显微镜进行计数,比较两种计数方法的差异性。结果***批次雄鼠精子分析仪和血细胞计数器的精子计数结果分别为70.2±33.2,61.0±27.1;第二批次雄鼠精子分析仪和血细胞计数器的精子计数结果分别为128.8±116.8,114.6±86.9;第三批次雄鼠精子分析仪和血细胞计数器的精子计数结果分别为165.9±91.7,140.0±59.6。三个批次的精子分析仪和血细胞计数板的精子计数结果无统计学差异(P>0.05)。结论精子分析仪是一种方便、可靠、快速、高效的研究工具,在生殖毒理学研究中具有重要的应用价值。IVOS和CEROS集成了智能化的分析软件,能够自动识别和计算精子的各项参数,减少了人工操作的误差。上海计算机辅助精子分析W.H.O 5
精液检查前有什么注意事项?
一、留精液前,病人应停止**4~7天。检查前1周不能用丙酸睾丸酮、**睾丸酮、苯丙酸诺龙。采取精液时,可用软皂或石蜡油做**按摩,将标本收集在无菌的试管中;也可用避孕套(冲洗干净,不含杀精子药物)或采用**中断法收集精液,但这样收集的量往往不多。如用上述方法采不到精液,可经直肠内按摩精囊及输精管末端、压迫采尿,检查沉渣中有无精子。不要将精液暴露在过热和过冷的环境中。及时交给医生备查,不得超过30分钟。冷天要注意保暖,送检时可放在内衣口袋里保温。
二、如果要进行细菌培养,应先冲洗、消毒尿道口,再将精液收集在无菌试管中。夫妻同居3年以上,没有采取任何避孕措施而未能受孕的称不孕症。如果是不孕症,在双方未进行检查前,不能盲目怀疑某一方,更不能认为不孕的原因是女方。妊娠是夫妻双方的事。实现受孕,男方的精液含量应正常,形态和动力也应正常。女方能正常排卵,精子和卵子能结合成受精卵,这种受精卵能在子宫内膜种植。上述的几个环节中的某一个环节发生障碍,都可引起不孕。
三、如果上述检查结果精液是正常的,女方也应去医院检查,包括全身情况、生殖***、卵巢排卵功能、输卵管通畅否、免疫检查。 上海兔子精子分析ALHHamilton Thorne精子分析仪具备快速和高效的分析功能,能够在短时间内处理大量样本,提高工作效率。
精液一般检查
(1)精液量:正常人一次排精2~5ml。(2)颜色和透明度:正常刚射出的精液呈乳白色或灰白色,液化后呈半透明乳白色,久未排精者可呈淡黄色。鲜红色或暗红色的血精见于生殖系统炎症、结核、和**,黄色脓样精液,见于精囊炎或前列腺炎。(3)粘稠度和液化:正常新鲜的精液排出后数秒呈粘稠胶冻状,在精液中纤溶酶的作用下30分钟后开始液化。如果粘稠度降低呈米汤样,可能是精子数量减少,见于生殖系统炎症,精液不凝固见于精囊阻塞或损伤;如果精液1小时后不液化,可能是由于炎症破坏纤溶酶所致,如前列腺炎,精子不液化可以抑制精子活动力而影响受孕。(4)酸碱度:pH值。正常精液呈弱碱性pH7.2~8.0,以利于中和酸性的阴道分泌物,pH值小于7或大于8都能影响精子的活动和代谢,不利于受孕。
扩展性检查:可以在某些情况下由实验室选择或根据临床医生的特殊要求而使用的项目。手册增加了精子DNA损伤、遗传学和炎症细胞等相关检查项目。提出了基因突变是导致不育和精液常规检查异常的原因。新增了精液相关细胞因子、趋化因子等检测的方法、试剂、检测步骤等内容。在精液参数异常的男性中普遍存在精子DNA损伤,并且已有报道指出其与精液参数正常男性的不育有关。由于与精液质量相关,精子DNA损伤检测是男性不育检查中的重要补充内容,已成为男科学基础和临床中论述**多、**有前景的精子损伤分子标志物之一。本版手册增加了大量篇幅对其原理和检测方法进行了描述。新增了基因和基因组测序内容。临床上,越来越多的人意识到染色体异常[数量异常、结构异常(包括微缺失和微重复)]和基因突变是导致各种男性不育症的基础病因,而这正是在精液分析中观察到的许多异常的原因。尽管基因和基因组测序常规在医学遗传学实验室进行,但一些男科实验室也在做同样的检测。为明确生殖道炎症对于男性不育的影响,泌尿男科医生可能提出对精液中的趋化因子和细胞因子进行评估。本手册纳入了精液中白细胞介素检测方法。HAMILTON THORNE精子分析仪可分析参数,摆动性(WOB):实际的曲线路径关于平均路径的摆动值。
采集精液前5~7天内必须停止性生活,并且不得有**、梦遗等情况,还应禁烟戒酒,忌服对生精功能有影响的药物等。采取精液时间以晨起为佳,采精前用温水将双手、**,尤其是**洗净。可采用**法或电动按摩**法引起排精。精液的排出具有一定顺序,开头部分来自前列腺、附睾及壶腹,伴有大量精子,***部分来自精囊,故应收集整份精液,不要遗漏任何部分,尤其是开头部分。正因为易丢失精液的***部分,故不能用体外**法收集精液。盛精液的容器应干净、无菌、干燥,采精前容器的温度应与室温相同;瓶子不应过大,但瓶口不应过小,以免将精液射出瓶外;还应贴上标签,记录姓名及取精时间。在冷天应将精液标本保温,放置在贴身内衣袋中,不可倾斜或倒置,尽可能在1小时内送到实验室。传统的CASA系统仍使用传统阈值图像处理方法,准确率有待提高。北京精子分析VCL
IVOS具有高分辨率和高灵敏度的特点,能够捕捉到微小的细节和变化,进一步提高了精子分析的准确性。上海计算机辅助精子分析W.H.O 5
精子计数是在显微镜下计算一次排出的精液中精子的数量将精子计数值乘以精液量就可得出一次**的量。
精液液化后将样本按一定比例稀释和固定后,滴于血细胞计数板上,在显微镜下计数红细胞计数区内的所有精子数并换算为每m1内所含精子数。此外还可用电子细胞计数仪经调整阈值设置后计数精子数量。
将已经液化的精液标本均匀混合,用白细胞计数吸管吸精液至0.5刻度,再吸稀释液至11刻度,振荡三分钟,然后置于血球计数板内,计数二大格(每格面积1平方毫米)之精子数,在尾数后加5个“0”即得每毫升精液内精子数。例如计数为1280个,则每毫升精子应为128,000,000。精液稀释液之配制:重碳酸钠5克、福尔马林1毫升、蒸馏水加至100毫升。稀释液内重碳酸钠有消化粘液的作用,福尔马林有使精子制动的作用。如精液之稠度过高而不易吸取时,可以精液1毫升混匀于稀释液19毫升内,稀释后进行计数。如精子的数目极少,亦可改为稀释10倍计数。每次排精75%的精子是从附睾尾部所贮存的,还有25%是由输精管道的其他部分来的,因此单凭一次排精的精子计数来衡量睾丸生精机能是不***的。只有在排精后间隔4-5天以后多次精液检查,才能比较正确地从这些精子计数来反映睾丸的生精机能。 上海计算机辅助精子分析W.H.O 5
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