胰蛋白酶**点评胰蛋白酶能使痰、血凝块溶化变稀，易于引流排痰，加速创面愈合净化，促进肉芽**增生，而不损伤正常**，临床上有消消肿功能。[4]胰蛋白酶其他胰蛋白酶细胞培养胰蛋白酶的作用是使细胞间的蛋白质水解从而使细胞离散。不同的**或者细胞对胰酶的作用反应不一样。胰酶分散细胞的活性还与其浓度、温度和作用时间有关，在pH为、温度为37℃时，胰酶溶液的作用能力**强。使用胰酶时，应把握好浓度、温度和时间，以免消化过度造成细胞损伤。因Ca2+、Mg2+和血清、蛋白质可降低胰酶的活性，所以配制胰酶溶液时应选用不含Ca2+、Mg2+的BSS，如：D-Hanks液。终止消化时，可用含有血清培养液或者胰酶**剂终止胰酶对细胞的作用。1.称取胰蛋白酶：按胰蛋白酶液浓度为%，用电子天平准确称取粉剂溶入小烧杯中的双蒸水（若用双蒸水需要调PH到左右）或PBS（D-hanks）液中。搅拌混匀，置于4℃内过夜。2.用注射滤器抽滤消毒：配好的胰酶溶液要在超净台内用注射滤器（微米微孔滤膜）抽滤**。3.分装成小瓶于-20℃保存以备使用可！词条图册更多图册参考资料1.胰蛋白酶．化学品数据库[引用日期2017-05-26].***典**会，***典2010版[M]，北京：**医*科技出版社。胰酶使用的时候要注意什么？重庆EDTA胰酶采购

胰蛋白酶是一种肽链内切酶，属于丝氨酸蛋白酶家族，不仅可以水解碱性氨基酸（精氨酸或赖氨酸）羧基端的肽键，还可以水解由碱性氨基酸的羧基形成的酰胺键或酯键。胰蛋白酶可以从牛、猪等哺乳动物的胰脏提取，经过纯化后获得结晶，再制成冻干制剂。牛的胰蛋白酶有223个氨基酸，分子量为23800道尔顿，活性部位的丝氨酸残基是不可缺少的丝氨酸蛋白酶。胰蛋白酶溶于水，不溶于乙醇、甘油和三氯甲烷等有机溶剂。胰蛋白酶的等电点pH值为10.1，**适pH值范围在7.8~8.5左右，pH值大于9.0时不可逆失活。钙离子对胰蛋白酶的酶活具有保护和***作用。[1]重庆EDTA胰酶采购胰蛋白酶可以用于原代细胞的传代过程中分散组织。

在组织细胞的体外培养和原代细胞培养中的组织细胞分散（将组织块制备成单个细胞悬液）以及传代细胞培养中，贴壁生长细胞的消化分散均要使用组织细胞消化液。常用的消化液为胰蛋白酶 (Trypsin) ，EDTA 等。胰蛋白酶是一种丝氨酸水解酶，它能把多肽链中赖氨酸和精氨酸残基中的羧基侧切段，水解细胞间的蛋白质，破坏细胞间的连接，从而使组织或贴壁细胞离散成单个细胞。胰酶分散细胞的活性与组织或细胞的特性、胰酶浓度、温度和作用时间有关，在PH 8.0和37℃时，胰酶的作用能力**强，因此使用胰酶时，应把握好浓度、温度和时间，以免消化过度造成细胞损伤。一般常用胰酶的工作浓度为0.25%，而半贴壁细胞或对胰酶敏感的细胞常采用低浓度（0.05%）的胰酶进行细胞消化。由于EDTA能够螯合Ca2+和Mg2+，从而破坏细胞连接促进细胞的解离，因此在胰酶溶液中常常会加入一定量的EDTA混合使用，以增强解离效果。

胰酶消化细胞的原理胰酶消化细胞是一种用来分解细胞质和细胞间物质的化学过程它可以被看成一种简单的动力学过程，它将细胞结合部分的物质分解为其他物质，然后这些留下的物质可以用来维持细胞的高能量水平这种过程通过将脂肪、蛋白质、糖类和其它物质分解为小的离子或者原子小分子的方式来发生。胰酶是细胞分解与吸收物质的一种关键分子，通常有四种类型，它们是肽酶，脂水解酶，载脂蛋白酶和糖水解酶，分别可以将蛋白质、脂肪、脂蛋白和糖类物质分解为更小的离子和分子，以便细胞可以更好地吸收物质，维持其自身的正常功能和形态。胰酶4℃保存，一年有效；-20℃可保存更长时间。

胰蛋白酶（Trypsin）简称胰酶，是一种丝氨酸水解酶，能把多肽链中赖氨酸和精氨酸残基中的羧基端切断。在组织细胞的提取、培养，以及体外细胞培养过程中，均会使用到胰蛋白酶消化液，用于水解细胞间蛋白质，使组织或细胞离散成单个细胞。胰酶在37℃pH8.0条件下消化能力**强。常用胰酶工作浓度为0.25%。EDTA可以螯合钙镁离子，胰酶溶液中搭配EDTA使用可以加速细胞间连接蛋白的水解，起到增强消化的效果。酚红是一种pH指示剂，溶液偏碱性时呈紫红色，偏酸性时呈橘红色，近中性时呈粉红色。本产品为0.25%胰蛋白酶消化液，含0.25%胰蛋白酶，溶于Hank’s缓冲液，不含EDTA，无酚红指示剂，经0.22μm过滤除菌。胰酶细胞消化液含 0.25%胰酶和 0.02%EDTA。重庆EDTA胰酶采购

胰酶细胞消化液(Trypsin-EDTA Solution)含0.25%胰酶和0.02%EDTA。重庆EDTA胰酶采购

胰酶分装冻存时要注意什么？胰酶分装时尽量分装成多瓶，并遵守3次左右用完和只装2/3体积的原则。因为冷冻保存时体积会膨胀，多次使用同一瓶胰酶反复冻融会降低消化效果并增大污染的可能性。5、怎么才能判断胰酶消化完全？注意：不是细胞全部成间隔分布很离散的单个圆形才表示消化好了。一般肉眼观察贴壁细胞层，只要能移动了，多半呈沙状移动就可以了，就应该停止消化。6、胰酶适用于哪些细胞消化？它的消化效果与哪些有关呢？胰酶适用于消化细胞间质较少的软组织和传代细胞，如胚胎、上皮、肝、肾等组织，但对纤维性组织和较硬的*组织效果较差。胰酶的消化效果主要与pH值、温度、胰酶浓度、组织块大小和硬度有关。重庆EDTA胰酶采购

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