维持15-20分钟，可杀灭所有的繁殖体和芽胞。本法适用于耐高温、耐湿物品的**，如普通培养基、生理盐水、手术敷料等。（二）下向主要介绍高压蒸气**器**效果的验证方法高压蒸气**器使物品**后达到无菌要求，这是**实验中的基本保证。高压**器**效果是否合格足实验成败的**基础**关键的首要步骤。除少数培养基只需加热溶解，不需高压**外，大部分培养基均需121℃高压**15-30分钟。尤其是对无菌试验培养基**不彻底，直接关系到对**的无菌试验结果。因此必须认真对高压**器进行**效果的验证。为此我们提供了进行**效果验证的一个简易可行的方法。1．试验材料(1)嗜热脂肪芽胞杆菌纸片。嗜热脂肪芽胞杆菌(Bacillusstearothermophilus)ATCC7053是本法常用的生物指示菌，含芽胞量5-lO5CFU/片。(2)121℃压力蒸气**化学指示卡。(3)溴甲酚紫胨水培养基116℃高压**20分钟后备用。(4)O—150℃留点温度计。2．方法与结果将嗜热脂肪芽胞杆菌纸片（以下简称菌片）用无菌镊子放人密封试管中。化学指示卡和留点温度计放入敞口试管中。以上两种试管各准备5-10份。分别放置在高压**器蒸气口处、底部排气口处及底部出水口处或上下左右中间5处。如**器为二层，则需放10处。MEM培养基适合多种类型的细胞培养实验。山东MEM a培养基供应商

    nh4)2so4264mg、nh4h2po4288mg、mgso4·7h2o370mg、cacl2332mg、mnso4·h2o15mg、znso4·7h2o4mg、h3bo33mg、cocl2·、cuso4·、na2moo4·、nafeedta37mg、肌醇100mg、烟酸2mg、盐酸硫胺素7mg、盐酸吡哆醇1mg、甘氨酸2mg。将本实施例中的广适性植物**培养基命名为cs基本培养基。实施例二，本实施例广适性植物**1/2培养基，其每1000ml培养基中含有：kno31331mg、(nh4)2so4132mg、nh4h2po4144mg、mgso4·7h2o185mg、cacl2166mg、mnso4·h2o15mg、znso4·7h2o4mg、h3bo33mg、cocl2·、cuso4·、na2moo4·、nafeedta37mg、肌醇100mg、烟酸2mg、盐酸硫胺素7mg、盐酸吡哆醇1mg、甘氨酸2mg。将本实施例中的广适性植物**1/2培养基命名为1/2cs基本培养基。上述实施例中的cs基本培养基、1/2cs基本培养基与现有ms基本培养基及1/2ms基本培养基的成分对比如表1所示：表1ms、cs、1/2ms、1/2cs基本培养基成分表上述实施例中的cs基本培养基和1/2cs基本培养基，若应用于植物**培养中的固体培养基制作，可根据实际需要添加包含但不限于适量***、蔗糖、葡萄糖、白糖、琼脂、植物凝胶、卡拉胶、大量元素水溶肥等，添加量同ms培养基一致，调节ph至，121℃15min灭菌后摇匀分装。山东MEM a培养基供应商MEM培养基提供了丰富的营养成分，支持细胞的快速增殖。

    促使植物材料快速生长、芽体健壮。本发明在一较佳示例中可以进一步配置为：在s4中，将s3中的无菌外植体接入增殖培养基中后的培养环境为在光照强度1500lux条件下，温度25℃，光照时间16h；黑暗条件下，温度23℃，光照时间8h，培养8～12周。通过采用上述技术方案，在该培养条件下能够有效避免增殖培养阶段植物材料出现应激反应，植物材料能够快速适应增殖培养基，促使植物材料快速生长、芽体健壮。本发明在一较佳示例中可以进一步配置为：在s4中，每隔8～12周转接入新的增殖培养基。通过采用上述技术方案，经过8～12周后，增殖培养基的效果将会减弱，植物材料也会污染增殖培养基，需要及时更换。本发明在一较佳示例中可以进一步配置为：在s5中，将s4中的绣球组培苗接入生根培养基中后的培养环境为在光照强度1500lux条件下，温度25℃，光照时间16h；黑暗条件下，温度23℃，光照时间8h，培养8～12周。通过采用上述技术方案，在该培养条件下能够有效避免生根培养阶段植物材料出现应激反应，植物材料能够快速适应生根培养基，促使植物材料快速生长、芽体健壮。本发明在一较佳示例中可以进一步配置为：在s2中，外植体消毒的具体步骤为将树莓外植体叶片剪去，自来水冲洗干净。

    5）微量元素：硒是**常见的。①无蛋白无血清细胞培养基（proteinfreemidium,PFM）这类培养基完全不含有动物来源蛋白，但仍有部份添加物是植物蛋白的小水解片段或合成多肽片段，以及类固醇***和脂类前体等，以替代动物***、生长因子的作用。其特点是完全没有蛋白或蛋白含量极低，有利于生物制品的分离纯化。④化学组份限定无血清细胞培养基（Chemicallydefinedmedia,CDM）此类培养基是目前**安全、**为理想的无血清细胞培养基，所有成份的浓度都完全明确，即使其所添加的少量蛋白，也是可经过纯化处理，成份明确、浓度确定的蛋白。这类培养基较为理想地减少了生产的可变性，提高了生产工艺的重复性，并有效降低了纯化成本。严格意义上来说，个性化细胞培养基不在细胞培养基的传统分类之列，其具体是指一类根据细胞特性、细胞培养工艺特点、使用者需求习惯而量身定制的细胞培养基，主要目的是提高细胞产率、产品质量、产品安全性和降低血清的使用等。个性化细胞培养基可能是无血清培养基，也可能是低血清培养基，**终是为满足某一种或某一类生物制品的生产需求。2.培养基的基本组分细胞培养基必须含有充分的营养物质。无酚红培养基避免了酚红对细胞的潜在毒性作用。

    **早开发的基础培养基（minimalessentialmedium,MEM），其本质为含有盐、氨基酸、维生素和其他必需营养物的pH缓冲的等渗混合物。在此基础上，DMEM、IMDM、HAMF12、PRMI1640等各种合成细胞培养基被不断开发出来。常用合成培养基的配方此处不详细介绍，其特性及应用的范围见表1-2。表1-2常用合成培养基的特性及应用的范围培养基名称特性及应用范围199细胞培养基添加适量的血清后，可***用于多种细胞培养，并用于**学、*苗生产等。MEM细胞培养基MEM（MinimalEssentialMedium）培养基有含Earle's平衡盐的类型，也有含Hanks'平衡盐的类型；有高压**型的，也有过滤**型的；还有含非必需氨基酸的类型。是**基本、适用范围**广的细胞培养基。DMEM细胞培养基DMEM（Dulbecco’smodifiedMinimalEssentialMedium）是由Dulbecco在MEM培养基的基础上改良获得的，各成分份量加倍，分低糖（1000mg/L）、高糖（4500mg/L）两种类型。细胞生长快。附着稍差的肿*细胞、克隆培养用高糖效果较好，常用于杂交*的骨髓*细胞和DNA转染的转化细胞培养。IMDM细胞培养基IMDM（Iscove’smodifiedDMEM）是由Iscove在DMEM基础上改良，增加了几种氨基酸和胱氨酸量等。可用于杂交*细胞培养。MEM培养基在细胞培养中表现出高效的稳定性。山东MEM a培养基供应商

无酚红培养基在细胞实验中减少了不必要的干扰。山东MEM a培养基供应商

    培养实例2：兰兹贝格型拟南芥无菌植株培养培养实例2与培养实例1不同的地方在于：步骤(1)所用种子为兰兹贝格(ler,landsbergerecta)型拟南芥种子，兰兹贝格拟南芥较哥伦比亚拟南芥具有更早的花期，在适宜条件下培养，可以获得处于各发育时期的拟南芥无菌***，包括根、胚轴、叶柄、子叶、莲座叶、茎、花、角果等，其余完全同培养实例1。1/2cs生长培养基的培养结果为：兰兹贝格型拟南芥种子在1/2cs生长培养基上的萌发率为100％，培养28d的幼苗，表现为植株健壮、平均株高为，莲座叶发达、平均**大莲座叶长为，叶色浓绿，根系粗壮、平均主根长为，花序含有较多花朵，花粉形态和活力均正常、平均有活力的花粉为％。如图2所示。对比培养例2：将1/2cs基本培养基替换为1/2ms基本培养基，其余完全同培养实例2，1/2ms基本培养基的成分及用量如表1所示。1/2ms生长培养基的培养结果为：兰兹贝格型拟南芥种子在1/2ms生长培养基上的萌发率为100％，培养28d的幼苗，表现为植株健壮、平均株高为，莲座叶发达、平均**大莲座叶长为，叶色浓绿，根系粗壮、平均主根长为，花序发育良好，花粉形态和活力均正常、平均有活力的花粉为％。如图2所示。山东MEM a培养基供应商

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