生化实验中加入缓冲液的目的和作用生物缓冲液是一种能够保持pH值不受酸碱度影响的溶液,多种细胞只能在很小的PH范围内活动,需要有缓冲体系来维持整个过程不受干扰。尤其是在生化实验中,生物缓冲液极其受重视,因为实验中的各类物质非常容易使PH发生变化,而这就直接影响到整体工作进程。例如在酶活性实验中,有时因为PH的变化大,会使酶活性下降甚至失活,导致实验无法进行下去,所以在生化实验中加入缓冲液的主要目的就是维持PH的稳定。在生化研究工作中,常常要用到缓冲溶液来维持实验体系的酸碱度.重庆缓冲液是什么
当往某些溶液中加入一定量的酸和碱时,有阻碍溶液pH变化的作用,称为缓冲作用,这样的溶液叫做缓冲溶液。弱酸及其盐的混合溶液(如HAc与NaAc),弱碱及其盐的混合溶液(如NH3.H2O与NH4Cl)等都是缓冲溶液。由弱酸HA及其盐NaA所组成的缓冲溶液对酸的缓冲作用,是由于溶液中存在足够量的碱A-的缘故。当向这种溶液中加入一定量的强酸时,H离子基本上被A-离子消耗:所以溶液的pH值几乎不变;当加入一定量强碱时,溶液中存在的弱酸HA消耗OH-离子而阻碍pH的变化。重庆缓冲液是什么缓冲溶液的作用是在有限的范围内调整溶液的pH值,使待测溶液的酸度符合分析方法所规定的范围。
PBS溶液又称磷酸盐缓冲溶液,一般选择Na2HPO4和KH2PO4配制,因为钠盐溶解的较慢。根据不同pH的溶液,称量不同质量的磷酸盐,也可以用pH计调溶液的pH。PBS一般用作支持电解质。
配置方法播报编辑采用去离子水、KH2PO4和Na2HPO4·2H2O配制PBS溶液,按以下步骤进行:(1) 配制1/15mol/L KH2PO4,即每升水中溶解9.078克KH2PO4;(2) 配制1/15mol/LNa2HPO4·2H2O,即每升水中溶解11.876克Na2HPO4·2H2O;(3) 将18.2%(体积分数)KH2PO4溶液和81.8%Na2HPO4·2H2O混合;
HBSS 与 EBSSHanks 的平衡盐溶液(HBSS)和 Earle 的平衡盐溶液(EBSS)都是等渗溶液,用于维持生物应用中的渗透压和 pH 值。虽然 HBSS 和 EBSS 包括葡萄糖和碳酸氢钠,用于短期维持生长培养基以外的细胞,但 EBSS 在 5% CO2 下使用,而 HBSS 包含较少的碳酸氢钠,可以在没有 CO2 的情况下使用。从各种依应用而定的配方中进行选择。
Dulbecco 的磷酸盐缓冲液(DPBS)DPBS 与 PBS 的不同之处在于它还包括氯化钾,并且提供多种配方。它也用于生物应用,水基缓冲液,包括氯化钠和磷酸盐缓冲液。 多种细胞只能在很小的PH范围内活动,需要有缓冲体系来维持整个过程不受干扰。
做ELISA确定抗原**佳包被浓度,做方阵滴定具体怎么做呢?选择好一份已知为阳性和阴性背景的标本,将你的抗原用1*CBPH=*PBPH=(8个条件)后加入96孔板每孔100ul。(一般包被浓度100ng抗原或抗体/孔,**优包被条件需进行试验选择)4度过夜取出后甩干,加入20%NBS封闭每孔200ul。37度2h热封,甩去后拍干即可。将你HRP或AP标记的抗原或二抗用酶标稀释液进行稀释(倍比稀释4个梯度)即可。棋盘滴定就是板酶交叉,同时带上阳性、阴性通过试验确定**佳P/N的包被搭配E的试验2.抗原和抗体**佳工作浓度的确定?抗原抗体反应要求在**适比例条件下进行,ELISA反应试剂多,其工作浓度不同对结果影响较大,因此必须对包被抗原(抗体)和酶标抗体(抗原)进行**佳工作浓度的滴定和选择,以达到**佳的测定条件。?1)方阵(棋盘)滴定法选择包被抗原的工作浓度用包被液将抗原作一系列稀释。在生化实验或研究工作中要慎重地选择缓冲体系,因为有时影响实验结果的因素并不是缓冲液的pH值。山西DPBS缓冲液哪家便宜
PBS缓冲液的离子浓度与人体血液相似。重庆缓冲液是什么
常用作缓冲溶液的酸类由弱酸及其共轭酸盐组合成的溶液具有缓冲作用。常见的缓冲体系有:1、弱酸和它的盐(如HAc---NaAc)2、弱碱和它的盐(NH3·H2O---NH4Cl)3、多元弱酸的酸式盐及其对应的次级盐(如NaH2PO4---Na2HPO4)的水溶液组成。而生化实验室常用的缓冲系主要有磷酸、柠檬酸、碳酸、醋酸、巴比妥酸、Tris(三羟甲基氨基甲烷)等系统,生化实验或研究工作中要慎重地选择缓冲体系,因为有时影响实验结果的因素并不是缓冲液的pH值,而是缓冲液中的某种离子。如硼酸盐、柠檬酸盐、磷酸盐和三羟甲基甲烷等缓冲剂都可能产生不需要的化学反应。硼酸盐:硼酸盐与许多化合物形成复盐、如蔗糖。柠檬酸盐:柠檬酸盐离子容易与钙结合,所以存在有钙离子的情况下不能使用。磷酸盐:在有些实验,它是酶的抑止剂或甚至是一个代谢物,重金属易以磷酸盐的形式从溶液中沉淀出来。而且它在。三羟甲基氨基甲烷:它可以和重金属一起作用,但在有些系统中也起抑制作用。其主要缺点时温度效应。这点往往被忽视,在室温pH是,4℃时是,37℃时是,因此,4℃配制的缓冲液在37℃进行测量时,其氢离子浓度就增加了10倍。在,其缓冲能力极为不理想。 重庆缓冲液是什么
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