Karmali氏弯曲杆菌琼脂培养基是一种专门用于分离和培养弯曲杆菌属(Campylobacter)细菌的培养基,尤其是空肠弯曲杆菌(Campylobacterjejuni)和大肠弯曲杆菌(Campylobactercoli)。以下是它的一些特点:1.**无血培养基**:Karmali氏培养基是一种无血的培养基,这使得它在某些应用中比需要添加血液的培养基更为方便和经济。2.**选择性培养**:该培养基含有万古霉素(vancomycin)和两性霉素B(amphotericinB)等选择性添加剂,这些添加剂有助于抑制其他非目标微生物的生长,从而提高目标弯曲杆菌的分离率。3.**微需氧环境**:弯曲杆菌是微需氧菌,Karmali氏培养基通常在微需氧条件下使用,这有助于弯曲杆菌的生长。4.**菌落特征**:在42°C下培养42小时后,空肠弯曲杆菌菌株在这种培养基上通常产生灰色、湿润、平铺的菌落,这些特征有助于识别弯曲杆菌。5.**配方**:Karmali氏弯曲杆菌琼脂培养基的基础配方包含特殊蛋白胨、玉米淀粉、氯化钠、活性碳和血晶素(hemin),以及琼脂作为固化剂。这些成分为细菌的生长提供了必需的营养物质,并且活性碳有助于中和代谢产生的产物。6.**应用**:这种培养基被ISO委员会推荐使用,适用于从食品、动物饲料和临床样本中分离弯曲杆菌。PYG培养基的干粉应在避光、干燥处保存,未开封的保质期通常为三年。使用后应立即旋紧瓶盖,避免吸潮结块 。mTEC琼脂平板
使用TCBS琼脂进行细菌分离实验的步骤如下:1.**准备工作**:-确保实验室无菌操作条件,穿戴适当的实验服和手套。-准备无菌的接种环、涂布器、无菌吸管和移液器等工具。2.**配制培养基**:-按照培养基包装上的说明,称取适量的TCBS琼脂粉末。-将称取的TCBS琼脂粉末加入到适量的蒸馏水中,通常为100mL。-将混合物加热至沸腾,以确保琼脂完全溶解。3.**冷却和倾注平板**:-将溶解好的培养基冷却至50℃左右(避免过热,以免杀死细菌),此时琼脂应该仍然是液体状态。-将冷却的培养基倒入无菌的培养皿中,一般倾注量为15-20mL/平皿。-等待琼脂凝固,形成固体培养基平板。4.**接种样品**:-使用无菌操作,将待检测的样品涂布或划线接种到TCBS琼脂平板上。-可以使用稀释涂布法、螺旋接种法或其他适当的接种方法。5.**培养**:-将接种后的平板倒置,放入恒温培养箱中。-根据实验要求,通常在36±1℃下培养18-24小时。6.**观察和选择菌落**:-培养结束后,观察平板上的生长情况,记录不同类型菌落的特征。-选择性地挑选出特定的菌落,如蓝绿色或黄色菌落,这些可能是目标弧菌。
溶菌酶营养肉汤基础是一种用于微生物学研究的培养基,特别是在鉴定某些细菌对溶菌酶的敏感性方面。以下是它的一些主要特点:1.**成分**:溶菌酶营养肉汤基础的主要成分包括牛肉浸粉和蛋白胨,这些成分为细菌的生长提供碳源、氮源、维生素和生长因子。此外,还需要添加0.1%的溶菌酶溶液,溶菌酶是一种能够水解细菌细胞壁的酶,主要用于检测细菌对溶菌酶的耐受性。2.**pH值**:该培养基的pH值通常调节在6.8±0.1(25℃),以保证细菌在比较好pH环境下生长。3.**灭菌处理**:制备好的培养基需要进行121℃高压灭菌15分钟,以确保无菌。4.**使用方法**:称取培养基粉末,溶解于蒸馏水中,分装于烧瓶中,每瓶99ml,高压灭菌后冷却至50℃左右时,每瓶中加入0.1%溶菌酶溶液1ml,混匀后分装无菌试管,每管2.5ml,备用。5.**用途**:溶菌酶营养肉汤基础主要用于蜡样芽孢杆菌的溶菌酶试验,如GB4789.14-2014标准所述。它可以用来鉴定细菌是否能够在溶菌酶存在的情况下生长,从而帮助鉴别不同的细菌种类。6.**添加剂**:每瓶培养基需配套添加0.1%溶菌酶溶液使用,每支添加于99mL溶菌酶营养肉汤中。
营养琼脂方瓶(罗氏瓶)通常是指营养琼脂培养基的一种包装形式,适合实验室进行微生物培养使用。营养琼脂是一种基础培养基,用于非苛养微生物的培养,以及在生化或血清学测试前的质量控制和纯度检查。以下是营养琼脂的典型配方:1.**成分**:-蛋白胨:10.0g/L-牛肉膏粉:3.0g/L-氯化钠:5.0g/L-琼脂:15.0g/L-终pH值:7.3±0.2(25℃)2.**配制方法**:-称取33g营养琼脂培养基粉末,加入1000mL蒸馏水或去离子水。-搅拌加热煮沸至完全溶解。-分装到方瓶(罗氏瓶)中,通常分装量为100mL或500mL。-121℃高压灭菌15分钟。3.**使用方法**:-灭菌完成后,取出方瓶并冷却至大约40-45°C。-如果需要富集,可在灭菌后加入血液或其他生物液体。-在无菌条件下,将培养基倒入无菌的培养皿中或作为液体培养基使用。-培养基凝固后,可将培养皿放置在热空气烤箱中,用较低温度烘烤几分钟,以去除使用前培养皿上的任何水分。4.**储存方法**:-粉末形式的培养基应储存在10至30°C之间,容器需紧密封闭。-制备好的培养基应在20-30°C的环境中储存。克氏双糖铁试验时间通常控制在18-24小时,以确保细菌发酵充分且不过度,避免影响判断结果。
DTA培养基(葡萄糖胰蛋白胨琼脂)是一种用于微生物培养的培养基,其特点和使用方法如下:1.**用途**:DTA培养基主要用于嗜热菌芽孢(包括需氧芽孢总数、平酸芽孢和厌氧芽孢)的分离培养。2.**成分**:该培养基的成分通常包括胰酪蛋白胨、葡萄糖、琼脂和溴甲酚紫。具体成分比例为胰酪蛋白胨10.0g/L、葡萄糖5.0g/L、琼脂15.0g/L以及溴甲酚紫0.04g/L。3.**pH值**:pH值控制在6.7±0.1(25℃)。4.**检验原理**:胰酪蛋白胨提供碳氮源、维生素和生长因子;葡萄糖作为可发酵的糖,溴甲酚紫作为酸碱指示剂;琼脂作为凝固剂。5.**配制方法**:称取30.0gDTA培养基粉末,加热溶解于1000ml蒸馏水中,然后在121℃下高压灭菌15分钟,备用。6.**使用方法**:在加热灭菌前,培养基成分应边搅拌边溶解于水中。灭菌时间通常要在121℃下保持15~20分钟,这个时间从中心温度达到121℃开始计算。7.**结果观察**:嗜热脂肪芽孢杆菌在DTA培养基上的生长特征为黄色菌落。8.**微生物灵敏度试验**:按标签用法制备培养基,接种质控菌株,放置于55℃需氧培养48小时,以验证培养基的性能。DCR培养基通常包含酵母浸膏、酪蛋白水解物、葡萄糖、无机盐等,这些为植物细胞提供碳源、氮源、维生素。去氧胆酸盐琼脂(DC)培养皿
PK琼脂培养基的制备通常包括将干燥的培养基粉末与适量的水混合,加热至琼脂完全溶解,然后分装到培养皿中。mTEC琼脂平板
尿素培养基是一种用于检测和分离细菌的生化培养基,特别是那些能够产生脲酶的细菌,如某些变形杆菌和幽门螺旋杆菌。以下是尿素培养基的一些特点和配制方法:1.**配方组成**:-蛋白胨:1.0g-氯化钠:5.0g-葡萄糖:1.0g-磷酸二氢钾:2.0g-酚红:0.012g-琼脂:20.0g-蒸馏水:1000ml-40%尿素水:5ml2.**配制方法**:-将上述成分(除葡萄糖和尿素外)溶解在蒸馏水中,加热煮沸,调节pH至7.2,过滤。-121℃高压灭菌15分钟。-冷却至50-55℃,加入无菌的40%尿素水5ml,混匀。-分装试管,制成斜面备用。3.**用途**:-主要用于细菌的脲酶检测。-用于鉴定变形杆菌属和其他能够分解尿素的细菌。4.**培养条件**:-通常在36℃±1℃的条件下培养24-48小时。5.**观察指标**:-培养基中的酚红作为pH指示剂,当细菌产生的脲酶分解尿素产生氨时,培养基颜色由黄色变为红色,表示细菌具有脲酶活性。6.**保存条件**:-通常在2-8°C下保存,保质期三年。7.**注意事项**:-避免摄入、吸入、皮肤接触。-配制过程中应在无菌条件下操作。尿素培养基在微生物学研究和医学诊断中有着广泛的应用,尤其是在检测和研究能够分解尿素的细菌方面。mTEC琼脂平板
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