4、本发明植物**培养基,其不含碘化钾,在绝大多数植物中,碘元素不是必需元素,实验发现去除碘化钾对植物**培养没有影响,并且植物在脱离培养基进行后期培养时仍可以从土壤等基质中富集碘元素,去掉碘化钾成分,也简化了培养基配制过程。5、本发明植物**培养基,其用nafeedta取代na2·edta和feso4·7h2o,该替换减少的**根离子通过适当增加**铵成分来补充,该替换主要基于两个特征,一方面,nafeedta是可溶性螯合铁,更容易被植物吸收,有利于植物叶绿体发育,另一方面,发明人发现,na2·edta和feso4·7h2o水溶液ph偏酸是ms、b5和n6等众多植物**培养基原始ph偏低及ph波动大的主要原因,本发明培养基中使用nafeedta之后,经ph为,而植物**适宜生长的ph一般为,因此,使用nafeedta既促进了植物对铁离子的吸收,又有利于培养基ph的稳定。6、本发明植物**培养基,其配方降低了mnso4·h2o、znso4·7h2o、h3bo3、cocl2·6h2o、na2moo4·2h2o的用量,增加了cuso4·5h2o、烟酸、盐酸硫胺素、盐酸吡哆醇的用量,该改变特征在于,有效减少愈伤**玻璃化发生,减少酚类物质产生,提高愈伤**的出愈率,实验发现,优化后的培养基出愈时间提前,对多种植物的愈伤**诱导是有益的。DMEM培养基提供了适宜的pH值和渗透压。天津MEM培养基牌子
又能使培养基的破坏降低至比较低的工艺条件。许多实验研究结果表明,培养基在高温**的过程中,其营养成分的破坏在很大程度上可以用一级反应来描述其反应速度:式中—表示营养成分破环的速率,C:表示营养成分的浓度K':为反应速度常数,1/s,应速度常数K'与温度的关系,可以使用阿累尼乌斯公式表示之:K'=A'exp-△E'/RT……(1)式中——:反应速度常数,1/S:反应的活化能(J/mol)R:气体常数,*J/mol*kT:反应的***温度,k同样,**过程中的反应速度常数也可以用下式表示出:K=A×exp[-E/RT]……(2)(1)、(2)式可以改写成下列形式:lg(k,2/k,1)=E,/R×(1/T1–T2)……(3)lg(k2/k1)=E/R×(1/T1–T2)……(4)(3)(4)的意义是指:反应的温度从T1升高到T2,其反应的速度常数分别从k,1增加到k,2;k1增加到k2;培养基的**过程实际上是营养成分破坏、菌体死亡的两个平行性反应,对于平行性反应,反应温度的提高,其两个平行性反应的速度常数都增加,但增加的幅度(大小)却不同,其比值可以表示为:lg(k2/k1)/lg(k,2/k,1)=E/E,……(5)实验证明:营养成分为破坏的反应的活化能E的值为E,=—*103J/mol;而菌体死亡的活化能E芽孢:E=418*103J/mol。上海培养基答疑解惑无血清培养基为细胞培养提供了更清晰的背景。
一)、实验室种子培养基**方法1、高压蒸汽**锅、手提式**锅。容量小。2、立式或卧式**锅。容量较大,一般能装几十瓶或几百瓶。3、**柜。要和蒸汽锅炉配套,用于大量种瓶培养基的**,一次能装几百至几千瓶(袋)。(二)、培养基的分批**1、定义:将配制好的培养基输入发酵罐中,用蒸汽加热,使培养基和设备同时**的一种**方式,又称实罐**。2、**过程过程包括升温、保温和冷却等三个阶段,各阶段对**的贡献:20%、75%、5%。培养基的升温可由两种方式实现:间接加热,在夹套或蛇管中通入蒸汽加热;直接加热,在培养基中直接通入热蒸汽加热。**过程中加热和保温阶段的**作用是主要的,而冷却阶段的**作用是次要的,一般很小,可以忽略不计。此外,还应指出的是,应当避免长时间的加热阶段,因为加热时间过长,不仅破坏营养物质,而且也有可能引起培养液中某些有害物质的生成,从而影响培养过程的顺利进行。在实际生产中,也可能遇到所供蒸汽不足、温度不够高的情况,这时可以适当延长**时间。生产上甚至有用100℃蒸煮而达到彻底**的实例。如要做固体曲而没有高温蒸汽时,可将原料用100蒸汽蒸30min,杀死其中的营养细胞,但孢子与**的芽孢没有被杀死。
人工合成培养基使用时还需添加一定量的血清使细胞生长和繁殖。组成及作用氨基酸:组成蛋白质的基本单位。不同的细胞对氨基酸的需求各异,但几种必需氨基酸细胞自身不能合成,必须依靠培养液提供,如组氨酸、异亮氨酸、亮氨酸、赖氨酸、蛋氨酸、苯丙氨酸、苏氨酸、色氨酸、缬氨酸、半胱氨酸、酪氨酸等。其余非必需氨基酸,细胞可以自己合成,或通过转氨作用由其他物质转化而来。绝大部分细胞对谷氨酰胺有较高的要求,因为谷氨酰胺是作为能源及碳源物质同时被细胞利用,是是细胞合成核酸和蛋白质必需的氨基酸,在缺少谷氨酰胺时,细胞生长不良而死亡,所以各种培养液中都含有较多的谷氨酰胺。细胞所能利用的氨基酸是L型同分异构体,D型氨基酸不能被利用。维生素:维持细胞生长的一种生物活性物质,对细胞代谢有重大作用。它们在细胞中大多形成酶的辅基或辅酶,没有它们,酶便没有活性,代谢活动将无法进行。维生素分为水溶和脂溶两大类,的培养液中直接采用ATP和辅酶A。葡萄糖:大部分培养基都以葡萄糖作为能量来源之一。无机盐:维持培养基渗透压平衡,参与细胞的代谢活动。主要有Na+、K+、Ca2+、Mg2+等。Na+是细胞外液中**主要的阳离子,对维持渗透压的恒定有决定性的作用。RPMI1640培养基能够维持细胞的代谢活性。
对于大多数哺乳类动物细胞,渗透压在260~320mOsm/kg的范围内都适宜。在生产、配制细胞培养基的过程中,渗透压的测定较为重要,有助于防止在生产、配制过程中出现称量等方面的错误。反应器高密度培养动物细胞过程,在添加碳酸氢钠的过程中注意渗透压的监控,防止渗透压过高对细胞的损害。温度温度对细胞培养基有较大的影响,温度过高可引起营养成份的降解或破坏,细胞培养基的pH、离子强度和电解常数pKa也可能受到影响。如细胞培养液中的谷氨酰胺,在高温条件下降解的速度较快,如35℃贮存时,放置3天降解25%左右,在4℃贮存3周降解约20%。粘滞性及表面张力含血清细胞培养液的粘滞性主要是由血清引起的,在转瓶培养贴壁细胞时,培养液的粘滞性对细胞生长没有多大影响;但在生物反应器悬浮培养细胞时,细胞培养液的粘滞性则直接影响搅拌转速控制及搅拌剪切力对细胞造成的损伤程度。表面张力对细胞培养有较大的作用,尤其在利用生物反应器进行悬浮培养时,搅拌和通气都会引起泡沫的产生。对于含血清培养液,由于血清中多种蛋白的存在,搅拌时产生的气泡较多,气泡的上升运动对细胞的损伤程度还有争议,但气泡的破裂对细胞有明显的损伤作用。为降低这种损伤。减血清培养基减少了血清对细胞的影响。天津MEM培养基牌子
F12培养基在生物医学研究中表现出优越的性能。天津MEM培养基牌子
培养实例7和对比培养例7的诱导结果比较::用上述方法进行水稻成熟胚愈伤**诱导时,cs诱导培养基与ms诱导培养基诱导出的愈伤**形态大小均相近,出愈率均为100%。如图7所示。培养实例8:液体培养基在植物水培中的应用(1)用不同ph的超纯水配制的液体培养基ph值稳定性比较:a、用不同ph的超纯水配制液体培养基:通常多种因素会导致相同超纯水制水机产出的超纯水ph变动较大,ph通常为。分别选取ph为、、、、、,分别配制ms液体培养基、cs液体培养基、1/2ms液体培养基、1/2cs液体培养基,制作方法为:ms液体培养基为取ms基本培养基置于不同ph的超纯水中溶解并定容至1l;cs液体培养基为取cs基本培养基置于不同ph的超纯水中溶解并定容至1l;1/2ms液体培养基为取1/2ms基本培养基置于不同ph的超纯水中溶解并定容至1l;1/2cs液体培养基为取1/2cs基本培养基置于不同ph的超纯水中溶解并定容至1l。b、结果为:用ph为,ms液体培养基ph为,cs液体培养基ph为,1/2ms液体培养基ph为,1/2cs液体培养基ph为。植物**适宜生长的ph一般为,观察可知,ms液体培养基及1/2ms液体培养基的ph偏酸性且波动较大,其应用于液体培养基时通常需要调节ph,过程繁琐,相比之下。天津MEM培养基牌子
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