胰蛋白酶:(Trypsin)为蛋白酶的一种,是从牛、羊、猪的胰脏提取的一种丝氨酸蛋白水解酶。由223个氨基酸残基组成的单链多肽,主要切割赖氨酸和精氨酸羧基端。按干燥品计算,每1mg中胰蛋白酶的活力不得少于2500单位。作用是使细胞间的蛋白质水解从而使细胞离散。不同的组织或者细胞对胰酶的作用反应不一样。胰酶分散细胞的活性还与其浓度、温度和作用时间有关,在pH为、温度为37℃时,胰酶溶液的作用能力**强。使用胰酶时,应把握好浓度、温度和时间,以免消化过度造成细胞损伤。终止消化时,可用含有血清培养液终止胰酶对细胞的作用。有些细胞容易消化(如鸡胚原代成纤维细胞)可用胰酶进行消化,可以不加EDTA。 胰酶细胞消化液和胰蛋白酶消化液是一样的吗?广西胰酶牌子
在253nm的波长处测定吸光度,必要时可用上述底物原液或磷酸盐缓冲液调节,使吸光度在~,作为底物溶液。制成后应在2小时内使用。供试品溶液的制备精密称取本品适量,加~60胰蛋白酶单位的溶液。测定法取底物溶液,加μl,混匀,作为空白。另取供试品溶液200μl,加底物溶液(恒温于℃±℃),立即计时,混匀,使比色池内的温度保持在25℃±℃,照紫外-可见分光光度法(2010年版*典二部附录ⅣA),在253nm的波长处,每隔30秒钟读取吸光度,共5分钟。以吸光度为纵坐标,时间为横坐标,作图;每30秒钟吸光度的改变应恒定在~,呈线性关系的时间不得少于3分钟。若不符合上述要求,应调整供试品溶液的浓度,再作测定。在上述吸光度对时间的关系图中,取成直线部分的吸光度,按下式计算:式中P为每1mg供试品中含胰蛋白酶的量,单位;A1为直线上终止的吸光度;A2为直线上开始的吸光度;T为A1至A2读数的时间,分;W为测定液中含供试品的量,mg;,吸光度每分钟改变,即相当于1个胰蛋白酶单位。胰蛋白酶制剂注射用胰蛋白酶[3]胰蛋白酶胰蛋白酶的医学检查胰蛋白酶检查名称胰蛋白酶胰蛋白酶分类血液生化检查>酶类测定胰蛋白酶胰蛋白酶的测定原理同酶速率法测定。海南重组胰酶实际消化后细胞状态不会有太大差异,注意控制消化时间即可。
产品简介产品简介:产品编号产品名称产品包装产品价格C0201胰酶细胞消化液100ml碧云天生产的胰酶细胞消化液(Trypsin-EDTASolution)含。该消化液经过过滤**,可以直接用于培养细胞的消化,或者一些**的消化。本胰酶细胞消化液具有方便快速的特点,通常室温消化1分钟左右就可以消化下大多数贴壁细胞。包装清单:产品编号产品名称包装C0201胰酶细胞消化液100ml―说明书1份保存条件:4℃保存,一年有效。注意事项:在使用胰酶细胞消化液的过程中要特别注意避免消化液被**污染。胰酶细胞消化液消化细胞时间不宜过长,否则细胞铺板后生长状况会较差。为了您的安全和**,请穿实验服并戴一次性手套操作。使用说明使用说明:1.贴壁细胞的消化:a)吸去培养液,用无菌的PBS、Hanks液或无血清培养液洗涤细胞一次,以去除残余的血清。b)加入少量胰酶细胞消化液,略盖过细胞即可,室温放置30秒至2分钟。不同的细胞消化时间有所不同。c)显微镜下观察,细胞明显收缩,并且肉眼观察培养器皿底部发现细胞的形态发生明显的变化;或者用***吹打细胞发现细胞刚好可以被吹打下来。此时吸除胰酶细胞消化液。加入含血清的完全细胞培养液,吹打下细胞,即可直接用于后续实验。d)如果发现消化不足。
只断裂赖氨酸或精氨酸胰蛋白酶原的***过程的羧基参胰蛋白酶降解物分析与形成的肽键。白色或米黄色结晶性粉末。溶于水,不溶于乙醇、甘油、氯仿和**。分子量24000,pI,**适pH值~。pH>。Ca2+对酶活性有稳定作用;重金属离子、有机磷化合物、DFP、天然胰蛋白酶**剂对其活性有强烈**。临床用于抗消肿,工业上用于皮革制造、生丝处理、食品加工等。胰蛋白酶*典标准胰蛋白酶来源含量本品系自猪、羊或牛胰中提取的蛋白分解酶。按干燥品计算,每1mg中胰蛋白酶的活力不得少于2500单位。胰蛋白酶制法要求本品应从检*合格的牛、羊或猪胰中提取,生产过程应符合现行版《*品生产质量管理规范》的要求。胰蛋白酶性状本品为白色或类白色结晶性粉末。胰蛋白酶鉴别取本品约2mg,置白色点滴板上,加对甲苯磺酰-L-精氨酸甲酯盐酸盐试液,即显紫色。胰蛋白酶检查酸度取本品,加水溶解并制成每1ml中含2mg的溶液,依法测定(2010年版*典二部附录ⅥH),pH值应为~。溶液的澄清度取本品,加,依法检查(2010年版*典二部附录ⅨB),溶液应澄清。糜蛋白酶-底物溶液的制备取N-乙酰-L-酪氨酸乙酯,置100ml量瓶中,加磷酸盐缓冲液(取,混合,pH值为)50ml,温热使溶解,冷却后再稀释至刻度,摇匀。淡黄色的胰酶溶液能放心使用吗?
胰蛋白酶用法用量1.每次~5mg,用蒸馏水5~10ml溶解。2.一般应用:1次5000单位,每日1次肌注,用量酌情而定。为防止疼痛,可加适量普鲁卡因。局部用*视情而定,可配成溶液制剂(~,微碱性时活性**强)、喷雾剂、粉剂、油膏等,用作体腔内注射、患部注射、喷雾、湿敷、涂搽等。3.治蛇毒:取注射用结晶胰蛋白酶2000单位1~3支,加~(或注射用水)4~20ml稀释,以牙痕为中心,在伤口周围作浸润注射,或在肿胀部位上方作环状封闭1~2次。如病情需要可重复使用。若伤肢肿胀明显,可于注射本品30分钟后,切开伤口排毒减压(严重出血者例外),也可在肿胀部位针刺排毒。如伤口已坏死、溃烂,可用其***胰蛋白酶注意事项1.不可作静注。用前需作划痕试验,应注意可能产生过敏反应。2.吸取注射液后应另换针头,以免注射时疼痛。3.外用时,可采用注射用制剂以缓冲液溶解,但必须在3小时内用毕。胰蛋白酶不良反应:1.注射局部疼痛、硬结。2.本品可引起组胺释放,产生全身反应,有寒战、发热、***、头晕、胸痛、***、皮疹、血管神经性水肿、呼吸困难、眼压升高、白细胞减少等。症状轻时不影响继续***,给予抗组胺*和对症*物即可控制,严重时应即停*。3.本品偶可致过敏性休克。胰酶溶液中的二氧化碳与干冰挥发的二氧化碳可能会极少部分的气体交换。海南重组胰酶
胰酶细胞消化液(Trypsin-EDTA Solution)含0.25%胰酶和0.02%EDTA。广西胰酶牌子
胰酶使用注意:1、在使用胰酶细胞消化液的过程中要特别注意避免消化液被**污染。2、胰酶细胞消化液消化细胞时间不宜过长,否则细胞铺板后生长状况会较差。贴壁细胞的消化:1、吸去培养液,用无菌的PBS、Hanks液或无血清培养液洗涤细胞一次,以去除残余的血清2、加入少量胰酶细胞消化液,略盖过细胞即可,根据胰酶效率差异可以增加惑减少胰酶用量。室温放置30秒至2分钟(不同的细胞消化时间有所不同)3、显微镜下观察,细胞明显收缩,并且肉眼观察培养器皿底部发现细胞的形态发生明显的变化呈白茫状;或者用***吹打细胞发现细胞刚好可以被吹打下来。4、此时吸除胰酶细胞消化液。加入含血清的完全细胞培养液,吹打下细胞,即可直接用于后续实验如果发现消化不足,则加入胰酶细胞消化液重新消化。如果发现细胞消化时间过长,未及吹打细胞,细胞已经有部分直接从培养器皿底部脱落,直接用胰酶细胞培养液把细胞全部吹打下来。1000-2000g离心1分钟,沉淀细胞,尽量去除胰酶细胞消化液后,加入含血清的完全培养液重新悬浮细胞,即可用于后续实验。常用的细胞消化液为胰蛋白酶(Trypsin),EDTA等,其功能主要是使细胞间的蛋白质(如细胞外基质)水解,改变细胞间的连接。广西胰酶牌子
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