pH标准液如何正确使用及其主要作用
pH标准液是一种能使pH值保持稳定的溶液。如果向这种溶液中加入少量的酸或碱,或者在溶液中的化学反应产生少量的酸或碱,以及将溶液适当稀释,这个溶液的pH值基本上稳定不变,这种能对抗少量酸碱或大或稀释,而使pH值不变化的溶液就称为缓冲溶液。 pH标准液的如何正确使用: 1、复合电极不用时,可充分浸泡溶液中。切忌用洗涤液或其他吸水性试剂1/4浸洗。 2、使用前,检查玻璃电极前端的球泡。正常情况下,电极应该透明而无裂纹;球PH计标准液配制泡内要充满溶液,不能有气泡存在。 3、测量浓度较大的溶液时,尽量缩短测量时间,用后仔细清洗,防止被测液粘附在电极上而污染电极。 4、清洗电极后,不要用滤纸擦拭玻璃膜,而应用滤纸吸干,避免损坏玻璃薄膜、防止交叉污染,影响测量精度。 5.测量中注意电极的银一氯化银内参比电极应浸入到球泡内氯化物缓冲溶液中,避免电计显示部分出现数字乱跳现象。使用时,注意将电极轻轻甩几下。 在酶活性实验中,缓冲液的主要作用是维持实验环境的pH稳定。DPBS缓冲液有哪些
假设缓冲溶液里含有弱酸HA以及它的共轭碱。在溶液里发生的质子反应为:水合氢离子的浓度取决于弱酸与其共轭碱的浓度比。当加入少量强碱时,酸被中和,导致了氢氧根离子在溶液中很少累积,从而的浓度增加,的浓度减少。可以看到,虽然加入了强碱,但是溶液里的氢氧根离子变化很少,同时, 浓度较大,相对的变化小,两者比值几乎无变化,因此根据公式,水合氢离子的浓度变化很小。加入弱酸则是同样的道理。由于在 大浓度基数上的微小变化不会改变比值,也因此维持了体系内氢离子和氢氧根离子浓度的平衡。 [1]北京HBSS缓冲液产品介绍缓冲溶液是一种能在加入少量酸或碱时,降低pH变动幅度的溶液。
从中选取包被抗体浓度和酶标抗体的稀释度。为了进一步节省试剂,可以此浓度为基点,缩小间距再进一步做棋盘滴定。?2测定方法的标准化?2.1加样?????ELISA中除了包被外,一般需进行96孔加样。定性测定中有时不强调加样量的准确性。例如规定为加样1滴,如不具备相当的条件,要尽量使用相同口径的滴管,保持准确的加样姿势,使每滴液体的体积基本相同。在定量测定中,加样量应力求准确,**好采用量程准确的微量移液器。加样时应将液体加在孔底,不要加在孔壁上部,避免出现气泡。?2.2保温?????在ELISA中,一般在加标本和结合物后,反应的温度和时间应按规定的要求,保温容器**好是水浴箱,可使温度迅速平衡。各ELISA板不应叠在一起。为避免蒸发,板上应加盖,或将板平放在底部垫有湿纱布的湿盒中。如用保温箱,空湿盒应预先放在其,以平衡温度。?2.3洗涤?????洗涤在ELISA过程中不是反应步骤,但却是决定实验成败的关键。在标本和结合物的稀释液和洗涤液中加入聚山梨酯一类物质即避免非特异性吸附,在ELISA中**为常用。ELISA板的洗涤一般可采用以下方法:吸干孑L内反应液;将洗涤液注满板孔;发表评论请自觉遵守互联网相关的政策法规,严禁发布***、**、反动的言论。
1:50~l:800)后,按行进行包被、洗涤。按列分别加入用稀释液1:100稀释的强阳性、弱阳性、阴性参考血清及稀释液(作空白对照),保温,洗涤。加工作浓度酶标抗体,洗涤,加底物显色,加酸终止反应后读取A值。选择强阳性参考血清A值;为0.8左右,阴性参考血清A值<0.1的包被抗原稀释度为工作浓度。?方阵(棋盘)法选择包被抗体和酶标抗体的工作浓度将抗体用包被液稀释为10mg/L、lmg/L、/L三个浓度按行包被,每一个浓度包被三行(每行3孔),分别在每个浓度包被的***、二、三行中分别加入强阳性抗原,弱阳性抗原和阴性对照,将酶标抗抗体用稀释液稀释为1:l000、l:5000、l:10000三个浓度,分别加入每个浓度包被的***、二、三列中。加底物显色,加酸终止反应,分别读取A值。以强阳性抗原液A值在,阴性参考A值<**适条件。据此选择包被抗体和酶标抗体的**佳工作浓度。?二、ELISA**适工作浓度的选择及标准化操作1**适工作浓度的选择?1.1间接法测抗体?????酶标抗体工作浓度的选择:①用IgG进行包被,洗涤。②将酶标IgG用稀释液作一系列稀释后分别加入已包被的孔中,保温、洗涤。③加酸终止反应后,读取吸光度(A)。读取A值在1.0时的酶标抗体稀释度,作为酶标抗体的工作浓度。常用作缓冲溶液的酸类由弱酸及其共轭酸盐组合成的溶液具有缓冲作用。
一、为什么缓冲溶液可以维持PH值的稳定呢?其实这主要是因为缓冲溶液自身的成分和性能,它的成分里包含了酸、盐或碱,所以在一定程度上可以抵消外界加入酸性或碱性溶液带来的影响。二、配制缓冲溶液作用有哪些?1、缓冲溶液是分析检测实验中常会用到的溶液,实验中通常会要求溶液的pH值需要保持在一个规定的范围内,以保证指示剂的显色或变色,这些通过加入一定量的缓冲溶液就能达到目的。2、缓冲溶液在医学检验中也起着很重要的作用,主要是因为缓冲溶液可以保持机体正常血液PH范围,其中碳酸-碳酸氢钠是血液中主要的缓冲对,这与肺呼吸以及肾功能排泄息息相关。而机体正常新陈代谢后产生的CO2,会进入血液与水结合成碳酸,碳酸又与血浆中的碳酸氢根离子组成共轭酸碱对,所以缓冲溶液在医学上就有不可忽视的作用。由弱酸及其盐组合一起使具有缓冲作用。广东EBSS缓冲液产品介绍
配制缓冲溶液作用有哪些?DPBS缓冲液有哪些
当往某些溶液中加入一定量的酸和碱时,有阻碍溶液pH变化的作用,称为缓冲作用,这样的溶液叫做缓冲溶液。弱酸及其盐的混合溶液(如HAc与NaAc),弱碱及其盐的混合溶液(如NH3.H2O与NH4Cl)等都是缓冲溶液。由弱酸HA及其盐NaA所组成的缓冲溶液对酸的缓冲作用,是由于溶液中存在足够量的碱A-的缘故。当向这种溶液中加入一定量的强酸时,H离子基本上被A-离子消耗:所以溶液的pH值几乎不变;当加入一定量强碱时,溶液中存在的弱酸HA消耗OH-离子而阻碍pH的变化。DPBS缓冲液有哪些
免责声明: 本页面所展现的信息及其他相关推荐信息,均来源于其对应的用户,本网对此不承担任何保证责任。如涉及作品内容、 版权和其他问题,请及时与本网联系,我们将核实后进行删除,本网站对此声明具有最终解释权。
暂无推荐产品!