RNA提取试剂TRIpure是基于世界上使用较普遍的异硫氰酸胍/酚法研制而成的总RNA抽提试剂。在破碎和溶解细胞时能保持RNA的完整性。无论是人、动物、植物还是细菌组织,该方法对少量的组织(50-100mg)和细胞(5×106)以及大量的组织(≥1g)和细胞(>107)均有较好的分离效果。TRIpure试剂操作上的简单性允许同时处理多个样品,所有的操作可以在一小时内完成。TRIpure抽提的总RNA能够避免DNA和蛋白的污染,故而能够作RNA印迹分析、斑点杂交、poly(A)+选择、体外翻译、RNA酶保护分析和分子克隆等。和进口品牌实验对照显示,公司的产品质量已经达到甚至超过了进口产品的质量~总RNA提取试剂试剂能促进不同种属不同分子量大小的多种RNA的析出。苏州RNA提取试剂价格
酵母RNA的提取方法:浓盐法。酵母菌外层是厚达1.2µm的细胞壁,其化学成分是葡聚糖(30-40%)和甘露聚糖(30%),此外,脂类8.5-13.5%,蛋白质6-8%,还含有几丁质,酵母菌的葡聚糖,分子是为240000道尔顿,是一种分枝聚合物,葡聚糖与甘露糖之间由蛋白质维系起来。近10%的甘露聚糖的侧链通过磷酸二酯键与磷酸边接,所有这些连接方式都使得酵母提取物首要的也是关键的是如何破坏细胞壁。破壁方法有自溶破壁、酶法破壁等多种方法,而用高浓度盐溶液处理,同时加热,以改变细胞的通透性,就可以使核酸从细胞内释放出来。由于RNA钠盐易溶于水,在含盐的菌体溶液中,RNA有较高的溶解度,这样,通过控制温度使蛋白质变性沉淀,通过离心将RNA及蛋白质和脱核酵母菌体分离,从而达到提取之目的。其中食盐起到自溶促进剂,以及防腐与脱臭的作用。苏州RNA提取试剂价格RNA定量方法与DNA定量相似。
植物、动物、人类都存在RNA干扰现象,这对于基因表达的管理、参与对病菌传染的防护、控制活跃基因具有重要意义。RNA干扰是一个生物过程,在这个过程中双链RNA以一种非常明确的方式压制了基因表达。自1998年发现以来,RNA干扰已经作为一种强大的“基因沉默”技术而出现。RNA干扰作为研究基因运行的一种研究方法已被普遍应用于基础科学,它可能在将来产生更多更新的医治方法。科学家认为,RNA干扰技术不仅是研究基因功能的一种强大工具,不久的未来,这种技术也许能用来直接从源头上让致病基因“沉默”,以医治病症甚至一些病,在农业上也将大有可为。
总RNA提取试剂是一种快速从组织细胞中提取总RNA的单相试剂。在样品裂解过程中TRIzol能够压制RNA酶活性保持RNA完整性;加入氯仿后离心,RNA相将与DNA和蛋白质分离,随后用异丙醇沉淀RNA。如果需要还可以继续提取DNA和蛋白质。纯化的总RNA可用于RT-PCR、NorthernBlot、RNA酶保护、Poly(A)mRNA纯化、体外翻译等实验。是一种快速从组织细胞中提取总RNA的单相试剂。在样品裂解过程中TRIzol能够压制RNA酶活性保持RNA完整性;加入氯仿后离心,RNA相将与DNA和蛋白质分离,随后用异丙醇沉淀RNA。如果需要还可以继续提取DNA和蛋白质。纯化的总RNA可用于RT-PCR、NorthernBlot、RNA酶保护、Poly(A)mRNA纯化、体外翻译等实验。rRNA是组成核糖体的组分,是蛋白质合成的工作场所。
植物RNA提取:植物组织中,富含酚类化合物,或富含多糖,或含有某些尚无法确定的次级代谢产物,或RNase的活性较高。这些物质在细胞裂解后与RNA紧密结合形成难溶复合物或者胶状沉淀,很难将其去除。所以我们在提取植物组织时,要选取针对植物的试剂盒,试剂盒里的裂解液能有效解决多酚易氧化、多糖化合物与核酸分离等难题。1、植物的果皮、果肉、种子、叶片等要在研钵中充分研磨,研磨过程中液氮要及时补充,避免样品融化,研磨后的样品应迅速加入裂解液中震荡混匀,避免RNA降解。2、像水稻及小麦叶片等富含纤维的样本,则应适当减少提取用量,否则组织研磨及裂解不彻底,会使提取的RNA产量较低。3、含水分较多的植物组织例如石榴果实、西瓜果实、桃子果实等则应当适当提高样本量(可选100~200mg)。4、植物组织,如植物叶片、根茎、坚硬的果实等材料一般建议使用液氮在研钵中彻底研钵成份,再继续进行提取步骤。常规的组织匀浆机对植物组织的匀浆效果可能不佳,一般不建议使用。在裂解液上游加入酶裂解步骤(如蛋白酶 K、溶菌酶等)。苏州RNA提取试剂
所提取的RNA完整性好、纯度高,可用于分子生物学后实验。苏州RNA提取试剂价格
科学家曾经在实验室里就成功地让RNA实现了自我复制的功能。不仅如此,还有科学家构建了一种DNA-RNA杂交基因组的大肠杆菌。这个实验证明,即使有DNA-RNA的杂交链的中间态,生物也不至于会死亡。所以,RNA较早可能给就是生物的遗传物质,只是后来逐步被替代了。当然,还有一些次要的原因,比如,我们都知道DNA是在细胞核当中的,完成生命活动这些步骤其实都在细胞核外进行,因此这样其实更加安全。而如果是RNA,那就没有必要存在细胞核了,但是当细胞损失时,就很容易出现问题。因此,DNA后来逐渐取代了RNA作为生物的遗传物质。但这并不是说RNA不能够作为遗传物质,相反它是可以作为遗传物质而存在的。苏州RNA提取试剂价格
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