将蒸过的原料置于室温下过夜，未被杀死的孢子便发芽生长，芽孢发育成营养细胞，再30min便可杀死。如此连续反复进行2-3次，亦可达到彻底**的目的。3、分批**的操作分批灭歇是在所用的发酵罐或其他培养装置中进行的，它是在配制罐中配好培养基后，通过**管道输入发酵罐等培养设备中，然后开始**。在进行培养基的间歇**之前，通常先将发酵罐等培养装置的分空气过滤器进行**，并且用空气将分过滤器吹干。开始**时，应先放去夹套或蛇管中的冷水，开启排气管阀，通过空气管向发酵罐内的培养基通入蒸汽进行加热，同时，也可在夹套内通蒸汽进行间接加热。当培养基温度升到70℃左右时，从取样管和放料管向罐内通入蒸汽进一步加热，当温度升至120℃，罐压为1*105Pa（表压）时，打开接种、补料、消泡剂、酸、碱等管道阀门进行排汽，当然在保温过程中，应注意凡在培养基液面下的各种进口管道都应通入蒸汽，而在液面以上的其余各管道则应排放蒸汽，这样才能不留死角，从而保证**彻底。保温结束后，依次关闭各排汽、进汽阀门，待罐内压力低于空气压力后，向罐内通入无菌空气，在夹套或蛇管中通冷水降温，使培养基的温度降到所需的温度，进行下一步的发酵和培养。RPMI1640培养基在免疫细胞培养中表现出色。新疆MEM a培养基价目表

    附图说明图1是1/2cs和1/2ms两种培养基上，哥伦比亚型拟南芥无菌苗培养的对比效果图，a：无菌苗在培养基中生长情况；b：无菌苗莲座叶及根系发育；c：萌发率；d主根长度；a和b中bar＝；图2是1/2cs和1/2ms两种培养基上，兰兹贝格型拟南芥无菌植株培养的对比效果图，a：无菌植株在培养基中生长情况；b：无菌植株地上部分及根系发育；c：无菌植株花***发育(左)和花粉的亚历山大染色(右)；d：主根长度；e：株高；f：莲座叶长度；g：成熟花粉活力；a中bar＝、b中bar＝、c中花***bar＝、c中花粉bar＝15um；图3是1/2cs和1/2ms两种培养基上，油菜无菌苗培养的对比效果图，a：无菌植株在培养基中生长情况；b：无菌苗地上部分及根系发育；c：茎高；d：茎中粗；e：主根长；f：大于；a中bar＝、b中bar＝；图4是1/2cs和1/2ms两种培养基上，马铃薯无菌苗培养的对比效果图，a：无菌植株在培养基中生长情况；b：无菌苗地上部分及根系发育；c：茎高；d：茎中粗；e：根数；a和b中bar＝；图5是cs和ms两种培养基上，哥伦比亚型拟南芥叶片及根愈伤**诱导的对比效果图，a：叶片愈伤**；b：叶片愈伤**诱导率；c：根愈伤**；d：根愈伤**诱导率；a和c中bar＝；图6是cs和ms两种培养基上。江西Ham's F12培养基采购无血清培养基有助于细胞在无血清环境中的生长。

    若应用于植物培养中的液体培养基制作，可不用调节ph，用超纯水(ph为)充分溶解后定容，便可直接应用于大多数植物水培。培养实例1：哥伦比亚型拟南芥无菌苗培养(1)种子保存及消毒方法：a、拟南芥种子保存方法：哥伦比亚(col,columbia)型拟南芥种子成熟后，收取种子于，加入3-8颗变色**干燥剂，用封口膜密封后置于4℃长期保存；b、拟南芥种子**消毒方法：取出经低温干燥保存的种子，于无菌环境下，将适量种子置于无菌，加入适量体积的无菌水，将离心管颠倒几次后用低速离心机离心10s，小心倒掉上清，重复3次；加入75％酒精，将离心管颠倒几次后用低速离心机离心10s，小心倒掉上清；用无菌水清洗3次，低速离心10s后去除上清；加入适量体积的5％naclo溶液，将离心管上下颠倒10-20次，低速离心10s后倒掉上清，重复2次；用无菌水清洗3次，低速离心10s后去除上清；加入无菌水，使种子完全浸泡在无菌水中，于4℃放置48h后播种。在种子质量良好的情况下，利用上述方法保存及消毒的无菌拟南芥种子，萌发率极高且几乎同时出苗。(2)生长培养基配制：1/2cs基本培养基+蔗糖30g/l+植物凝胶8g/l，用超纯水溶解，。1/2cs基本培养基的成分及用量如表1所示。。

    人工合成培养基使用时还需添加一定量的血清使细胞生长和繁殖。组成及作用氨基酸：组成蛋白质的基本单位。不同的细胞对氨基酸的需求各异，但几种必需氨基酸细胞自身不能合成，必须依靠培养液提供，如组氨酸、异亮氨酸、亮氨酸、赖氨酸、蛋氨酸、苯丙氨酸、苏氨酸、色氨酸、缬氨酸、半胱氨酸、酪氨酸等。其余非必需氨基酸，细胞可以自己合成，或通过转氨作用由其他物质转化而来。绝大部分细胞对谷氨酰胺有较高的要求，因为谷氨酰胺是作为能源及碳源物质同时被细胞利用，是是细胞合成核酸和蛋白质必需的氨基酸，在缺少谷氨酰胺时，细胞生长不良而死亡，所以各种培养液中都含有较多的谷氨酰胺。细胞所能利用的氨基酸是L型同分异构体，D型氨基酸不能被利用。维生素：维持细胞生长的一种生物活性物质，对细胞代谢有重大作用。它们在细胞中大多形成酶的辅基或辅酶，没有它们，酶便没有活性，代谢活动将无法进行。维生素分为水溶和脂溶两大类，的培养液中直接采用ATP和辅酶A。葡萄糖：大部分培养基都以葡萄糖作为能量来源之一。无机盐：维持培养基渗透压平衡，参与细胞的代谢活动。主要有Na+、K+、Ca2+、Mg2+等。Na+是细胞外液中**主要的阳离子，对维持渗透压的恒定有决定性的作用。无血清培养基提供了纯净的细胞培养环境。

    生产上一般采用冷水喷淋冷却，冷却到40-50℃后，输送到预先已经**过的罐内。（四）、间歇**与连续**的比较1、歇**的***和缺点***是设备要求低，不需另外设置加热、冷却装置；操作要求低，适于手动操作，适合于小批量生产规模；适合于含有大量固体物质的培养基的**。缺点是培养基的营养物质损失较多，**后培养基的质量下降；需进行反复的加热和冷却，能耗较高；不适合于大规模生产过程的**；发酵罐的利用率较低。2、连续**的***和缺点***是**温度高，可减少培养基中营养物质的损失；操作条件恒定，**质量稳定；易于实现管道化和自控操作；避免了复的加热和冷却，提高了热的利用率；发酵设备利用率高。缺点是对设备的要求高，需另外设置加热、冷却装置；操作较麻烦；染菌的机会较多；不适合于含大量固体物料的**；对蒸汽的要求高。由此可见，无论在理论上或者在实践上，与间歇**过程相比，连续**的***十分明显。因此，连续**越来越多地被用培养基的**。F12培养基能够支持细胞的持续分裂。江西Ham's F12培养基采购

无酚红培养基适用于对酚红敏感的实验设置。新疆MEM a培养基价目表

    文献2“混合硝酸稀土对谷氨酸产生菌的影响，氨基酸杂志”发现，在发酵培养基中添加一定量的稀土元素，能够提高谷氨酸的产量。申请人之前的**技术“一种谷氨酸发酵培养基制备方法”，在常规培养基的基础上进行了改进，通过添加菌体蛋白浸膏来替代酵母膏氮源，不但节约了成本，还能提高氨基酸发酵产率，一举两得。技术实现要素：在已有发酵培养基的基础上，申请人针对微生物发酵的特点，继续进行了改进，以提高发酵效率，据此，提出了一种优化的谷氨酸发酵培养基。本发明是通过如下技术方案来实现的：一种优化的谷氨酸发酵培养基，其包括发酵培养基a和发酵培养基b；所述发酵培养基a首先添加，然后间隔12h以上添加发酵培养基b。进一步地，所述发酵培养基a的制备方法为：取各原料：葡萄糖，酵母浸膏，k2hpo4，mgso4·7h2o，2-羟基乙胺，cecl3，mnso4·h2o，feso4·7h2o，vb1，生物素；将各原料搅拌均匀后，调节ph，**，制得发酵培养基a。进一步地，所述发酵培养基b的制备方法为：取各原料：琥珀酸，尿素，壳聚糖；将各原料搅拌均匀后，调节ph，**，制得发酵培养基b。推荐地，所述发酵培养基a的制备方法为：取各原料：葡萄糖50-100g/l，酵母浸膏10-30g/l，k2hpo41-5g/l。新疆MEM a培养基价目表

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