曙红亚甲蓝琼脂培养基(EosinMethyleneBlueAgar,简称EMB)是一种常用的微生物学培养基,主要用于分离和鉴定肠道致病菌,尤其是大肠杆菌。以下是EMB培养基的特点和相关信息:1.**成分**:EMB培养基通常包含蛋白胨、牛肉浸粉、氯化钠、乳糖、亚甲蓝、曙红钠和琼脂。其中,蛋白胨和牛肉浸粉提供细菌生长所需的氮源和其他营养元素;乳糖作为可发酵的碳源;氯化钠维持渗透压;曙红钠和亚甲基蓝作为抑制剂和指示剂,能够在酸性条件下结合形成黑色沉淀;琼脂作为凝固剂。2.**pH值**:培养基的pH值一般调节至7.2±0.2(25℃)。3.**用途**:EMB培养基是一种弱选择性培养基,特别用于分离肠道致病菌,如大肠杆菌。它通过抑制非目标菌的生长,促进目标菌的生长,从而实现分离。4.**实验原理**:曙红钠为酸性染料,亚甲基蓝为碱性染料。细菌分解乳糖产酸时,细菌带正电荷,可以与带负电的酸性染料结合,即染上了曙红钠的颜色;如果细菌因产碱性物质较多,带负电荷时与带正电荷的碱性染料亚甲基蓝结合而使得菌落呈蓝色。细菌产酸量较大时,染料可析出结晶形成金属光泽。BHI Agar适用于多种需氧和兼性厌氧细菌的培养,包括苛养菌和一些快速生长的细菌。煌绿磺胺嘧啶琼脂预装培养皿
pH7.4磷酸盐缓冲液(Phosphate-BufferedSaline,PBS)是一种广而使用的生物化学和分子生物学实验中的缓冲溶液,具有以下特点:1.**pH稳定性**:pH值稳定在7.4左右,接近人体血液的pH值,适合细胞和生物分子的生理条件。2.**成分**:主要由磷酸二氢钠(NaH2PO4)和磷酸氢二钠(Na2HPO4)组成,这两种盐在溶液中可以形成缓冲体系,维持pH值的稳定。3.**离子强度**:PBS具有一定的离子强度,可以模拟细胞外液的离子环境,有助于保持细胞和蛋白质的稳定性。4.**渗透压**:PBS的渗透压接近人体生理盐水的渗透压,适合用于细胞悬浮和洗涤,不会引起细胞的渗透压变化。5.**清洁性**:PBS通常使用去离子水或蒸馏水配制,减少杂质和离子对实验的干扰。6.**兼容性**:PBS与多种生物分子和细胞培养基兼容,常用于细胞培养、免疫学实验、蛋白质提取和分析等。7.**无菌性**:实验用的PBS通常需要经过高压灭菌或过滤除菌处理,以保证实验的无菌条件。8.**多功能性**:除了作为缓冲溶液外,PBS还可以用于稀释试剂、洗涤实验器材和样品等。9.**易于配制**:PBS的配制相对简单,可以根据需要调整磷酸盐的浓度来改变缓冲能力。煌绿磺胺嘧啶琼脂预装培养皿去氧胆酸盐琼脂(DC)培养皿通常在食品卫生检测以及临床微生物学实验中使用,用于检测肠道细菌的存在。
Kovacs氏靛基质试剂是一种用于吲哚(靛基质)试验的试剂,其特点如下:1.**应用领域**:主要用于鉴定肠系细菌,如大肠杆菌等,通过检测细菌分解色氨酸生成的吲哚来进行鉴定。2.**反应原理**:某些细菌能够分解蛋白胨中的色氨酸,生成吲哚。吲哚与试剂中的对二甲氨基苯甲醛结合,形成玫瑰吲哚,产生红色化合物,从而进行显色反应。3.**操作步骤**:首先将纯培养物接种于适宜的培养基中,如色氨酸肉汤或胰蛋白水培养基,然后在36±1℃下培养24±2小时。之后加入2-4滴Kovacs试剂,混匀后立即观察或放置室温5-10分钟观察结果。4.**结果判断**:阳性反应表现为培养基上部有一红色环,而阴性反应则为黄色、桔黄色或棕色。5.**试剂盒组成**:Kovacs氏靛基质试剂盒包含溶液A,配制依据是将5g对二甲氨基苯甲醛溶解于75mL戊醇中,然后缓慢加入25mL浓盐酸。6.**产品规格与价格**:以青岛海博生物提供的产品为例,产品规格为5ml*2,价格为35元,保质期为一年。7.**应用范围**:除了用于病原细菌的鉴定,还可用于食品卫生检测、环境控制、食品毒性检测、水中大肠杆菌检测、食品过敏性检测、食品生产环境的清洁检测、菌落计数及控制系统。
4-甲基伞形酮葡糖苷酸(MUG)培养基是一种专门用于检测β-葡萄糖醛酸苷酶(GUS)活性的培养基,具有以下特点:1.**荧光检测**:MUG作为荧光底物,在β-葡萄糖醛酸苷酶作用下,裂解后产生蓝色荧光终产物,可通过紫外线监测。2.**应用广**:MUG培养基用于荧光检测大鼠体内的β-葡萄糖醛酸苷酶基因表达,也用于植物中葡萄糖醛酸酶基因的表达进行荧光检测。3.**产品特性**:MUG具有纯度≥99%,熔点102°C,分子量为352.29(无水基础),在冷冻(-20℃)条件下储存。4.**培养基配方**:包含蛋白胨、磷酸盐缓冲系统、硫酸锰、亚硫酸钠、去氧胆酸钠、硫酸镁、氯化钠、氯化钙和MUG等成分,pH值控制在7.3±0.1(25℃)。5.**操作步骤**:包括称取培养基粉末溶解、分装、灭菌、接种质控菌液、培养和观察有无荧光等步骤。6.**试验现象**:接种大肠埃希氏菌等质控菌株,在30-35℃培养后,通过366nm紫外灯下观察有无荧光,再滴加靛基质试剂观察有无玫红色环出现。7.**安全性**:操作MUG时应穿实验服并戴一次性手套,以确保安全。8.**应用示例**:包括细菌培养物的荧光检测和转基因植物GUS基因的表达测定。9.**储存与运输**:MUG培养基应-20℃干燥保存,有效期2年,运输时使用冰袋。当大肠杆菌等革兰氏阴性菌在培养皿上形成典型的红色或粉红色菌落时,这表明它们具有葡萄糖发酵的能力。
乳糖胆盐发酵培养基(LactoseBileFermentBroth)是一种用于微生物学检测的培养基,主要用于检测和分离大肠菌群、粪大肠菌群和大肠杆菌。以下是其主要特点和用途:1.**成分**:通常包含蛋白胨、乳糖、牛胆盐和溴甲酚紫等。蛋白胨提供碳源和氮源,乳糖作为可发酵的糖类,牛胆盐用于抑制革兰氏阳性细菌的生长,溴甲酚紫作为pH指示剂,酸性时呈黄色,碱性时呈紫色。2.**pH值**:一般调节至7.4±0.2(25℃)。3.**用途**:用于多管发酵法测定药品、食品、饮用矿泉水、一次性使用卫生用品中大肠菌群的存在。4.**检验原理**:大肠菌群能够发酵乳糖产生酸性物质,导致培养基颜色变化,并且可能产生气体。5.**使用方法**:称取适量的培养基粉末,加入蒸馏水或去离子水,加热煮沸至完全溶解,分装后进行高压灭菌。然后,将样品接种到培养基中,进行培养并观察结果。6.**质量控制**:通过接种特定的质控菌株,如大肠埃希氏菌和金黄色葡萄球菌,来验证培养基的选择性和生长促进效果。7.**储存条件**:通常需要在避光、干燥的环境中储存,并在用后立即旋紧瓶盖,以保持其稳定性。琼脂培养基的制备: 将琼脂培养基中加入去氧胆酸盐等特定成分,以制备适合特定实验目的的培养基。BCYE琼脂预装培养皿
mTEC琼脂培养基是一种用于寻找和分离肠道致病菌的培养基,尤其是对于大肠杆菌(Escherichia coli)等细菌。煌绿磺胺嘧啶琼脂预装培养皿
0.5%葡萄糖肉汤培养基是一种专门用于微生物培养的培养基,具有以下特点:1.**营养成分**:培养基中含有蛋白胨、氯化钠、葡萄糖和牛肉浸粉等成分,其中蛋白胨和牛肉浸粉提供氮源、维生素和氨基酸,氯化钠维持渗透压,葡萄糖提供碳源。2.**pH值**:pH值控制在7.2±0.2(25℃),为微生物提供适宜的生长环境。3.**用途**:主要用于硫酸链霉素等抗生物质的无菌检查,也用于消毒效果生物监测评价中指示菌的培养。4.**制备方法**:称取23.0g培养基粉末,加热溶解于1000ml蒸馏水中,然后在121℃高压下灭菌15分钟,备用。5.**贮存条件**:需要防潮、避光、阴凉处保存。6.**微生物灵敏度试验**:通过接种质控菌株,如枯草杆菌黑色变种芽孢,进行生长情况的观察,以确保培养基的适用性。7.**质量标准**:遵循中国药典2020版、USP、EP等标准。8.**包装规格**:市面上有多种规格的0.5%葡萄糖肉汤培养基产品,如250g/瓶。9.**注意事项**:在配制和使用过程中,需要保证器材洁净,穿着实验服并戴一次性手套,以确保实验的安全性和准确性。这些特点使得0.5%葡萄糖肉汤培养基在药品检测和微生物学研究中具有重要应用。煌绿磺胺嘧啶琼脂预装培养皿
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