培养皿的清洁——1、浸泡:新的或用过的玻璃器皿要先用清水浸泡,软化和溶解附着物。新玻璃器皿使用前得先用自来水简单刷洗,然后用5%盐酸浸泡过夜;用过的玻璃器皿往往附有大量蛋白质和油脂,干涸后不易刷洗掉,故用后应立即浸入清水中备刷洗。2、刷洗:将浸泡后的玻璃器皿放到洗涤剂水中,用软毛刷反复刷洗。不要留死角,并防止破坏器皿表面的光洁度。将刷洗干净的玻璃器皿洗净、晾干,备浸酸。3、.浸酸:浸酸是将上述器皿浸泡到清洁液中,又称酸液,通过酸液的强氧化作用去除器皿表面的可能残留物质。浸酸不应少于六小时,一般过夜或更长。放取器皿要小心。4、冲洗:刷洗和浸酸后的器皿都必须用水充分冲洗,浸酸后器皿是否冲洗的干净,直接影响到细胞培养的成败。手工洗涤浸酸后的器皿,每件器皿至少要反复“注水-倒空”15次以上,然后用重蒸水浸洗2-3次,晾干或烘干后包装备用。
这种器皿能够提供细胞生长和繁殖所需的基本条件,如适宜的温度、气体环境和营养物质。而接种划线是一种用于细菌(细胞)接种的方法,也称为划线接种或平板划线法。其具体操作步骤如下:左手持皿用拇指、食指和中指将皿盖揭开约20~30度左右,角度越小遭空气污染的可能性越小,并靠近酒精灯附近操作。右手持接种环,先在酒精灯上灭菌,然后取菌液。将沾菌接种环在培养基的边缘划原始线,而后使接种环在指力作用下作轻快的滑移动作,从培养皿的一个边缘滑向另一个边缘,滑动时用力要均匀,切勿将接种环嵌入培养基内。划完后将接种环在酒精灯火燃烧灭菌,放于原处,盖好皿盖,然后进行培养。需要注意的是,划线时力度不能过大,以免划破培养基,同时一区域不能与结尾区域相连。这种划线法通过反复划线分离,可以获得微生物的纯种。
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