3.高温高压**后,4℃保存。SolutionI(质粒提取用)组份浓度:25mMTris-HCl(),10mMEDTA,50mMGlucose配制量:1L配制方法:1.量取下列溶液,置于1L烧杯中。2.高温高压**后,4℃保存。3.使用前每50ml的SolutionI中加入2ml的RNaseA(20mg/ml)。SolutionII(质粒提取用)组份浓度:200mMNaOH,1%(W/V)SDS配制量:500ml配制方法:1.量取下列溶液,置于500ml烧杯中10%SD50ml2NNaOH50ml2.加**水定容至500ml,充分混匀3.室温保存,此溶液保存时间比较好不要超过一个月注意:SDS易产生气泡,不要剧烈搅拌SolutionIII(质粒提取用)组份浓度:3MKOAc,5MCH3COOH配制量:500ml配制方法:1.称量下列试剂,置于500ml烧杯中。2.加入300ml去离子水后搅拌溶解。3.加去离子水将溶液定容至500ml。4.高温高压**后,4℃保存。MEDTA()组份浓度:MEDTA配制量:1L配制方法:1.称取gNa2EDTA·2H2O,置于1L烧杯中。2.加入约800ml的去离子水,充分搅拌。3.用NaOH调节pH值至(约20gNaOH)。注意:pH值至,EDTA才能完全溶解。4.加去离子水将溶液定容至1L。5.适量分成小份后,高温高压**。6.室温保存。1MDTT组份浓度:1MDTT配制量:20ml配制方法:1.称取gDTT,加入到50ml塑料离心管内。2.加20ml的MNaOAc()。Pbs缓冲也是磷酸盐缓冲生理盐水,属于等张液对于细胞并无毒性作用。贵州缓冲液技术指导
磷酸缓冲液的缓冲pH值范围非常***,可配置各种pH值的酸性、碱性和中性缓冲液,配制酸性缓冲液可直接用NaH2PO4或KH2PO4,pH范围在1-5;碱性缓冲液可直接用Na2HPO4或K2HPO4,pH范围在9-12;中性缓冲液则用等浓度的NaH2PO4和Na2HPO4或者等浓度的KH2PO4和K2HPO4溶液混合,pH在。通常所说的磷酸缓冲液的浓度是指溶液中含有的所有的磷酸根离子的浓度,而不是钠离子(Na+)或者钾离子(K+)的浓度。正是因为如此,在配制中性缓冲液时,用等浓度的NaH2PO4和Na2HPO4或者等浓度的KH2PO4和K2HPO4溶液混合,并不影响磷酸根离子的浓度,所得的缓冲液浓度仍是等浓度的NaH2PO4和Na2HPO4或者等浓度的KH2PO4和K2HPO4溶液原来的浓度,但是缓冲液中的钠离子(Na+)或者钾离子(K+)的浓度已经发生变化。 北京无酚红缓冲液进货价缓冲液浓度和温度的影响。
PBS 与 DPBSPBS 和 DPBS 都包括氯化钠和磷酸盐缓冲液,是生物学研究中常用的试剂,用于维持 pH 值,同时可大幅度地减少活细胞中的渗透压休克;然而,与 PBS 相比,DPBS 还包括氯化钾,配方中可含或不含钙和镁以及含或不含葡萄糖和**酸。根据您的具体应用选择 PBS 或 DPBS。
Dulbecco 的磷酸盐缓冲液(DPBS)DPBS 与 PBS 的不同之处在于它还包括氯化钾,并且提供多种配方。它也用于生物应用,水基缓冲液,包括氯化钠和磷酸盐缓冲液。
HBSS 与 EBSSHanks 的平衡盐溶液(HBSS)和 Earle 的平衡盐溶液(EBSS)都是等渗溶液,用于维持生物应用中的渗透压和 pH 值。虽然 HBSS 和 EBSS 包括葡萄糖和碳酸氢钠,用于短期维持生长培养基以外的细胞,但 EBSS 在 5% CO2 下使用,而 HBSS 包含较少的碳酸氢钠,可以在没有 CO2 的情况下使用。从各种依应用而定的配方中进行选择。
PBS溶液又称磷酸盐缓冲溶液,一般选择Na2HPO4和KH2PO4配制,因为钠盐溶解的较慢。根据不同pH的溶液,称量不同质量的磷酸盐,也可以用pH计调溶液的pH。PBS一般用作支持电解质。
配置方法播报编辑采用去离子水、KH2PO4和Na2HPO4·2H2O配制PBS溶液,按以下步骤进行:(1) 配制1/15mol/L KH2PO4,即每升水中溶解9.078克KH2PO4;(2) 配制1/15mol/LNa2HPO4·2H2O,即每升水中溶解11.876克Na2HPO4·2H2O;(3) 将18.2%(体积分数)KH2PO4溶液和81.8%Na2HPO4·2H2O混合; 在酶活性实验中,缓冲液的主要作用是维持实验环境的pH稳定。
做ELISA确定抗原**佳包被浓度,做方阵滴定具体怎么做呢?选择好一份已知为阳性和阴性背景的标本,将你的抗原用1*CBPH=*PBPH=(8个条件)后加入96孔板每孔100ul。(一般包被浓度100ng抗原或抗体/孔,**优包被条件需进行试验选择)4度过夜取出后甩干,加入20%NBS封闭每孔200ul。37度2h热封,甩去后拍干即可。将你HRP或AP标记的抗原或二抗用酶标稀释液进行稀释(倍比稀释4个梯度)即可。棋盘滴定就是板酶交叉,同时带上阳性、阴性通过试验确定**佳P/N的包被搭配E的试验2.抗原和抗体**佳工作浓度的确定?抗原抗体反应要求在**适比例条件下进行,ELISA反应试剂多,其工作浓度不同对结果影响较大,因此必须对包被抗原(抗体)和酶标抗体(抗原)进行**佳工作浓度的滴定和选择,以达到**佳的测定条件。?1)方阵(棋盘)滴定法选择包被抗原的工作浓度用包被液将抗原作一系列稀释。酶活性实验中缓冲液的作用。贵州缓冲液技术指导
PBS缓冲液中的磷酸盐和盐水可以维持实验体系的离子强度稳定。贵州缓冲液技术指导
在前面提到,将等式同时取对数,并简化就可以得到: 或者这就是Henderson-Hasselbalch方程。值得注意的是,式子中酸及其共轭碱的浓度都是平衡时的浓度,除了酸性过于强的情况下,由于同离子效应的存在,一般都可用此式计算,根据此式可得出下列几点结论:1 缓冲液的pH值与该酸的电离平衡常数Ka及盐和酸的浓度有关。弱酸的pKa值衡定,但酸和盐的比例不同时,就会得到不同的pH值。酸和盐浓度相等时,溶液的pH值与PKa值相同。2 酸和盐浓度等比例增减时,溶液的pH值不变。3 酸和盐浓度相等时,缓冲液的缓冲效率为比较高,比例相差越大,缓冲效率越低,缓冲液的一般有效缓冲范围为pH=pKa±1,pOH=pKb±1。 [1]贵州缓冲液技术指导
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