月桂基硫酸盐胰蛋白胨肉汤(LaurylSulfateTryptoseBroth,简称LST)是一种选择性液体培养基,主要用于检测食品、水、奶制品中的大肠菌群和大肠埃希氏菌。它的原理和使用方法如下:1.**试验原理**:LST培养基中的胰蛋白胨提供碳源和氮源,满足细菌生长需求;氯化钠维持渗透压;乳糖作为可发酵的糖类;磷酸二氢钾和磷酸氢二钾作为pH缓冲剂;月桂基硫酸钠抑制非大肠菌群细菌的生长。2.**培养基配方**:每升培养基包含胰蛋白胨20.0g、氯化钠5.0g、乳糖5.0g、磷酸二氢钾2.75g、磷酸氢二钾2.75g、月桂基硫酸钠0.1g,pH值调节至6.8±0.2(25℃)。3.**试验方法**:称取35.6克LST培养基,加热溶解于1000ml蒸馏水中,分装到带有倒立发酵管的试管中,每管10ml,121℃高压灭菌15分钟,备用。4.**质量控制和典型特征**:在36±1℃培养48±2小时,大肠菌群、大肠杆菌和发酵乳糖的革兰氏阴性细菌产生气体,在小倒管内有气泡;其他细菌无气泡。5.**微生物灵敏度试验**:接种特定的质控菌株,如鼠伤寒沙门氏菌ATCC14028、弗氏柠檬酸杆菌ATCC43864、阴沟肠杆菌ATCC23355、大肠埃希氏菌ATCC8739、粪肠球菌ATCC29212和金黄色葡萄球菌ATCC25923,放置36±1℃需氧培养24-48小时,观察结果。VRBA中的溴青紫红是一种指示剂,具有抑菌和变色作用。3.5%氯化钠三糖铁琼脂培养皿
胆盐乳糖培养基(BL)是一种专门用于增菌培养的微生物培养基,它具有以下特点:1.**用途**:主要用于药品和生物制品中大肠杆菌、沙门氏菌和绿脓杆菌的增菌培养。2.**成分**:包括蛋白胨、乳糖、牛胆盐、氯化钠、磷酸氢二钾和磷酸二氢钾。蛋白胨提供碳氮源,乳糖作为可发酵的糖类,氯化钠维持渗透压,磷酸氢二钠和磷酸二氢钾作为缓冲剂,牛胆盐和去氧胆酸钠作为选择性抑菌剂。3.**pH值**:通常调节至7.4±0.2(25℃)。4.**使用方法**:首先将培养基粉末加入蒸馏水或去离子水,搅拌加热煮沸至完全溶解,分装后进行高压灭菌。然后,将样品处理后加入培养基中,放入恒温培养箱内培养18至24小时,必要时可延长至48小时,观察结果。5.**应用**:胆盐乳糖培养基也用于乳品中大肠菌群的快速检测研究,通过构建检测片法和细胞培养瓶剂法,可以快速检测乳品中的大肠菌群。6.**选择性**:胆盐的存在使得培养基能够选择性地促进革兰氏阴性菌的生长,抑制革兰氏阳性菌的生长,这使得BL培养基在分离和鉴定肠道细菌中非常有用。7.**检测乳糖发酵能力**:由于含有乳糖,该培养基能够用于检测细菌的乳糖发酵能力,革兰氏阴性细菌如大肠杆菌等通常能够将乳糖发酵产生酸或气体。轻唾琼脂预装培养皿大肠杆菌在DC培养基上产生典型的反应,表现为产生黑色素沉淀。
麦康凯琼脂培养基(MacConkeyAgar,简称MAC)是一种具有中等选择性的培养基,主要用于分离和鉴定革兰氏阴性杆菌,尤其是肠道致病菌。以下是它的一些特点和用途:1.**成分**:麦康凯琼脂培养基的主要成分包括蛋白胨、胨、猪胆盐(或牛、羊胆盐)、氯化钠、琼脂、乳糖、结晶紫和中性红。这些成分共同作用,为细菌提供生长所需的营养,同时具有选择性和鉴别性。2.**选择性**:胆盐和结晶紫的添加可以抑制革兰氏阳性菌的生长,而促进某些革兰氏阴性菌(如大肠杆菌和沙门氏菌)的生长。3.**鉴别性**:乳糖作为可发酵的糖类,与中性红结合,可以区分发酵乳糖和不发酵乳糖的细菌。发酵乳糖的细菌会产生酸性环境,使中性红从无色变为红色,从而形成特征性的菌落颜色。4.**菌落特征**:在麦康凯琼脂培养基上,大肠杆菌通常形成红色或粉红色的菌落,而沙门氏菌和志贺氏菌则形成无色或淡色的菌落。5.**pH值**:培养基的pH值一般调节至7.2±0.2(25℃)。6.**用途**:主要用于粪便、分泌物中肠道致病菌及肠球菌的分离培养,也用于检测或验证水、乳品和其他材料中的大肠菌群滴度。
MFC琼脂(也称为4-甲基伞形酮-β-D-葡萄糖苷琼脂,MUG琼脂)是一种用于微生物学检验的选择性培养基,主要用于大肠菌群的滤膜法检测,符合中国国家标准(GB)。其配方包含多价蛋白胨、胰蛋白胨、乳糖、酵母粉、三号胆盐、氯化钠、苯胺蓝、琼脂、玫红酸等成分,pH值调节至7.4±0.2。这种培养基通过胆盐的选择性作用抑制革兰氏阳性菌,同时利用乳糖作为可发酵的糖类,结合指示剂来检测细菌的代谢活动。MFC琼脂的检验原理是利用胰胨、多胨和酵母膏粉提供氮源、维生素和生长因子;氯化钠维持均衡的渗透压;乳糖为可发酵糖类;3号胆盐抑制革兰氏阳性菌;琼脂是培养基的凝固剂;玫红酸和苯胺蓝为pH指示剂。当细菌发酵乳糖时,会产生酸性物质,导致培养基颜色变化,从而可以观察到产酸现象。在实际应用中,MFC琼脂可以用于水质检测,特别是饮用水和水源中粪大肠菌群的测定。使用时,将培养基加热溶解,分装到试管或平皿中,高压灭菌后备用。接种样品后,在适宜的温度下培养,通过观察培养基上菌落的生长情况和颜色变化来判断是否存在大肠菌群。MFC琼脂的制备和使用应遵循相关的国家标准和实验室操作规程,以确保检测结果的准确性和可靠性。EMB培养基的两种染料是:1.艾奥辛(Eosin);2.亚甲蓝(Methylene Blue)。
肌醇测定培养基是一种专门用于测定食品中肌醇含量的微生物培养基,具有以下特点:1.**成分**:该培养基包含葡萄糖、柠檬酸钾、柠檬酸、磷酸二氢钾、氯化钾、硫酸镁、氯化钙、硫酸锰、多种氨基酸(如色氨酸、胱氨酸、异亮氨酸、亮氨酸、赖氨酸、蛋氨酸、苯丙氨酸、酪氨酸、天门冬氨酸、丙氨酸、谷氨酸、精氨酸)、维生素(如盐酸硫胺素、生物素、泛酸钙、盐酸吡哆醇)等,这些成分为微生物提供必需的生长因子和营养物质。2.**pH值**:培养基的pH值通常调节至5.2±0.2(25℃),以适应特定微生物的生长需求。3.**用途**:主要用于婴幼儿食品和乳品中肌醇的测定,符合GB5009.270-2023标准。4.**制备方法**:称取培养基粉末,加热溶解于蒸馏水中,煮沸1分钟,分装试管,每管5ml,加入标准样品或测试样品,用蒸馏水补体积至10ml,121℃高压灭菌5分钟后,迅速冷却备用。5.**质量控制**:在使用肌醇测定培养基时,应进行质量控制,确保培养基的制备和使用符合标准操作程序。6.**储存条件**:应在避光、干燥处储存,未开封保质期通常为三年VRBA(Violet Red Bile Agar)是一种培养基,通常用于选择性分离和鉴定肠道细菌。TOS丙酸盐琼脂预装培养皿
去氧胆酸盐琼脂培养基通常被用于分离和鉴定肠道细菌,尤其是肠杆菌科的细菌。3.5%氯化钠三糖铁琼脂培养皿
0.1%蛋白胨水培养基是一种用于微生物培养的溶液,具有以下特点:1.**低浓度蛋白胨**:培养基中蛋白胨的浓度为0.1%,为微生物提供氮源。2.**pH值稳定**:pH值控制在7.1±0.2,为微生物生长提供适宜的酸碱环境。3.**用途广**:主要用于样品的稀释和冲洗,也适用于微生物的增菌培养。4.**简单配方**:主要成分为蛋白胨和蒸馏水,配方简单,易于配制。5.**质量控制**:具有明确的感官、理化指标和生物学指标,确保培养基的稳定性和适用性。6.**微生物灵敏度试验**:可用于接种质控菌株,进行需氧培养,观察生长情况。7.**储存条件**:应在2~25℃,避光保存,保证培养基的有效期和活性。8.**使用方法**:从储藏室取出后恢复至室温,用75%酒精消毒瓶盖,按规定方法进行加样,之后置于培养箱中按规定温度和时间培养。9.**灭菌处理**:使用前需经过121℃高压灭菌15分钟,确保培养基的无菌状态。这些特点使得0.1%蛋白胨水培养基成为微生物实验室中常用的培养基之一,特别适合用于微生物的初步培养和计数。3.5%氯化钠三糖铁琼脂培养皿
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