1/2cs生长培养基的培养结果为：马铃薯茎端在1/2cs生长培养基上的存活率为100％，培养16d的幼苗，表现为植株健壮、平均茎高、平均茎中粗为，叶色浓绿，根系发达、平均根数为8个。如图4所示。对比培养例4：将1/2cs基本培养基替换为1/2ms基本培养基，其余完全同培养实例4，1/2ms基本培养基的成分及用量如表1所示。1/2ms生长培养基的培养结果为：马铃薯茎端在1/2ms生长培养基上的存活率为100％，培养16d的幼苗，表现为植株健壮、平均茎高、平均茎中粗为，叶色浓绿，根系发达、平均根数为6个。如图4所示。培养实例4和对比培养例4的培养结果比较：马铃薯茎端在1/2cs生长培养基和1/2ms生长培养基上的存活率均为100％；在相同条件下培养16d时，与1/2ms生长培养基相比，1/2cs生长培养基中的幼苗长势更佳，其茎高、茎中粗、根的数量均优于1/2ms生长培养基。如图4所示。培养实例5：哥伦比亚型拟南芥叶片及根愈伤**诱导(1)拟南芥叶片愈伤**诱导培养基：cs基本培养基+，用超纯水溶解，。cs基本培养基的成分及用量如表1所示。(2)拟南芥根愈伤**诱导培养基：cs基本培养基+2,，用超纯水溶解，。cs基本培养基的成分及用量如表1所示。。MEM培养基适用于多种哺乳动物细胞的体外培养和实验研究。河北Ham's F12培养基技术指导

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    实验组和对照组3选用发酵中期添加琥珀酸，此时，菌体增殖放缓，以产酸为主，琥珀酸对三羧酸循环有正向促进作用，而对乙醛酸循环途径起**作用，从而导致谷氨酸产量的增加；梯度试验发现，琥珀酸添加量过**于10g/l），并不会对谷氨酸产量带来进一步的提升，综合成本考虑，选择低于10g/l的添加量较为合适。对照组2和实验组在发酵中后期添加壳聚糖，能够改变细胞壁的通透性，促进谷氨酸分泌到胞外，从而提升谷氨酸产量和糖酸转化率；但是壳聚糖添加量（超过100mg/l）过大会导致抑菌现象发生，进而造成菌株死亡。虽然，上文中已经用一般性说明及具体实施方案对本发明作了详尽的描述，但在本发明基础上，可以对之作一些修改或改进，或在实施案例之外的树种实施本方法，这对本领域技术人员而言是显而易见的。因此，在不偏离本发明精神的基础上所做的这些修改，改进或范围的扩大，均属于本发明要求保护的范围。

    附图说明图1是1/2cs和1/2ms两种培养基上，哥伦比亚型拟南芥无菌苗培养的对比效果图，a：无菌苗在培养基中生长情况；b：无菌苗莲座叶及根系发育；c：萌发率；d主根长度；a和b中bar＝；图2是1/2cs和1/2ms两种培养基上，兰兹贝格型拟南芥无菌植株培养的对比效果图，a：无菌植株在培养基中生长情况；b：无菌植株地上部分及根系发育；c：无菌植株花***发育(左)和花粉的亚历山大染色(右)；d：主根长度；e：株高；f：莲座叶长度；g：成熟花粉活力；a中bar＝、b中bar＝、c中花***bar＝、c中花粉bar＝15um；图3是1/2cs和1/2ms两种培养基上，油菜无菌苗培养的对比效果图，a：无菌植株在培养基中生长情况；b：无菌苗地上部分及根系发育；c：茎高；d：茎中粗；e：主根长；f：大于；a中bar＝、b中bar＝；图4是1/2cs和1/2ms两种培养基上，马铃薯无菌苗培养的对比效果图，a：无菌植株在培养基中生长情况；b：无菌苗地上部分及根系发育；c：茎高；d：茎中粗；e：根数；a和b中bar＝；图5是cs和ms两种培养基上，哥伦比亚型拟南芥叶片及根愈伤**诱导的对比效果图，a：叶片愈伤**；b：叶片愈伤**诱导率；c：根愈伤**；d：根愈伤**诱导率；a和c中bar＝；图6是cs和ms两种培养基上。MEM培养基在细胞生物学研究中的基础培养基之一。

    式中：N0—开始**（t=0）时原有活菌数；Nt----经时间t后残存活菌数。k：意义同上；t：表示理论**时间k=（）logNt/N0；比死亡速率常数K，K值大，表明微生物容易死亡。理论**时间的计算需要注意以下几个问题：（1）K值因不同的微生物种类不同、不同的生理状态、不同的外界环境，差别很大，实质上，它是微生物热阻的一种表示形式，微生物的热阻越大，K值也越小。可以取耐热性芽孢杆菌的K进行计算。(2)在计算过程中，N0，Nt如何取值？N0为**开始时培养基中活微生物数，可以参考一般培养基中的活微生物数为（1-2）×107个/ml；Nt通常取，既**失败的概率为千分之一。（3）上述**时间，通常称之为理论**时间，只可以用于工程计算中，在实践过程中，因蒸汽的压力问题（不稳定）、蒸汽的流量问题有很大差别，甚至培养基中的固体颗粒的大小、培养基的粘度等因素，都会影响**效果，实际的设计和操作计算时间可作适当比例的延长或缩短。在实际生产中，通常采用经验数值：间歇**，121℃，20—30分钟；连续**，137℃，15—30s，在维持罐中保温8—20分钟。4、**温度的选择在培养基**过程中，除了杂菌死亡，还伴随着培养基成分的破坏。因此必须选择既能达到**目的。无血清培养基适用于需要无血清环境的细胞。河北Ham's F12培养基技术指导

使用减血清培养基能减少实验的误差和干扰。河北Ham's F12培养基技术指导

    1.细胞培养基的种类按照细胞培养基的发展历史，细胞培养基大致可分为平衡盐溶液、天然细胞培养基、合成细胞培养基、无血清细胞培养基、限定化学成分细胞培养基等几大种类。（balancedsaltsolution，BSS）BSS主要是由无机盐、葡萄糖组成，它的作用是维持细胞渗透压平衡，保持pH稳定及提供简单的营养。其主要用于细胞的漂洗、配制其他试剂等。几种常用的BSS配方如下（表1-1）。D-Hank's与Hank's的一个主要区别是前者不含有Ca2+和Mg2+，因此D-Hank's常用于配制胰酶溶液。因为Ca2+、Mg2+是细胞膜的重要组成成份，参与细胞粘附等功能，使用不含Ca2+、Mg2+的BSS可避免细胞结团。此外，Hanks液和Earle液是常用的BSS基础溶液，前者缓冲能力较弱，适合于密闭培养；后者缓冲能力较强，适合于5%CO2的培养条件。表1-1几种常用的BSS配方（g/L）天然培养基指来自动物体液或利用**分离提取的一类培养基，如血浆、血清、***、鸡胚浸出液等。其***是营养成分丰富，培养效果良好，但缺点是成分复杂，来源受限且制作过程复杂、批间差异大。目前***使用的天然培养基是血清，另外各种**提取液、促进细胞贴壁的胶原类物质在培养某些特殊细胞也是必不可少。河北Ham's F12培养基技术指导

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