三)、试验结果:初代培养:使用本发明的消毒方法,消毒成功率能达到80%,诱导培养基萌芽率能达到90%,可以成功建立无菌再生体系。继代培养:使用本发明的增殖培养基,绣球组培苗增殖倍率能够达到8~10倍,组培苗高度一致,生长健壮。生根培养:使用本发明的生根培养基,绣球组培苗生根率能够达到95%,根系发达,健壮,可以成功用于移栽大棚。本发明所指ms培养基是murashige和skoog研制的培养基,其成分配方表见表1。1/2ms培养基是指大量元素含量为ms培养基的一半,其他成分用量相同。表1、ms培养基成分表本发明涉及的植物生长调节剂有:6-ba—6-苄氨基嘌呤;ga3—赤霉素;iba—吲哚丁酸,naa—萘乙酸。本发明中的诱导培养基、增殖培养基和生根培养基均为液体培养基。本具体实施方式的实施例均为本发明的较佳实施例,并非依此限制本发明的保护范围,故:凡依本发明的结构、形状、原理所做的等效变化,均应涵盖于本发明的保护范围之内。减血清培养基在减少实验误差方面表现出色。甘肃无血清培养基价格
**早开发的基础培养基(minimalessentialmedium,MEM),其本质为含有盐、氨基酸、维生素和其他必需营养物的pH缓冲的等渗混合物。在此基础上,DMEM、IMDM、HAMF12、PRMI1640等各种合成细胞培养基被不断开发出来。常用合成培养基的配方此处不详细介绍,其特性及应用的范围见表1-2。表1-2常用合成培养基的特性及应用的范围培养基名称特性及应用范围199细胞培养基添加适量的血清后,可***用于多种细胞培养,并用于**学、*苗生产等。MEM细胞培养基MEM(MinimalEssentialMedium)培养基有含Earle's平衡盐的类型,也有含Hanks'平衡盐的类型;有高压**型的,也有过滤**型的;还有含非必需氨基酸的类型。是**基本、适用范围**广的细胞培养基。DMEM细胞培养基DMEM(Dulbecco’smodifiedMinimalEssentialMedium)是由Dulbecco在MEM培养基的基础上改良获得的,各成分份量加倍,分低糖(1000mg/L)、高糖(4500mg/L)两种类型。细胞生长快。附着稍差的肿*细胞、克隆培养用高糖效果较好,常用于杂交*的骨髓*细胞和DNA转染的转化细胞培养。IMDM细胞培养基IMDM(Iscove’smodifiedDMEM)是由Iscove在DMEM基础上改良,增加了几种氨基酸和胱氨酸量等。可用于杂交*细胞培养。湖北Ham's F12培养基是什么无酚红培养基适用于对酚红敏感的实验设置。
本氏***叶片及根愈伤**诱导的对比效果图,a:叶片愈伤**;b:叶片愈伤**诱导率;c:根愈伤**;d:根愈伤**诱导率;a和c中bar=;图7是cs和ms两种培养基上,水稻成熟胚愈伤**诱导的对比效果图,a:水稻成熟胚愈伤**;b:水稻成熟胚愈伤**诱导率;a中bar=;图8是用不同ph的超纯水(ph为)配制的cs、ms、1/2cs和1/2ms液体培养基ph值稳定性比较效果图;图9是在未调ph和将ph调至、ms、1/2cs和1/2ms液体培养基中马铃薯幼苗的生长状况的比较效果图,a:不同液体培养基培养前的无菌苗生长情况;b1、c1和d1:1/2ms未调ph液体培养基培养效果;b2、c2和d2:1/2cs未调ph液体培养基培养效果;b3、c3和d3:ms未调ph液体培养基培养效果;b4、c4和d4:cs未调ph液体培养基培养效果;b5、c5和d5:1/;b6、c6和d6:1/;b7、c7和d7:;b8、c8和d8:;a、b、c和d中bar=;图10是对在未调ph和将ph调至、ms、1/2cs和1/2ms液体培养基中马铃薯幼苗的茎高(a)、茎中粗(b)、根长(c)、鲜重(d)进行统计的比较效果图。具体实施方式下面结合附图和实施例对本发明作进一步描述。实施例一,本实施例广适性植物**培养基,其每1000ml培养基中含有:kno32662mg、。
二氧化碳不断被释放,培养液变酸,pH值发生变化。酚红是细胞培养基中**常用的pH指示剂,但依靠细胞培养基中的酚红等pH指示剂进行判断,需要实验员的经验积累,存在较大的主观性。实际上,个性化细胞培养基或是无血清细胞培养基中酚红含量较少或是不含酚红,只能通过pH计或者pH电极进行pH值的检测,结果更为准确可靠。缓冲能力细胞培养基应具有一定的缓冲能力。细胞培养过程中造成细胞培养液pH波动的主要物质是细胞代谢产生的CO2。在封闭式培养过程中CO2与水结合产生碳酸,细胞培养液pH很快下降;打开培养器具时CO2逸出则会引起pH升高。细胞培养基通常采用NaHCO3-CO2缓冲系统,按下列化学反应方程式调节细胞培养基的pH值:H2O+CO2→H2CO3⇌H++HCO3-NaHCO3⇌Na++HCO3-此外,还有缓冲能力较高的磷酸盐缓冲系统。但碳酸盐缓冲系统的细胞毒性小、成本低,在细胞培养中应用得更为***。另一种较为常用的缓冲液是HEPES(羟乙基哌嗪乙硫磺酸)液,它是一种非离子两性缓冲液,在pH~。高浓度的HEPES可能对细胞**性作用,细胞培养时HEPES的添加浓度一般为10~25mmol/L。渗透压细胞必须生活在等渗的环境中,大多数体外培养的细胞对渗透压有一定耐受性。研究显示。无血清培养基有助于细胞在无血清环境中的生长。
本发明属于氨基酸生产技术领域:,具体涉及一种优化的谷氨酸发酵培养基。背景技术::谷氨酸,是一种酸性氨基酸。分子内含两个羧基,化学名称为α-氨基戊二酸。谷氨酸是里索逊1856年发现的,为无色晶体,有鲜味,微溶于水,而溶于盐酸溶液,等电点。大量存在于谷类蛋白质中,动物脑中含量也较多。谷氨酸在生物体内的蛋白质代谢过程中占重要地位,参与动物、植物和微生物中的许多重要化学反应。谷氨酸钠俗称味精,是重要的鲜味剂,对香味具有增强作用。谷氨酸钠***用于食品调味剂,既可单独使用,又能与其它氨基酸等并用。用于食品内,有增香作用。在食品中浓度为,每人每天允许摄入量为0-120微克/千克(以谷氨酸计)。在食品加工中一般用量为-。谷氨酸主要以微生物发酵制备而得,通过优化发酵培养基,使得菌体增殖速率提高,可以提高氨基酸的产量。现有技术对谷氨酸发酵培养基优化进行了大量的研究,例如文献1“基于pb试验和响应面分析法对谷氨酸棒杆菌cnl021发酵培养基优化,**酿造2014年”,通过**陡爬坡试验和响应面分析法对发酵培养基组成进行优化,得到谷氨酸棒杆菌**适发酵培养基组,较未优化培养基的发酵培养基产酸量提高了。无血清培养基确保了细胞的纯净生长环境。甘肃无血清培养基价格
MEM培养基适用于多种哺乳动物细胞的体外培养和实验研究。甘肃无血清培养基价格
C)大肠埃希菌++--产气肠杆菌--++志贺菌属-+--沙门菌属-+-+表硫化氢和尿素酶试验对肠杆菌属的鉴别试验伤寒沙门菌甲型副伤寒沙门菌变形杆菌志贺菌属大肠埃希菌克雷伯菌属硫化氢试验-/+++++++---尿素酶试验--+--+乳糖发酵试验----++在培养基中加入指示剂或某种化学物质**不需要的**生长,利于需要的**分离,这种培养基称为选择性培养基。常用的抑菌剂有胆盐、煌绿、玫瑰红钠、亚硒酸钠等。常用的指示荆有溴甲酚紫、溴麝香草酚蓝等。美蓝是氧化还原指示剂。例如,在培养基内加入青霉素可**革兰阳性**,而利于革兰阴性**的生长;如果加入链霉素,则可获得与加青霉素相反的选择效果;加入制霉素可*****,有利于**的分离。又如亚**铋琼脂,既能**革兰阳性**生长,又能**许多革兰阴性**生长,但伤寒沙门菌却能在这个培养基上生长出具有棕色环的菌落。SS琼脂是临床**检验中一种常用的选择性培养基。大肠埃希菌在SS培养基上,因发酵乳糖而产酸,使指示剂中性红变深,并使胆盐沉淀,所以菌落红色而不透明。沙门菌分解含硫氨基酸而产生硫化氢,硫化氢与枸橼酸铁形成硫化铁,所以菌落中心呈黑色。痢疾志贺菌,既不发酵乳糖也不产生硫化氧。甘肃无血清培养基价格
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