水解乳蛋白是乳白蛋白经蛋白酶和肽酶水解的产物,含丰富的多肽、氨基酸和碳水化合物。一般配制成(采用平衡盐溶液溶解)与合成培养基(如MEM细胞培养基)以1:1的比例混合使用。目前用于细胞培养的血清主要是牛血清,培养某些特殊细胞也用人血清、马血清等。牛血清对绝大多数哺乳动物细胞都是适合的,但并不排除在培养某种细胞时使用其他动物血清更合适。血清中含有各种血浆蛋白、多肽、脂肪、碳水化合物、生长因子、***、无机物等,这些物质对促进细胞生长或**生长活性是达到生理平衡的。此外,血清含一些对细胞产生毒性的物质,如多胺氧化酶,能与来自高度繁殖细胞的多胺反应(如精胺、亚精胺)形成有细胞毒性作用的聚精胺。补体、抗体、*****等都会影响细胞生长,甚至造成细胞死亡。目前,血清多作为一种添加成分与合成培养基混合使用,使用浓度一般为5~20%,**常用是10%。由于水解乳蛋白和血清成份复杂,批间差异大及存在**等外源污染风险,对下游生物制品的分离纯化和安全性都存在较大的影响,在生物制*行业的使用也越来越少。因此,基于对血浆成份的分析,合成细胞培养基应运而生。合成培养基是根据天然培养基的成分,用化学物质模拟合成、人工设计、配制的培养基。无血清培养基为细胞提供了无血清的纯净环境。云南MEM a培养基价格查询
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1.细胞培养基的种类按照细胞培养基的发展历史,细胞培养基大致可分为平衡盐溶液、天然细胞培养基、合成细胞培养基、无血清细胞培养基、限定化学成分细胞培养基等几大种类。(balancedsaltsolution,BSS)BSS主要是由无机盐、葡萄糖组成,它的作用是维持细胞渗透压平衡,保持pH稳定及提供简单的营养。其主要用于细胞的漂洗、配制其他试剂等。几种常用的BSS配方如下(表1-1)。D-Hank's与Hank's的一个主要区别是前者不含有Ca2+和Mg2+,因此D-Hank's常用于配制胰酶溶液。因为Ca2+、Mg2+是细胞膜的重要组成成份,参与细胞粘附等功能,使用不含Ca2+、Mg2+的BSS可避免细胞结团。此外,Hanks液和Earle液是常用的BSS基础溶液,前者缓冲能力较弱,适合于密闭培养;后者缓冲能力较强,适合于5%CO2的培养条件。表1-1几种常用的BSS配方(g/L)天然培养基指来自动物体液或利用**分离提取的一类培养基,如血浆、血清、***、鸡胚浸出液等。其***是营养成分丰富,培养效果良好,但缺点是成分复杂,来源受限且制作过程复杂、批间差异大。目前***使用的天然培养基是血清,另外各种**提取液、促进细胞贴壁的胶原类物质在培养某些特殊细胞也是必不可少。
培养基制备培养基使用说明中有加热溶解后高压**,有的加热沸腾后高压**,见过一些实验室,不经加热直接高压**,也有的实验室一律加热沸腾后高压**。大家是怎们制备的,不加热或全部沸腾对检测结果有没有影响?品牌:安捷伦型号:1260Lnifntiy参考报价:20万-50万培养基制备培养基制备后应保持一定的透明度,下面制备操作影响比较大的是(��)。A、原料称量混合溶解B、加热煮沸,调PH值C、过滤、分装容器D、消毒或**品牌:安捷伦型号:1260Lnifntiy参考报价:20万-50万【求助】培养基制备请问牛肉膏与牛肉膏粉的使用有何区别?可互相替代吗?使用比例相同吗?品牌:安捷伦型号:1260Lnifntiy参考报价:20万-50万培养基的制备方法培养基的制备方法以下为常规方法,如配方中有特殊规定或要求,以配方为***依据。1.根据配方,计算各种营养成分用量。一般*品可用普通*物天平称量,用量少的*品,可按比例配成高浓度溶液,再按所需量用移液管吸取。称好的*品放入品牌:安捷伦型号:1260Lnifntiy参考报价:20万-50万【求助】培养基制备系统哪位大虾有关于培养基制备系统相关的资料,原理、应用、品牌、技术对比等越详细越好。无酚红培养基减少了酚红对细胞的影响。
附图说明图1是1/2cs和1/2ms两种培养基上,哥伦比亚型拟南芥无菌苗培养的对比效果图,a:无菌苗在培养基中生长情况;b:无菌苗莲座叶及根系发育;c:萌发率;d主根长度;a和b中bar=;图2是1/2cs和1/2ms两种培养基上,兰兹贝格型拟南芥无菌植株培养的对比效果图,a:无菌植株在培养基中生长情况;b:无菌植株地上部分及根系发育;c:无菌植株花***发育(左)和花粉的亚历山大染色(右);d:主根长度;e:株高;f:莲座叶长度;g:成熟花粉活力;a中bar=、b中bar=、c中花***bar=、c中花粉bar=15um;图3是1/2cs和1/2ms两种培养基上,油菜无菌苗培养的对比效果图,a:无菌植株在培养基中生长情况;b:无菌苗地上部分及根系发育;c:茎高;d:茎中粗;e:主根长;f:大于;a中bar=、b中bar=;图4是1/2cs和1/2ms两种培养基上,马铃薯无菌苗培养的对比效果图,a:无菌植株在培养基中生长情况;b:无菌苗地上部分及根系发育;c:茎高;d:茎中粗;e:根数;a和b中bar=;图5是cs和ms两种培养基上,哥伦比亚型拟南芥叶片及根愈伤**诱导的对比效果图,a:叶片愈伤**;b:叶片愈伤**诱导率;c:根愈伤**;d:根愈伤**诱导率;a和c中bar=;图6是cs和ms两种培养基上。无血清培养基适合于需要无血清环境的细胞系。湖北DMEM/F12培养基市场报价
使用减血清培养基能减少细胞应激反应。云南MEM a培养基价格查询
平衡盐溶液(balancedsaltsolution,BSS)简称盐溶液,集缓冲液的缓冲能力、生理盐水的等渗性以及培养液的营养供应特点于一体,兼具维持渗透压、缓冲和调节溶液的酸碱度、同时供给细胞生存所必需的能量和无机离子成分的作用。各种BSS的缓冲系统有所不同,其中以Hank’s液和Earle’s液为例,它们主要差别在于碳酸氢钠的水平,在Earle’s(g/L)中比在Hank’s(g/L)中高。碳酸氢钠需用高水平的CO2平衡,以维持溶液的pH值。Eagles液在空气水平的CO2中,溶液会变碱,Hank’s液在CO2培养箱中会变酸。如果希望在CO2培养箱中保存**,需要用Earle’s液,。如果**是清洗将要在细胞培养基中储存的**,用Hank’s液就可以了。表3-1几种常用的平衡盐溶液配方(g/L)一些BSS含有的Ca2+、Mg2+是细胞膜的重要组成成分,同时参与许多重要的细胞功能活动。但它们有使细胞凝集的作用,在配制分散细胞的消化液和特殊用途的细胞洗涤时,宜采用Ca2+、Mg2+含量较低的Dulbecco液或无Ca2+、Mg2+的D-Hanks液,或者PBS液。概述基础细胞培养基主要包括199、MEM、RPMI-1640、DMEM、DMEM/F12等。主要成分是氨基酸、维生素、碳水化合物、无机盐和其它一些辅助物质。云南MEM a培养基价格查询
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