6.磷酸酶EDTA相对不溶。可以用磁力搅拌器搅拌,或将其置于4度的冰箱中,溶解后过滤并**。7.可配备2-3倍血浆酶,节省时间和过滤器。使用时,请对PBS消毒。8.将储存溶液储存在-20°C的冰箱中,然后将溶液储存在4°C。使用时,请勿将其放在27°C的水浴中,因为这会使自由基酶迅速无法使用。使用前放置一次。是的,因为添加的数量很少,因此通常不会冻结细胞。9.在消化过程中,向培养瓶中加入适量的胰酶。个人经验,一般在10cm培养皿中加。加入后,立即摇动培养皿盖住胰酶。一旦充满,用负压吸引多余的胰酶排出,将其加入37度培养箱中进行消化。10.请注意,过量的胰酶对细胞有害,而过量的EDTA也会影响粘附,因此无需将细胞浸入血浆酶中进行消化。11.磷酸酶37具有**佳的消化作用,并具有在37度以下消化的能力。在消化过程中,甚至不需要将一些易于消化的细胞放入培养箱中。请注意,它不能消化太长时间。四、实验所需试剂清单:序列产品名货号CAS备注11000ul蓝吸头FT-10002氢氧化钠JT86501310-73-23PBSHC14884EDTABSH-59-55螯合树脂chelex100SS6072以上为EDTA-胰蛋白酶的配制,实验请选用高质量试剂。胰酶4℃保存,一年有效;-20℃可保存更长时间。广东国产胰酶价格查询
1、胰酶是,就是说PBS,注意,尽量不要用水来溶,因为要保持渗透压。2、EDTA的工作液溶度是-,根据细胞消化的难易程度自己调整。EDTA并不是必须的,容易消化的细胞可不加。EDTA对细胞贴壁性有影响,因此使用时要甚重。如果影响贴壁,但消化时必须要用,那么在用完全培养基终止消化后,可离心弃上清,再加完全培养基培养,可去除EDTA。如果对贴壁没影响,那么可不离心。3、EDTA的浓度也是质量体积比。和胰酶一起溶于PBS。4、注意,血清可终止胰酶的作用,但不能终止EDTA的作用,对有些细胞来说,终止消化后的离心是必要的。5、胰酶和EDTA在pH为8左右的时候**易溶解,在配制时可先滴几滴NaOH将pH调至8,注意,胰酶可使溶液变酸,所以要边溶边测pH,随时调整。注意,不可加过量NaOH,否则过碱,细胞会受不了。6、胰酶EDTA相对比较难溶,可用磁力搅拌器,或放入4度冰箱过夜,待溶解后过滤**。7、可配2-3乘的胰酶,这样比较节约时间和滤器,用的时候对上**PBS即可。8、储存液放在-20度冰箱冻存,使用液放在4度,用的时候不要放在27度水浴锅温浴,因为这样会让胰酶很快失效,使用前放在室温下一会。天津胰酶价格对比培养细胞时,胰酶和双抗该怎么用?
细胞培养的优点:1.研究的对象是活细胞在实验过程中,根据要求可始终保持细胞活力,并可长时间监控、检测甚至定量评估一部分活细胞的情况,包括活细胞的形态、结构、生命活动等。2.研究条件可以人为控制pH、温度、氧气、二氧化碳、张力等物理化学的条件,可以根据实际需要进行人为的控制,同时,可以施加化学、物理、生物等因素作为条件而进行实验观察,这些因素同样可以处于严格控制之下。3.研究的样本可以达到比较均一性通过细胞培养一定代数后,所得到的细胞系则可以达到均一性而属于同一类型的细胞,需要时,可采用克隆化等方法使细胞达到纯化。4.研究内容便于观察、检测和记录采用各种研究技术:如倒置生物显微镜、荧光显微镜、电子显微镜、流式细胞术、激光共焦显微镜、免疫组织化学、原位杂交、同位素标记等各种仪器设备。
0.25%胰酶是细胞生物学中常用的一种生物试剂,下面汇总一下胰酶使用过程中常见的一些问题。
胰酶的使用浓度是多少?胰酶浓度:常用0.25%胰酶+0.02%EDTA作为消化液。
胰酶的保存胰酶可在-20℃下保存一年。随着时间延长,胰酶的消化能力减弱。胰酶可分装冻存,在使用前从-20℃冰箱取出。尽量避免在4℃长期保存。胰酶使用的时候要注意什么?(1)在使用胰酶细胞消化液的过程中要特别注意避免消化液被细菌污染。(2)胰酶细胞消化液消化细胞时间不宜过长,否则细胞铺板后生长状况会较差。 消化液经过过滤除菌,可以直接用于培养细胞的消化,或者一些组织的消化。
收藏查看我的收藏0有用+1已投票0胰蛋白酶编辑锁定本词条由“科普**”百科科学词条编写与应用工作项目审核。胰蛋白酶Trypsin(Parenzyme)为蛋白酶的一种,EC,是从牛、羊、猪的胰脏提取的一种丝氨酸蛋白水解酶。在脊椎动物中,作为消化酶而起作用。在胰脏是胰蛋白酶的前体胰蛋白酶原被合成后,作为胰液的成分而分泌,受肠激酶,或胰蛋白酶的限制分解成为活化胰蛋白酶,是肽链内切酶,它能把多肽链中赖氨酸和精氨酸残基中的羧基侧切断。它不仅起消化酶的作用,而且还能限制分解糜蛋白酶原、羧肽酶原、磷脂酶原等其它酶的前体,起活化作用。是特异性**强的蛋白酶,在决定蛋白质的氨基酸排列中,它成为不可缺少的工具。中文名胰蛋白酶英文名Trypsin别称胰酶化学式C6H15O12P3分子量≈24000CAS登录号9002-07-7EINECS登录号232-650-8[1]熔点115℃[1]水溶性易溶外观白色或类白色目录1生物制品简介▪物化性质2*典标准▪来源含量▪制法要求▪性状▪鉴别▪检查▪效价测定▪制剂3胰蛋白酶的医学检查▪检查名称▪分类▪胰蛋白酶的测定原理▪试剂▪操作方法▪正常值▪化验结果临床意义▪附注▪相关疾病4生物*品说明▪*理作用▪适应证▪禁忌证▪用法用量▪注意事项▪不良反应:▪**点评5其他。为什么收到的胰酶会有颜色差异?广东国产胰酶价格查询
胰酶细胞消化液和胰蛋白酶消化液是一样的吗?广东国产胰酶价格查询
对一般细胞0.25%胰酶(胰蛋白酶,Trypsin)配方:100mlPBS,0.25g胰酶步骤:1先配100mlPBS(1000mlPBS:8.0gNaCl,3.4785gPO4HNa2·12H2O/2.9gPO4HNa2,0.2gKCl,0.2gPO4H2K溶于1000ml蒸馏水)2称胰酶0.25g3加入PBS中,低速搅拌〈4h冰浴中,或者4℃过夜低速搅拌0.5h冰浴中4调PH7.45仍在冰浴中6过滤,分装,-20℃保存,4℃短期内用完tip:低速很重要,机械搅拌对酶是一种冲击,如果起沫,酶就变性了。低温,防止酶失活对难消化的细胞:在上述配方中,加入0.02g的EDTA(0.02%)tip:因为EDTA可以络合Ca2,增加消化效力广东国产胰酶价格查询
免责声明: 本页面所展现的信息及其他相关推荐信息,均来源于其对应的用户,本网对此不承担任何保证责任。如涉及作品内容、 版权和其他问题,请及时与本网联系,我们将核实后进行删除,本网站对此声明具有最终解释权。
暂无推荐产品!