1.细胞培养基的种类按照细胞培养基的发展历史，细胞培养基大致可分为平衡盐溶液、天然细胞培养基、合成细胞培养基、无血清细胞培养基、限定化学成分细胞培养基等几大种类。（balancedsaltsolution，BSS）BSS主要是由无机盐、葡萄糖组成，它的作用是维持细胞渗透压平衡，保持pH稳定及提供简单的营养。其主要用于细胞的漂洗、配制其他试剂等。几种常用的BSS配方如下（表1-1）。D-Hank's与Hank's的一个主要区别是前者不含有Ca2+和Mg2+，因此D-Hank's常用于配制胰酶溶液。因为Ca2+、Mg2+是细胞膜的重要组成成份，参与细胞粘附等功能，使用不含Ca2+、Mg2+的BSS可避免细胞结团。此外，Hanks液和Earle液是常用的BSS基础溶液，前者缓冲能力较弱，适合于密闭培养；后者缓冲能力较强，适合于5%CO2的培养条件。表1-1几种常用的BSS配方（g/L）天然培养基指来自动物体液或利用**分离提取的一类培养基，如血浆、血清、***、鸡胚浸出液等。其***是营养成分丰富，培养效果良好，但缺点是成分复杂，来源受限且制作过程复杂、批间差异大。目前***使用的天然培养基是血清，另外各种**提取液、促进细胞贴壁的胶原类物质在培养某些特殊细胞也是必不可少。无血清培养基适合于需要无血清环境的细胞系。山东MEM a培养基进口

    Nutrientagar)培养基品牌：安捷伦型号：1260Lnifntiy参考报价：20万-50万培养基制备的基本方法和注意事项1.培养基配方的选定同一种培养基的配方在不同著作中常会有某些差别。因此，除所用的是标准方法，应严格按其规定进行配制外．一般均应尽量收集有关资料．加以比较核对．再依据自己的使用目的加以选用，记录其来源。2．培养基的制备记品牌：安捷伦型号：1260Lnifntiy参考报价：20万-50万【分享】146种培养基的制备和大家一起分享bbs/images/品牌：安捷伦型号：1260Lnifntiy参考报价：20万-50万培养基制备的标准操作程序(SOP)名称：培养基制备的标准操作程序(SOP)关键词：培养基制备标准操作程序目的：如何使用成品培养基干粉制备各种合格的分离培养基。背景知识：选填项目原理：选填项目主体内容：操作步骤1.在玻璃容器中加入所需蒸馏水的二分之一量，品牌：安捷伦型号：1260Lnifntiy参考报价：20万-50万酵母培养基的制备一、目的要求了解合成培养基、半合成培养基和天然培养基的配制原理。学习和掌握麦芽汁培养基、马铃薯葡萄糖培养基、豆芽汁葡萄糖培养基和察氏培养基的配制方法。海南无血清培养基包括MEM培养基在细胞培养中表现出高效的稳定性。

    实验组和对照组3选用发酵中期添加琥珀酸，此时，菌体增殖放缓，以产酸为主，琥珀酸对三羧酸循环有正向促进作用，而对乙醛酸循环途径起**作用，从而导致谷氨酸产量的增加；梯度试验发现，琥珀酸添加量过**于10g/l），并不会对谷氨酸产量带来进一步的提升，综合成本考虑，选择低于10g/l的添加量较为合适。对照组2和实验组在发酵中后期添加壳聚糖，能够改变细胞壁的通透性，促进谷氨酸分泌到胞外，从而提升谷氨酸产量和糖酸转化率；但是壳聚糖添加量（超过100mg/l）过大会导致抑菌现象发生，进而造成菌株死亡。虽然，上文中已经用一般性说明及具体实施方案对本发明作了详尽的描述，但在本发明基础上，可以对之作一些修改或改进，或在实施案例之外的树种实施本方法，这对本领域技术人员而言是显而易见的。因此，在不偏离本发明精神的基础上所做的这些修改，改进或范围的扩大，均属于本发明要求保护的范围。

    二氧化碳不断被释放，培养液变酸，pH值发生变化。酚红是细胞培养基中**常用的pH指示剂，但依靠细胞培养基中的酚红等pH指示剂进行判断，需要实验员的经验积累，存在较大的主观性。实际上，个性化细胞培养基或是无血清细胞培养基中酚红含量较少或是不含酚红，只能通过pH计或者pH电极进行pH值的检测，结果更为准确可靠。缓冲能力细胞培养基应具有一定的缓冲能力。细胞培养过程中造成细胞培养液pH波动的主要物质是细胞代谢产生的CO2。在封闭式培养过程中CO2与水结合产生碳酸，细胞培养液pH很快下降；打开培养器具时CO2逸出则会引起pH升高。细胞培养基通常采用NaHCO3-CO2缓冲系统，按下列化学反应方程式调节细胞培养基的pH值：H2O+CO2→H2CO3⇌H++HCO3－NaHCO3⇌Na++HCO3－此外，还有缓冲能力较高的磷酸盐缓冲系统。但碳酸盐缓冲系统的细胞毒性小、成本低，在细胞培养中应用得更为***。另一种较为常用的缓冲液是HEPES（羟乙基哌嗪乙硫磺酸）液，它是一种非离子两性缓冲液，在pH~。高浓度的HEPES可能对细胞**性作用，细胞培养时HEPES的添加浓度一般为10～25mmol/L。渗透压细胞必须生活在等渗的环境中，大多数体外培养的细胞对渗透压有一定耐受性。研究显示。无酚红培养基适用于对酚红敏感的实验。

    愈伤**诱导率为100％。如图6所示。对比培养例6：将cs基本培养基替换为ms基本培养基，其余完全同培养实例6，ms基本培养基的成分及用量如表1所示。ms诱导培养基的诱导结果为：本氏***叶片愈伤**诱导时，培养15-18d的叶片略微增厚，在叶片四周产生较少的淡绿色愈伤**，愈伤**诱导率为90％，在愈伤**团块上产生的嫩绿色不定芽数量较少；本氏***根愈伤**诱导时，培养9-11d在切口处产生大量淡黄色致密的愈伤**，愈伤**诱导率为100％。如图6所示。培养实例6和对比培养例6的诱导结果比较：用上述方法进行本氏***叶片愈伤**诱导时，cs诱导培养基愈伤**诱导率为100％，而ms诱导培养基的诱导率*为90％，在所述相同培养条件下，与ms诱导培养基相比，cs诱导培养基可更快诱导出大量致密的叶片愈伤**、产生更多的不定芽；用上述方法进行本氏***根愈伤**诱导时，cs诱导培养基与ms诱导培养基诱导出的根愈伤**形态相近，两种培养基的根愈伤**诱导率均为100％。如图6所示。培养实例7：水稻成熟胚愈伤**诱导(1)水稻种子消毒及筛选：a、选种：以籼稻缙恢10号为例，将水稻种子晾晒干燥后于4℃下长期保存，挑选籽粒饱满、大小基本一致的水稻种子，用剪刀从种子中部剪开，去除谷壳。无血清培养基确保了实验结果的纯净性。湖南RPMI1640培养基供应商

使用减血清培养基能减少细胞应激反应。山东MEM a培养基进口

    1)、初代培养：绣球外植体，将叶片剪去，自来水冲洗干净。在超净工作台上把已经冲洗干净的外植体浸入75％酒精中消毒30s，用无菌水冲洗3～4次。使用白猫漂白水和无菌水按1：4的体积比配制消毒液，将外植体放入消毒液浸泡40min，其中白猫漂白水为上海白猫(集团)有限公司生产的“白猫”牌家用漂白水。消毒完成，将外植体接种到诱导培养基中培养，建立无菌再生系统，诱导培养环境为光照强度1500lx条件下，温度25℃，光照时间16h；黑暗条件下，温度23℃，光照时间8h，培养6～8周。其中诱导培养基为ms+～～，诱导培养基的ph值为。(2)、继代培养：以建立的无菌再生系统为对象，将无菌外植体转接到增殖培养基，其中增殖培养基为ms+～～，培养环境为光照强度1500lx条件下，温度25℃，光照时间16h；黑暗条件下，温度23℃，光照时间8h，培养8～12周。每隔8～12周转接入新的增殖培养基，增殖培养基的ph值为。(3)、生根培养：经过继代培养的绣球组培苗，取2～3cm的顶芽，放入生根培养基，其中生根培养基为1/2ms+～～，生根培养基的ph值为。诱导培养环境为光照强度1500lx条件下，温度25℃，光照时间16h；黑暗条件下，温度23℃，光照时间8h，培养8～12周。。山东MEM a培养基进口

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