1)、初代培养:绣球外植体,将叶片剪去,自来水冲洗干净。在超净工作台上把已经冲洗干净的外植体浸入75%酒精中消毒30s,用无菌水冲洗3~4次。使用白猫漂白水和无菌水按1:4的体积比配制消毒液,将外植体放入消毒液浸泡40min,其中白猫漂白水为上海白猫(集团)有限公司生产的“白猫”牌家用漂白水。消毒完成,将外植体接种到诱导培养基中培养,建立无菌再生系统,诱导培养环境为光照强度1500lx条件下,温度25℃,光照时间16h;黑暗条件下,温度23℃,光照时间8h,培养6~8周。其中诱导培养基为ms+~~,诱导培养基的ph值为。(2)、继代培养:以建立的无菌再生系统为对象,将无菌外植体转接到增殖培养基,其中增殖培养基为ms+~~,培养环境为光照强度1500lx条件下,温度25℃,光照时间16h;黑暗条件下,温度23℃,光照时间8h,培养8~12周。每隔8~12周转接入新的增殖培养基,增殖培养基的ph值为。(3)、生根培养:经过继代培养的绣球组培苗,取2~3cm的顶芽,放入生根培养基,其中生根培养基为1/2ms+~~,生根培养基的ph值为。诱导培养环境为光照强度1500lx条件下,温度25℃,光照时间16h;黑暗条件下,温度23℃,光照时间8h,培养8~12周。。无酚红培养基适用于对酚红敏感的实验。北京培养基代理商
三)、试验结果:初代培养:使用本发明的消毒方法,消毒成功率能达到80%,诱导培养基萌芽率能达到90%,可以成功建立无菌再生体系。继代培养:使用本发明的增殖培养基,绣球组培苗增殖倍率能够达到8~10倍,组培苗高度一致,生长健壮。生根培养:使用本发明的生根培养基,绣球组培苗生根率能够达到95%,根系发达,健壮,可以成功用于移栽大棚。本发明所指ms培养基是murashige和skoog研制的培养基,其成分配方表见表1。1/2ms培养基是指大量元素含量为ms培养基的一半,其他成分用量相同。表1、ms培养基成分表本发明涉及的植物生长调节剂有:6-ba—6-苄氨基嘌呤;ga3—赤霉素;iba—吲哚丁酸,naa—萘乙酸。本发明中的诱导培养基、增殖培养基和生根培养基均为液体培养基。本具体实施方式的实施例均为本发明的较佳实施例,并非依此限制本发明的保护范围,故:凡依本发明的结构、形状、原理所做的等效变化,均应涵盖于本发明的保护范围之内。重庆MEM a培养基生产企业减血清培养基减少了血清对细胞的影响。
才能满足新细胞合成、细胞代谢等生化反应所需要的物质和能量。细胞培养基的主要成份是水、氨基酸、维生素、碳水化合物、无机盐和其它一些辅助营养物质等。此外,还可能含有血清、血清替代成分、pH指示剂等。水是细胞的主要成份,也是细胞赖以生存的主要环境。细胞培养液中90%以上的成份是水。细胞对水的品质非常敏感,水的品质将直接影响细胞培养的效果。而水中通常含有重金属、氯、磷、有机物、热原等污染物,细胞培养用水须经过纯化,品质应符合***典注射用水标准或者超纯水的标准。能源和碳源是用于维持细胞生命和支持细胞生长,主要包括糖、糖酵解的产物和谷氨酰胺,其他氨基酸是次要的能源和碳源物质。细胞能够利用的糖类主要是六碳糖,目前大多体外培养时选取葡萄糖作为细胞的主要碳源和能量来源,因此细胞培养基中基本都含有葡萄糖,含量一般为5~25mmol/L。在葡萄糖浓度较高时,细胞主要通过扩散作用吸收葡萄糖,细胞膜内外的葡萄糖浓度梯度是细胞吸收葡萄糖的动力;在葡萄糖浓度较低时,主要由钠离子推动的高亲和性转运过程使细胞摄取葡萄糖。葡萄糖进入细胞后参与糖酵解、核酸代谢、糖原合成、能量代谢以及一些氨基酸的合成。与体内的能量供应途径不同。
mgso4·7h2o20-200mg/l,2-羟基乙胺10-50mg/l,cecl31-20mg/l,mnso4·h2o1-10mg/l,feso4·7h2o1-10mg/l,vb15-50mg/l,生物素1-10μg/l;将各原料搅拌均匀后,调节ph为6-7,121℃**,自然冷却,制得发酵培养基a。更推荐地,所述发酵培养基a的制备方法为:取各原料:葡萄糖80g/l,酵母浸膏20g/l,k2hpo42g/l,mgso4·7h2o50mg/l,2-羟基乙胺40mg/l,cecl310mg/l,mnso4·h2o3mg/l,feso4·7h2o3mg/l,vb110mg/l,生物素7μg/l;将各原料搅拌均匀后,调节ph为,121℃**15min,自然冷却,制得发酵培养基a。推荐地,所述发酵培养基b的制备方法为:取各原料:琥珀酸1-10g/l,尿素1-5g/l,壳聚糖20-100mg/l;将各原料搅拌均匀后,调节ph,**,制得发酵培养基b;更推荐地,所述发酵培养基b的制备方法为:取各原料:琥珀酸5g/l,尿素2g/l,壳聚糖80mg/l;将各原料搅拌均匀后,调节ph为,121℃**15min,自然冷却,制得发酵培养基b。与现有技术相比,本发明取得的有益效果主要包括但是并不限于以下几个方面:本发明发酵培养基采用两部分组成,发酵培养基a侧重于菌株增殖的提升,发酵培养基b侧重于谷氨酸的合成和分泌;前期细胞增殖时。DMEM培养基在实验室中广泛应用于细胞实验。
c、结果为:在用未调ph液体培养基进行培养时,整体长势从优至弱分别为1/2cs未调ph液体培养基、cs未调ph液体培养基、1/2ms未调ph液体培养基、ms未调ph液体培养基;在用ph调至,整体长势从优至弱分别为1/、、1/、;不论是否调ph至,cs液体培养基培养的马铃薯幼苗长势均优于ms液体培养基;不论是否调ph至,1/2cs液体培养基培养的马铃薯幼苗长势均优于1/2ms液体培养基。如图9和图10所示。说明,1/2cs液体培养基和cs液体培养基应用于植物水培时,不论是否调节ph至,均能获得很好的培养效果,克服了传统液体培养基必须调节ph后才适用于植物水培的缺点。**后说明的是,以上实施例*用以说明本发明的技术方案而非限制,尽管参照较佳实施例对本发明进行了详细说明,本领域的普通技术人员应当理解,可以对本发明的技术方案进行修改或者等同替换,而其不脱离本发明技术方案的宗旨和范围,则均应涵盖在本发明的权利要求范围当中。无血清培养基有助于维持细胞的纯净生长环境。青海DMEM高糖培养基哪个好
MEM培养基适合多种类型的细胞培养实验。北京培养基代理商
二、基本原理麦芽汁培养基和马铃薯葡萄糖培养基被***用于培养酵母菌品牌:安捷伦型号:1260Lnifntiy参考报价:20万-50万:培养基性能测试实用指南SN/:培养基性能测试实用指南品牌:安捷伦型号:1260Lnifntiy参考报价:20万-50万Systec培养基制备器产品描述SystecMediaPrep培养基制备器可精确便捷地对微生物培养基进行快速制备和**。Systec培养基制备器,不同型号可用于制备10-120升的培养基*操作简单,安全可靠温度和压力严格控制锁定装载舱口和外部盖品牌:Systec型号:MediaPrep-120参考报价:面议转2433:实验室培养基制备质量保证通则:实验室培养基制备质量保证通则.pdf品牌:安捷伦型号:1260Lnifntiy参考报价:20万-50万培养基的制备及**1.掌握微生物实验室常用玻璃器皿的清洗及包扎方法。2.掌握培养基的配置方法。3.掌握干热**和高压蒸汽**的操作方法。品牌:安捷伦型号:1260Lnifntiy参考报价:20万-50万培养基生产新理念:一键式制备德国systec发明一款专门用于培养基**制备的特殊**锅――培养基制备器。自动分装:培养基制备后通过硅胶管道连接分装系统进行全自动分装,整个分装系统由微电脑主机精确控制,并内置紫外灯**,保证分装真正无菌状态。北京培养基代理商
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