使用萤火虫荧光素酶(Fluc)作为报告基因和 D-荧光素作为底物的生物发光成像(BLI)是目前应用*****的技术。将总信号强度相对于 D-荧光素注射后的时间进行绘制,以生成时间-强度曲线。除了峰值信号外,还确定注射 D-荧光素后固定时间点(5、10、15 和 20 分钟)的信号作为峰值信号的替代。给定时间-强度曲线中的信号针对曲线中的峰值信号进行归一化,以表示 D-荧光素注射后时间变化的模式[3]。每克体重注射 10 μL D-荧光素(腹膜内或静脉注射)储备液:对于 20 g 小鼠,标准 150 mg/kg 注射通常约为 200 μL。在室温下解冻 D-荧光素(钾盐或钠盐)并溶解在 dPBS(不含钙或镁)中,**终浓度为 15 mg/mL。通过吸取 5-10 mL 无菌水来预湿 0.22 μm 过滤器。动物体内光学成像主要采用生物发光与荧光发光两种技术。四川济南荧光染料
纳米粒子纳米颗粒是指尺寸在1到100纳米之间的颗粒。由于它们的小尺寸,纳米粒子通常用于不同类型的细胞和组织的荧光成像。当今生物成像中常用的一些纳米材料包括碳点、贵金属纳米颗粒、聚合物点、量子点和荧光掺杂二氧化硅等。在成像中,与其他分子荧光团和探针相比,纳米颗粒/纳米材料具有多种优势,使其成为理想的选择。除了提高亮度外,纳米粒子是惰性的并且往往分布均匀,这有助于在成像过程中获得更好的结果。此外,与各种分子荧光团相比,纳米颗粒和纳米材料没有细胞毒性,并且不受非特异性结合问题的影响。由于这些特性,大多数荧光纳米颗粒(染色纳米颗粒)可以内化到细胞/组织中,并容易靶向给定部位。吉林蛋白质荧光染料PI常用于细胞凋亡(apoptosis)或细胞坏死(necrosis)的检测,常用于流式细胞仪分析。
管可用于实验室的荧光团数量众多,但这些染料通常属于以下三组之一:荧光染料:这些是用于在体外标记生物相关分子的小型有机天然或合成荧光分子。该组中的一些荧光染料包括荧光素、溴化乙锭和花青。荧光蛋白:这些是较大的、生物制造的蛋白质,由于它们的大分子结构而发出荧光。GFP、RFP和YFP是属于该组的一些染料。量子点:这些高荧光合成纳米晶体由半导体材料制成。随着荧光基本特性的广泛应用和该领域的显着进步,已经针对特定应用和仪器开发和优化了数百种活性荧光染料。同样,多年来,大量复杂的荧光技术(例如,FRET、TRF、FP、FRAP、FACS、FCS)也在不断发展。
荧光染料,由于灵敏度高,操作方便,逐渐取代了放射性同位素作为检测标记,其广泛应用于荧光免疫,荧光探针,细胞染色等。包括特异性的DNA染色,用于染色体分析、细胞周期、细胞凋亡等相关研究。另有很多核酸染料在多色染色系统中是非常有用的复染剂,可作为背景对照,标记细胞核使细胞内结构的空间关系一目了然。荧光标记的单克隆抗体技术为流式细胞仪在研究细胞膜和细胞内各种功能性抗原、**基因蛋白等领域扩展了无限的应用空间。荧光探针可以通过蛋白质交联剂共价结合在单克隆抗体上。免疫荧光标记**常用的染料有异硫氰酸荧光素(fluoresceinisothiocyanate,FITC)、藻红蛋白(PE)以及AlexaFluor系列染料等。核酸荧光染料对细胞核染色后定量测量细胞所发出的荧光强度,就可以确定细胞核中DNA、RNA的含量,并可以对细胞周期和细胞的增殖状况进行分析。有多种荧光染料可以对细胞中的DNA或RNA染色,常用的DNA染料包括碘化丙啶(PI)、DAPI、Hoechst33342等,RNA染料有噻唑橙、吖啶橙等。Super Fluor 488(效果同Alexa Fluor 488)标记蛋白。
绿色荧光染料ICG的主要作用吲哚菁绿(IndocyanineGreen,简称ICG)是一种广泛应用于医学和生物领域的荧光染料。它具有独特的化学结构和性质,因此被***用于荧光显像、光热***、生物识别和药物输送等领域。吲哚菁绿的绿色溶解度是其在水中的溶解度,它是衡量该染料在溶液中的溶解能力的重要指标。吲哚菁绿具有较好的水溶性,可以在水中迅速溶解,形成稳定的溶液。这一特性使得吲哚菁绿在医学诊断和***中得到广泛应用。吲哚菁绿的主要作用之一是在医学影像学中作为造影剂。由于其具有强烈的荧光特性,能够在近红外光谱范围内吸收和发射光线,因此被***用于近红外荧光显像技术中。在临床中,医生可以通过注射吲哚菁绿溶液,利用近红外光源对患者进行显像,以观察和评估病变部位的血液灌注情况、淋巴引流途径等。这为医生提供了非侵入性、实时性的影像信息,有助于准确诊断和指导***。此外,吲哚菁绿还在光热***中发挥着重要作用。光热***是一种利用光热效应杀灭肿瘤细胞的方法。吲哚菁绿可以吸收近红外光并将其转化为热能,从而使附近的肿瘤细胞受热破坏。这项技术在*****中具有巨大潜力,因为它可以实现高度精细的***,同时比较大限度地减少对周围正常组织的损伤。CY5荧光染料是一种被广泛应用于生物分子检测和荧光成像等领域的高效、稳定的荧光标记试剂。安徽深圳荧光染料
南京星叶生物荧光染料标记蛋白。四川济南荧光染料
CY5荧光染料是一种被广泛应用于生物分子检测和荧光成像等领域的高效、稳定的荧光标记试剂。它具有出色的荧光性能和良好的生物相容性。Cy5属于小分子染料,其*大发射波长为670nm,其标记的抗体适用于所有配备633nm氩离子激光器的流式细胞仪,检测通道一般是FL4通道。除流式细胞术外,Cy5同样适用于传统的荧光显微镜技术。需注意的是,Cy5与单核细胞和粒细胞的非特异性结合多,实验结果容易出现假阳性。Cy5.5含有一个游离胺基,可与多种官能团共轭,包括NHS酯和环氧化合物。激发和发射的最大值分别为678nm和694nm。Cy5.5已应用于各种基于荧光的实验中。Cy5.5是一种远红色(和近红外)发射染料,是荧光测量的理想选择。Cy5.5具有成本效益,且其标记化学操作简单,适合于潜在的***药物开发Cy5.5标记因子VIIa是用来想象**的。用这些靶向蛋白标记的Cy5.5在**异种移植物上特异定位至少14天,但未结合的Cy5.5不能定位于任何异种移植或***。这种**血管内皮细胞中抗组织因子的成像方法可用于检测原发性**和转移以及监测体内***反应[1]。pH/温度敏感磁性纳米凝胶结合Cy5.5标记乳铁蛋白(Cy5.5-Lf-MPNA纳米凝胶)是一种有前途的胶质瘤术前MRI和术中荧光成像的对比剂[2]四川济南荧光染料
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